非肌层浸润性膀胱癌患者血清和尿液BLCA-1含量的变化和意义

邱　玙，李红阳，王志勇，郭　利（.承德医学院，河北承德　067000；2.承德医学院附属医院；.承德市双滦区人民医院）

非肌层浸润性膀胱癌患者血清和尿液BLCA-1含量的变化和意义

邱玙1，李红阳1，王志勇2△，郭利3
（1.承德医学院，河北承德067000；2.承德医学院附属医院；3.承德市双滦区人民医院）

目的:探讨非肌层浸润性膀胱癌患者血清和尿液膀胱癌特异性核基质蛋白-1（bladder cancer specific antigen-1，BLCA-1）含量的变化和意义。方法：选取22例非肌层浸润性膀胱癌患者作为实验组，23例前列腺增生患者作为前列腺增生组，21例健康体检者作为正常组。采用ELISA法检测所有受试者血清和尿液样本中BLCA-1的含量，并计算敏感度和特异度。结果：实验组患者尿液BLCA-1的含量明显高于前列腺增生组和正常组（P＜0.05）；尿液BLCA-1诊断非肌层浸润性膀胱癌的敏感度为59%（13/22），特异度为93%（41/44）。实验组和前列腺增生组患者血清BLCA-1含量明显高于正常组（P＜0.05）；血清BLCA-1诊断非肌层浸润性膀胱癌的敏感度为86%（19/22），特异度为56%（24/43）。结论：BLCA-1作为非肌层浸润性膀胱癌的新型检测指标，具有较高的敏感度和特异度，值得深入研究。

非肌层浸润性膀胱癌；BLCA-1；核基质蛋白；敏感度；特异度

膀胱肿瘤是泌尿系最常见的肿瘤之一，世界范围内膀胱肿瘤的发病率居恶性肿瘤的第11位[1]。在我国，膀胱肿瘤的发病率居恶性肿瘤发病率的第7位。目前已经发现的，如膀胱肿瘤蛋白（BTA）、核基质蛋白22（NMP22)等检测指标诊断非肌层浸润性膀胱癌的敏感度、特异度均不理想[2-4]。非肌层浸润性膀胱癌是膀胱癌的早期阶段，肿瘤浸润深度局限于膀胱黏膜层和黏膜下层，临床症状尚不明显，因此，需要找到一种敏感度、特异度均较高的检测指标，用于非肌层浸润性膀胱癌的早期诊断或高危人群筛查，为非肌层浸润性膀胱癌的临床诊断提供帮助。1996年Getzenberg等[5]发现，膀胱肿瘤特异性核基质蛋白-1（BLCA-1）可特异性表达于膀胱癌患者肿瘤组织和尿液中；2005年Myers-Irvin等[6]对尿液BLCA-1的含量进行检测，发现BLCA-1对膀胱癌的诊断具有较高的敏感度和特异度，具有一定的研究价值；2015年Feng等[7]对肿瘤组织（含肌层浸润性膀胱癌和非肌层浸润性膀胱癌）中BLCA-1的含量进行检测，发现BLCA-1与膀胱癌的分期具有一定的相关性。但上述研究均未检测膀胱癌患者血清中BLCA-1的含量。本研究拟采用ELISA法同时检测非肌层浸润性膀胱癌患者尿液和血清中BLCA-1的含量，以进一步探讨BLCA-1在非肌层浸润性膀胱癌中的生物学行为，确定其诊断非肌层浸润性膀胱癌的敏感度、特异度和cut-off值，为BLCA-1用于非肌层浸润性膀胱癌的早期诊断和术后随访提供参考。

1　材料与方法

1.1研究对象选取2014年3月至2015年3月，于承德医学院附属医院就诊且术后病理回报为非肌层浸润性膀胱癌的患者22例作为实验组，男16例、女6例，年龄43-83（63±11）岁；选取同期前列腺增生患者23例作为前列腺增生组，均为男性，年龄52-81（64±7）岁；同期健康体检者21例作为正常组，其中男10例、女11例，年龄21-66（41±14）岁。所有受试者入组前7天内均未接受如导尿、膀胱镜检查等相关操作，并接受承德医学院附属医院常规检查以排除其它泌尿系肿瘤或免疫系统疾病。

1.2样本采集采集受试者入院后第一天晨起6点空腹静脉血、中段尿液各5-10ml，室温下静置1h，3000r/s离心15min，取上清液分装，密封后于-80℃冰箱保存待测。各试剂使用前室温下平衡30min，备用。采用ELISA法分别检测尿液、血清中BLCA-1的含量。

1.3统计分析应用SPSS 19.0软件分析处理数据，计量资料的比较采用单因素方差分析，两两比较采用q检验，P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1尿液和血清中BLCA-1的含量实验组患者尿液BLCA -1含量明显高于前列腺增生组和正常组，前列腺增生组患者尿液BLCA-1含量明显高于正常组（P＜0.05）。 实验组和前列腺增生组患者血清BLCA-1含量比较差异无统计学意义（P＞0.05），但均明显高于正常组（P＜0.05）。见附表、图1:

附表　尿液和血清中BLCA-1的含量（，ng/ml）

附表　尿液和血清中BLCA-1的含量（，ng/ml）

与正常组比较：*P＜0.05；与前列腺增生组比较：△P＜0.05

组别　例数　尿液　血清实验组　22　1.64±2.40*△　5.48±2.52*前列腺增生组　23　0.71±0.39*　5.61±2.25*正常组　21　0.44±0.22　3.52±1.31

图1　尿液和血清中BLCA-1的含量（，ng/ml）

2.2尿液和血清BLCA-1的ROC曲线尿液BLCA-1的ROC曲线：cut-off值为1ng/ml，曲线下面积为0.757ng/ml；敏感度为59%（13/22），特异度为93%（41/44）。血清BLCA-1的ROC曲线：cut-off值为4.5ng/ml，曲线下面积为0.735；敏感度为86%（19/22），特异度为56%（24/43，1例血液样本发生溶血未入组）。见图2:

图2　尿液和血清BLCA-1 ROC曲线

3　讨论

BLCA-1存在于膀胱肿瘤细胞的细胞核内，核基质随着肿瘤细胞坏死崩解，进入血液或尿液中，这就为BLCA -1在非肌层浸润性膀胱癌患者尿液和血液中的检测提供了生物学基础[8]。1996年美国匹兹堡大学的Getzenberg等[5]通过对膀胱肿瘤患者和正常人上皮细胞进行比对，提取了6种新型膀胱肿瘤特异性核基质蛋白（BLCAs），BLCA-1是其家族成员之一。目前，对于BLCA-1的研究尚处于初级阶段，作用机制尚不明确，诊断非肌层浸润性膀胱癌的敏感度、特异度和cut-off值并未统一。2005年Myers-Irvin等[6]应用ELISA法检测了25例膀胱癌（含浸润和非浸润）患者尿液BLCA-1蛋白的含量，结果显示，尿液BLCA-1的特异度为87%（40/46），与本研究结果的特异度（93%，41/44）相似，但他们研究的敏感度为80%（20/25），与本研究结果的敏感度（59%，13/22）有较大差异。

本研究结果显示，尿液BLCA-1对于非肌层浸润性膀胱癌的诊断表现出较高特异度（93%，41/44），提示临床诊断中尿液BLCA-1在检查结果阴性（BLCA-1含量低于cut-off值）时具有较高的可信度，对确定肿瘤患者具有较高的价值；而血清BLCA-1表现出较高敏感度（86%，19/22），提示血清BLCA-1在检查结果阳性（BLCA-1含量高于cut-off值）时具有较高的可信度，对确诊肿瘤患者具有较高的价值。本研究提示，尿液和血清BCLA-1在非肌层浸润性膀胱癌的诊断中具有一定的应用前景。

综上所述，BLCA-1做为一种新型的肿瘤特异性蛋白具有一定的研究价值，但其对非肌层浸润性膀胱癌诊断的特异度、敏感度、cut-off值目前尚未统一，尿液和血清BLCA-1含量能否作为临床诊断非肌层浸润性膀胱癌的检测指标，尚需联合多中心、大样本研究进一步证实。

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CHANGES AND SIGNIFICANCE OF BLCA-1 CONTENT IN URINE AND SERUM OF NON MUSCLE-INVASIVE BLADDER CANCER PATIENTS

QIU Yu, LI Hong-yang, WANG Zhi-yong，et al
(Chengde Medical College, Hebei Chengde 067000, China)

Objective: To investigate the changes and significance of bladder cancer specific antigen-1 (ΒLCA-1) content in urine and serum of non muscle-invasive bladder cancer patients. Methods: 22 cases non muscle-invasive bladder cancer patients were taken as experimental group, 23 cases benign prostatic hyperplasia (ΒHP) patients as ΒHP group, 21 cases healthy controls as normal group. ELISA was used to detect the ΒLCA-1 content in urine and serum of all the subjects as well as specifi city and sensitivity were calculated. Results: The ΒLCA-1 content in urine of patients in experimental group was obviously higher than ΒHP group and normal group (P＜0.05). The sensitivity and specifi city of urine ΒLCA-1 content in diagnosis of non muscle-invasive bladder cancer was respectively 59% (13/22) and 93% (41/44). The ΒLCA-1 content in serum of patients in experimental group and ΒHP group was obviously higher than normal group (P＜0.05). The sensitivity and specifi city of serum ΒLCA-1 content in diagnosis of non muscle-invasive bladder cancer was respectively 86% (19/22) and 56% (24/43). Conclusions: As a novel marker, ΒLCA-1 has fairly high sensitivity and specifi city in diagnosis of non muscle-invasive bladder cancer.

Non muscle-invasive bladder cancer; ΒLCA-1; Nuclear matrix protein; Sensitivity; Specifi city

△

R737.14

A

1004-6879（2016）06-0459-03

（2015-12-11）