Fibulin-2在诊断乳腺基底膜连续性的准确性研究

谭好升,章佳新,符德元,祝玉祥

(江苏省苏北人民医院 甲乳外科,江苏 扬州,225001)



Fibulin-2在诊断乳腺基底膜连续性的准确性研究

谭好升,章佳新,符德元,祝玉祥

(江苏省苏北人民医院 甲乳外科,江苏 扬州,225001)

目的 探讨Fibulin-2在诊断乳腺基底膜连续性方面的准确性。方法 150例乳腺癌患者的标本经Fibulin-2染色来判断基底膜的连续性，并经过病理科医师进行免疫组化诊断，比较两种方法的诊断结果。结果 Fibulin-2在诊断乳腺癌及正常乳腺组织基底膜连续性方面的准确度分别为89.3%、92.7%,敏感度为90.4%、98.5%,特异度分别为87.5%、81.3%。结论 Fibulin-2对乳腺基底膜连续性的判断具有很高的准确性。

乳腺; 基底膜; 连续性; Fibulin-2

乳腺肌上皮细胞层的缺失是乳腺癌发生浸润的重要标志，许多肌上皮细胞的标志物被用来鉴别乳腺癌是否发生浸润[1-3]。既往多采用免疫组织化学法检测p63、Caponin 等肌上皮细胞标记蛋白和基底膜组分蛋白Ⅳ型胶原蛋白来判断基底膜是否完整，从而辅助诊断导管内原位癌(DCIS)是否伴有微浸润。由于标记物的敏感性、特异性和肌上皮细胞的不连续性存在差异，导致该方法诊断DCIS是否伴间质微浸润仍存在大量的不足[4]。本实验通过检测乳腺组织中Fibulin-2蛋白来判断基底膜的完整性，评价其在诊断基底膜完整性中的价值，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2011年9月—2015年12月在江苏省苏北人民医院手术治疗、资料完整的乳腺癌150例，并收集相应病例的癌旁毗邻正常乳腺组织(癌旁组织指距癌灶大于2 cm的组织)。所有病例均经病理证实基底膜是否完整。患者年龄23～85岁，平均46.5岁。患者的临床病理资料见表1。

1.2 常规基底膜完整性检测

所有病例均经2名有经验的病理科医师进行基底膜完整性的检测，包括常规石蜡切片、基底膜成分检测(Ⅳ型胶原蛋白、层粘连蛋白)及肌上皮细胞层检测(p63)。三者反复确认基底膜的完整性。

1.3 Fibulin-2检测

应用免疫组织化学方法检测Fibulin-2在乳腺组织中的表达，其完整性的判断标准为导管周围有连续的线状染色条带存在，否则为不完整。结果同样经2名有经验的病理科医师进行判断。

表1 乳腺癌患者临床病理资料

1.4 准确性的计算

以常规检测方法的结果作为比较标准，得出Fibulin-2在判断基底膜完整性时的真阳性、假阳性、真阴性、假阴性数，然后计算出Fibulin-2在判断乳腺癌及正常乳腺组织2组标本基底膜完整性的准确度、敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值。

2 结 果

作者对Fibulin-2及常规检测方法的结果进行详细记录并比较,Fibulin-2在判断150例乳腺癌基底膜完整性的结果为：真阳性85例，假阳性7例，真阴性49例，假阴性9例，阳性预测值92.4%,阴性预测值84.5%,敏感度90.4%,特异度87.5%,准确度89.3%。在150例正常乳腺组织的相应结果为136例、6例、3例、5例、97.8%、86.7%、98.5%、81.3%、92.7%。见表2、图1。

表2 Fibulin-2与常规检测方法对比

图1 Fibulin-2及常规检测方法对基底膜连续性的判断

3 讨 论

原位癌的主要特点是肿瘤细胞局限在乳腺中小导管内或小叶内而没有突破基底膜。一旦在原位癌周围的间质中见到单个或簇状的癌细胞间质浸润就被称为微浸润，这种情况常常较难诊断，特别容易漏诊和误诊[5]。国外文献[6]报道在乳腺癌空芯针活检中由于无法判断基底膜的完整性，乳腺癌微浸润的漏诊、误诊率可达38%。这必然又对患者的后续治疗方案产生非常大的影响。这种情况下病理科医生往往进行腺上皮和肌上皮的双重染色，其中腺上皮染色可显示癌细胞杂乱分布，而肌上皮染色可判断癌细胞是否浸润到了间质[7]。因此肌上皮细胞层的完整性就成了判断基底膜是否完整(亦即判断有无浸润)的一个重要方法。常用的肌上皮细胞层标志物有p63、SMA等。在部分导管内原位癌中p63、SMA表现出肌上皮细胞层的不连续性甚至部分缺失[8-9],这让病理科医师判断基底膜是否完整遭遇了巨大挑战。除了肌上皮细胞层外，基底膜成分，如Ⅳ型胶原蛋白、层黏连蛋白等，亦可用于判断基底膜的完整性，但是大量文献报道这些基底膜成分的表达有很大的不稳定性，在判断基底膜完整性时很不可靠[10]。

Fibulin-2是Kluge等[11]首先从小鼠成纤维细胞cDNA库克隆出来的，主要表达于血管壁、基底膜等。研究[12-14]发现，Fibulin-2可以与多种细胞外基质蛋白，特别是基底膜成分蛋白相互作用，参与抑癌作用、损伤修复、细胞运动、信号转导等过程，在维持细胞外基质的稳定和抑制肿瘤细胞的浸润与转移中发挥作用。本研究发现Fibulin-2表达于基底膜周围，呈连续性表达，证明Fibulin-2与基底膜成分相互作用，因此其表达可用于判断基底膜的存在。相比于p63等肌上皮细胞的不连续性表达，由于Fibulin-2直接表达于基底膜周围，因此其可以作为直接标志物来判断基底膜的完整性，具有很高的可靠性。同时由于Ⅳ型胶原蛋白等基底膜成分往往表达不稳定，在很多时候虽然其表达缺失但是仍然无法判断基底膜是否完整，而Fibulin-2却能够在绝大多数基底膜周围连续表达，具有很高的稳定性，在判断基底膜完整性方面具有天然优势。通过与p63、Ⅳ型胶原蛋白等传统标志物的比较，作者发现Fibulin-2在判断基底膜完整性方面具有很高的敏感性和特异性，能够准确地鉴别出癌细胞是否有浸润，特别是原位癌周围的微小浸润。因此,Fibulin-2可以作为肌上皮细胞层标志物的有益补充，完全可以用来判断基底膜是否完整，并可进一步鉴别癌细胞是否有浸润以协助临床医生制定患者的后续治疗方案，具有极高的临床应用前景。

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Accuracy of Fibulin-2 in diagnosis of continuity of breast basement membrane

TAN Haosheng,ZHANG Jiaxin,FU Deyuan,ZHU Yuxiang

(DepartmentofThyroidandBreastSurgery,SubeiPeople′sHospital,Yangzhou,Jiangsu,225001)

Objective To explore the accuracy of Fibulin-2 in the diagnosis of the continuity of the breast basement membrane. Methods The continuity of the basement membrane of 150 patients with breast cancer was determined by Fibulin-2 and the pathological immunohistochemical diagnosis respectively. Diagnosis results were compared between the two groups. Results The diagnostic accuracy of Fibulin-2 in breast cancer and adjacent normal breast tissue was 89.3% and 92.7% respectively. The sensitivity was 90.4% and 98.5%,and the specificity was 87.5% and 81.3% respectively. Conclusion Fibulin-2 has high accuracy in judging the continuity of the breast basement membrane.

breast; basement membrane; continuity; Fibulin-2

2016-03-16

国家自然科学基金资助项目(81172508)

符德元,E-mail: fdyjsyz@163.com

R 655.8

A

1672-2353(2016)21-052-03

10.7619/jcmp.201621016