标本采集量不足对凝血检测项目结果的影响

李 佳，吴宗勇，齐 军

（国家癌症中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院检验科，北京100021）

·实验室质量管理·

标本采集量不足对凝血检测项目结果的影响

李 佳，吴宗勇，齐 军

（国家癌症中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院检验科，北京100021）

目的 分析标本采集量不足对凝血检测项目结果的影响。方法 收集采集量不足及足量采血的对照组标本共23对，分别检测凝血酶原时间（PT），活化部分凝血活酶时间（APTT），凝血酶时间（TT），纤维蛋白原（FIB），D-二聚体（DDimer）和纤维蛋白/纤维蛋白原降解产物（FDP）的含量。结果 采血量不足组与对照组相比PT、APTT、TT显著延长，FIB和D-Dimer含量显著降低，而FDP含量没有明显变化。结论 凝血标本采集量不足会影响检测结果的准确性。

标本采集量； 凝血酶原时间； 活化部分凝血活酶时间； 凝血酶时间； 纤维蛋白原； D-二聚体

凝血系统检测是临床常用的血栓与止血筛查试验，是术前筛查凝血系统疾病、观察抗凝剂用量、辅助诊断出血性疾病或血栓性疾病的重要检测项目。在检测的过程中，试验结果受多方面因素的影响，如患者的状态，标本采集是否合格，标本采集后的放置时间、离心速度、抗凝剂与试剂、仪器设备状态等。本文主要针对凝血标本采集量不足对试验结果的影响进行研究。

材料与方法

1 研究对象

挑选2014年1月至6月采血量不足的枸橼酸钠抗凝标本，采血量约为1.8mL至2.1mL之间，枸橼酸钠为0.3mL，因此，采血量与抗凝剂的比例约为6∶1至7∶1之间，立即通知护士重新采集足量标本（采

血量为2.7mL，与抗凝剂比例为9∶1）1份作为对照。确保两次采血之间患者未进行治疗，且要求离心后标本无溶血、脂血及黄疸。同一患者的两份标本在同一天尽可能短的时间间隔内检测完成。本研究共收集配对标本23对。

2 实验试剂与方法

所有标本的凝血检测项目均使用Sysmex公司的CA7000全自动血液凝固分析仪。凝血酶原时间，活化部分凝血活酶时间，凝血酶时间，纤维蛋白原，D-二聚体的检测试剂为德国Siemens公司生产，纤维蛋白/纤维蛋白原降解产物的检测试剂为日本积水医疗株式会社生产。所有试剂均为检测当天配制，检测时仪器运行正常，室内质控在控，保证了结果的可靠性。

3 数据统计与分析

采用SPSS19.0统计软件对数据进行统计分析，首先进行正态性检验，符合正态分布的数据两组间比较采用配对t检验；不符合正态分布的数据两组间比较采用Wilcoxon Signed Ranks检验。P＜0.05认为有统计学意义。

结 果

对采血量不足组与足量采集的对照组分别进行凝血系统检测，检测项目包括凝血酶原时间（prothrombin time，PT），活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time，APTT），凝血酶时间（thrombin time，TT），纤维蛋白原（fibrinogen，FIB），D-二聚体（D-Dimer）和纤维蛋白/纤维蛋白原降解产物（fibrin/fibrinogen degradation products，FDP）。23对标本的检测结果见表1。

表1 采血量不足组与对照组凝血系统检测结果

从表1的结果可以看出，采血量不足组与对照组相比PT、APTT、TT显著延长，FIB和D-Dimer的含量显著降低，而FDP的含量没有明显变化。

讨 论

临床实验室检测的质量状况受到实验室内外的广泛关注，其检测结果的准确性和及时性会影响临床医生对患者疾病的诊治。因此，实验室要进行全面的质量管理，建立全面质量管理体系，而这一体系中涉及到的完成检验报告的全过程常被分为3个阶段，即分析前的质量控制、分析中的质量控制及分析后的质量控制［1］。其中分析前的质量控制是非常重要的环节，它是指从临床医生开出医嘱开始，到分析检验程序启动，主要包括标本的采集、保存及运送过程，是实验室能及时发出准确合格检验报告的前提。随着科学技术的不断发展，实验室检测的自动化程度越来越高，分析过程中的质量控制技术也不断发展，这使得分析过程中的差错明显减少，而分析前的差错就凸显出来，有研究显示可占到临床实验室所有差错的60%～90%［2］。而在分析前差错中，由于标本采集时不正确，导致的差错可达到60%左右［3］。标本采集的主要问题包括抗凝剂选择错误，采血量过多或过少，采血过程不当造成溶血、血液凝固或细菌污染等。而本文主要讨论采血量不足对凝血系统检测结果带来的影响。

从表1的结果可以看出，采血量不足组与对照组相比PT、APTT、TT显著延长，而FIB和D-Dimer含量显著降低，提示采血量不足影响了检测过程中血液凝固的过程以及后来的纤溶过程。

血液凝固是一个连续的、复杂的反应过程，其中钙离子几乎参与凝固反应的每一个步骤，起着非常重要的作用。国际血液学标准化委员会推荐用于凝血系统检测的标本应采用抗凝剂为109mmol/L的枸橼酸钠，其与全血的比例为1∶9［4］。有报道显示抗凝剂浓度增加或减少对凝血因子有直接的影响，当血量增加0.5mL时，可使凝固时间缩短，而减少0.5mL时，会使凝固时间延长。枸橼酸钠能有效地阻止凝血因子Ⅴ、Ⅷ的降解，还能通过络合作用，降低血清钙离子的浓度，阻断钙离子的作用，进而阻断血液凝固的过程，但这种作用是可逆的，只要再加入足量的钙离子或者钙离子相对过量，凝血功能则能立即恢复正常。当抗凝剂与全血量的比例合适时，枸橼酸钠与钙离子比例恰当，钙离子完全被枸橼酸钠络合封闭，凝血过程被阻断；当全血量不足时，枸橼酸钠相对过量，但在测定PT、APTT时所加入的钙离子是定量的，测定时过量的枸橼酸钠可络合部分加入的钙离子，造成凝血过程中钙离子不足，从而导致PT、APTT结果延长［5］。在凝血的过程中血浆会发生浑浊度的改变，这一改变可以造成散射光强度的改变，FIB的检测原理就是利用了这一改变，通过对散射光强度的测定作出凝血曲线，得出凝血时间，再通过凝血时间求出FIB的含量，凝血时间的长短与FIB的含量呈负相关。当标本量不足时，凝血时间延长，从而使FIB的检测含量下降。另外，抗凝剂过多会造成血液的稀释，影响检测结果的准确性，这可能也是FIB水平下降的一方面原因。TT是指在血浆中加入标准化的凝血酶后血液凝固的时间，即纤维蛋白原转化成纤维蛋白凝块的时间。采血量不足造成FIB含量降低，使得FIB转化成纤维蛋白凝块的时间延长，故造成TT延长。而D-二聚体和FDP检测方法均为免疫比浊法，采血量不足对它们的影响主要是抗凝剂的稀释作用，本研究中D-二聚体含量显著降低而FDP没有显著变化，提示采血量不足对FDP检测的影响较小。

总之，凝血系统检测标本采血量不足，尤其是低于刻度80%以下时，会造成血液与抗凝剂比例不合适，从而影响 PT、APTT、TT、FIB和D-Dimer检测结果的准确性，进而误导临床医生，导致误诊或采取错误的治疗手段。因此，我们要重视血液标本的采集，即使使用最先进的仪器设备，有最高的检验技术水平，也不能弥补标本质量不合格造成的误差和错误。据报道，不准确的检验结果有大约80%可溯源至分析前程序的不规范，而最重要的则为标本采集的不规范、不准确［6］。对于我们临床实验室来说，由于标本采集均为医生或护士来完成，因此，我们应对相关人员进行宣讲培训，引起他们的高度重视，尽量减少分析前因素对结果造成的影响，使我们发出的报告能更准确，更好的指导临床医生的诊疗工作。

［1］丛玉隆，邓新立.医学实验室全面质量管理体系的概念与建立.临床检验杂志，2004，19（5）：305-309.

［2］Carraro P，Plebani M.Errors in a stat laboratory：types and frequencies 10 years later.Clin Chem，2007，53（7）：1338-1342.

［3］Kalra J.Medical errors：impact on clinical laboratories and other critical areas.Clin Biochem，2004，37（12）：1052-1062.

［4］李艳，包安裕.应重视实验室检查中抗凝剂的使用.中华检验医学杂志，2008，31（1）：18.

［5］徐菡，邸平，夏全成，等.标本血量不足对凝血酶原时间及活化部分凝血活酶时间检测结果的影响.检验医学与临床，2014，11（16）：2201-2202.

［6］郭光辉，束振华.影响凝血四项测定结果的分析前因素.海南医学，2010，21（24）：108-109.

（朱清峰编辑）

The Influence of Sample Collection Volume on the Results of Blood Coagulation Tests

LI Jia，WU Zong-Yong，QI Jun
（Department of Clinical Laboratory，National Cancer Center／Cancer Hospital，Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College，Beijing 100021，China）

Objective To analyze the effect of sample collection volume on the results of blood coagulation tests.Methods A total of 23 pairs of samples were collected，one group was collected with insufficient sample collection volume，and the control group was collected with sufficient sample collection volume.Prothrombin time（PT），activated partial thromboplastin time（APTT），thrombin time（TT），fibrinogen（FIB），DDimer and fibrin／fibrinogen degradation products（FDP）were detected，respectively.Results The results of PT，APTT and TT in the group of insufficient sample collection volume were longer than those in the control group.And the values of FIB and D-Dimer were less than the control group.There was no significant difference in FDP between groups.Conclusion Insufficient sample collection volume will affect the accuracy of the results of blood coagulation tests.

Sample collection volume； Prothrombin time； Activated partial thromboplastin time；Thrombin time； Fibrinogen； D-Dimer

10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2016.11.034

2016-05-18；

2016-07-01

中国癌症基金会北京希望马拉松专项基金（LC2015A04）

李佳（1982—），女，硕士，主管技师。Tel：010-87788590；E-mail：polarbearli@163.com

齐军（1956—），女，主任医师。Tel：010-87788448；E-mail：qijun5610@126.com