气相色谱法检测黄芪饮片中有机氯农药残留量

杜妍，宗凯，夏泉，余晓峰

(1.安徽出入境检疫检验局，安徽 合肥 230022;2.安徽医科大学药学院，安徽 合肥 230032；3.安徽医科大学第一附属医院，安徽 合肥 230022)



◇药物分析◇

气相色谱法检测黄芪饮片中有机氯农药残留量

杜妍1，2，宗凯1，夏泉3，余晓峰1

(1.安徽出入境检疫检验局，安徽 合肥 230022;2.安徽医科大学药学院，安徽 合肥 230032；3.安徽医科大学第一附属医院，安徽 合肥 230022)

目的 了解目前安徽省部分医疗机构中所使用的的黄芪中药饮片有机氯农药残留量的现状。方法 从安徽省部分三级甲等医疗机构采集样品并收集相关产地信息，按照2010版《中国药典》中有机氯农药残留气相色谱检测方法，黄芪饮片粉粹后以有机溶剂超声提取、用浓硫酸磺化后，采用不分流进样方式，经两次程序升温技术分离，后采用电子捕获检测器(ECD)检测，外标法计算含量。结果 所采集的黄芪饮片中有机氯农药残留远低于《中国药典》2010年版一部规定要求。但不同产地来源的样品仍存在差异。结论 该方法可以快速准确的检测黄芪饮片中有机氯农药残留的含量，为安全用药提供保障。

黄芪饮片；有机氯农药残留；现状调查

中药农药残留关系到安全用药的问题，严重阻碍了中药走向国际市场的步伐。如何确保中药材的质量安全成为目前迫在眉睫的首要问题。在过去的几十年中，有机氯农药是一种高效广谱杀虫剂，被世界各地广泛使用，并有严重的神经毒性和实质脏器毒性，可以引发癌症。而且在禁用十几年后，由于其稳定性高，部分难以分解的农药有效化学成分在药材中的聚集，仍能形成危害使用者健康的农药残留问题。中药材中有机氯农药主要为六六六、滴滴涕及五氯硝基苯三个品种。1983年，我国就明确禁止使用有机氯农药，但是由于药材的种植期较长，特别是像黄芪这种多年生的根类药材，十分容易受到有机氯农药的污染。国内关于有机氯残留检测多集中在土壤[1]、中药材[2-4]、烟草[5]、河流、茶、地表水、地下水、水产品等领域。但近年来并未有关于药食同源的中药材中有机氯残留量检测的报告。黄芪饮片作为传统中药材，具有扶正补气之功效，更有增强机体免疫功能、利尿、保肝、抗应激、抗衰老、降压和较广泛的抗菌作用，是最为常用的补中益气、药食两用中药材[6]，市场需求较大，其安全性必须得到保障。2010版《中国药典》中明确规定了其有机氯农药残留的含量限定[总六氯甲苯(BHC)不得过千万分之二；总滴滴涕(DDT)不得过千万分之二；五氯硝基苯(PCNB)不得过千万分之一][7]。为了解目前安徽省部分医疗机构黄芪饮片中有机氯农药残留现状，判断其是否符合《中国药典》2010版标准十分有必要，我们参照了2010年版《中国药典》一部有机氯农药残留测定法，对采集于安徽省不同医疗机构中黄芪饮片的有机氯农药残留进行检测，调查和评价目前黄芪饮片中有机氯农药是否符合国家标准。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂 黄芪药材10份，分别购自安徽省部分三级甲等医疗机构，分别以H1～H10表示(见表1)。有机氯农药对照品溶液：六氯甲苯(α-BHC，β-BHC，γ-BHC，δ-BHC)，滴滴涕(PP′-DDE，PP′-DDD，OP′-DDT，PP′-DDT)，五氯硝基苯(PCNB)均由安徽出入境检验检疫局技术中心提供。其他试剂均为分析纯。

1.2 仪器与设备 Agilent Technologies7890A型气相色谱仪(美国Agilent公司)，配备63Ni ECD型电子捕获检测器，vortex-genie2旋涡混合器(美国SI公司)，Gen-Probe超声仪(美国基因探针(Gen-Probe)公司)，avanti 301高速冷冻离心机(美国贝克曼公司)，N-EVAP-112氮吹仪(美国Organomation公司)。

1.3 方法

1.3.1 色谱条件 检测器温度：300 ℃，进样口：230 ℃，不分流进样。初始程序升温100 ℃，每分钟10 ℃升至220 ℃，每分钟8 ℃升至250 ℃，保持10 min。高纯氮气(>99．999%);载气流速:1.5 mL·min-1，恒流模式，尾吹流量:58.5 m L·min-1，不分流，进样量为1 μL。

1.3.2 对照品溶液的制备[7]适量称取六氯甲苯(α-BHC，β-BHC，γ-BHC，δ-BHC)，滴滴涕(PP′-DDE，PP′-DDD，OP′-DDT，PP′-DDT)，五氯硝基苯(PCNB)三种农药对照品，分别用石油醚稀释成约5 mg·L-1的溶液，作为储备液。精密量取上述储备液各0.5 mL，用石油醚稀释至10 mL，混合制成0.25 mg·L-1的混合液，作为混合对照品储备液。精密量取混合对照品储备液，用适量石油醚分别稀释成5、10、20、50、100 μg·L-1的溶液。

1.3.3 供试品溶液的制备[7]参考《中国药典》2010年版一部制备方法。取适量黄芪饮片在烘箱内干燥4 h，用中药粉碎机粉碎，称取2 g，置于100 mL烧杯中加水浸泡过夜。加40 mL丙酮，称重后超声30 min，用丙酮补足损失的重量后，加6 g氯化钠，再加30 mL二氯甲烷，称重后超声15 min，用二氯甲烷补足损失的重量。迅速将有机相转入100 mL烧杯中，并加入适量无水硫酸钠，静置4 h。精密称取35 mL，旋蒸浓缩至近干，加入适量石油醚后旋蒸浓缩，重复3次，用5 mL石油醚溶解，再缓慢加入1 mL硫酸后移至10 mL离心管内，涡旋离心(3 000 r·min-1)10 min。精密量取2 mL上清液，旋转蒸干后，精密稀释至1 mL。

1.3.4 线性与范围 精密吸取1 μL混合对照品溶液，每个浓度平行测定3次，采用气相色谱仪，以浓度为横坐标，平均峰面积为纵坐标，计算相关系数和回归方程。

2 结果

2.1 黄芪中药饮片样品信息 共收集10家医疗机构的黄芪饮片样品，具体见表1。

2.2 标准曲线与回归方程 有机氯农药标准品的回归方程及相关系数见表2，由表2可见，有机氯农药混合对照品溶液线性关系良好。

2.3 实际样品分析结果 检测10种不同医疗机构的黄芪饮片农药残留量，均发现有机氯类农药残留(见表3)。色谱图见图1，滴滴涕(PP′-DDE，PP′-DDD，PP′-DDT)及五氯硝基苯(PCNB)均未检出。

表1 黄芪中药饮片样品信息

表2 有机氯农药线性及回归方程

表3 样品的α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC、OP′-DDT检测结果

3 讨论

测定结果表明，在采集的10组样品中有机氯农药残留量都很低，均符合2010版《中国药典》对甘草、黄芪两种药材规定(≤0.2 μg·g-1)[7]、《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》对药用植物原料、饮片、提取物及其制剂规定(≤0.1 μg·g-1)[8]、《香港中药材标准》对中药材规定(≤0.3 μg·g-1)[9]。在黄芪饮片中六六六有4种异构体有残留，滴滴涕只有部分残留，而其它含量均低于最低检出限而未被检出。但不同批号的黄芪药材有机氯农药残留量差异较大，如H5号样品的总BHC残留量较其他样品的残留量大，这种现象的出现，可能与黄芪种植过程有关[10]，也可能与气候等环境因素有关，农药残留的转化和积聚的机制还有待于进一步研究,为控制农药残留提供安全用药提供理论依据。有机氯农药的稳定性好，半衰期长，虽然在我国已经禁用20多年，但在中药中仍有一定残留，因此监测黄芪饮片中有机氯农药残留对于保证其质量十分必要。而本次实验的检测结果均符合要求，各医院黄芪饮片中有机氯农药的残留均稳定在国家标准范围内。

本研究仅对安徽省部分三级甲等医院黄芪饮片中有机氯残留现状进行了调查，而二级及以下医院的黄芪中药饮片有机氯农药残留现状还待进一步的调查。

[1] 王娜.超声提取-气相色谱法测定土壤中的多种有机氯农药残留[J].环境化学，2011,30(2):569-570.

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[3] 何睿,刘雪峰,刘海静.中药材中20种农药残留的检测方法研究[J].药物分析杂志,2011,31(11):2164-2167.

[4] 黄晓会,薛健,吴晓波,等.甘草中50种有机氯及拟除虫菊酯农药残留量的分析方法研究[J].中国药学杂志,2011,46(15):1204-1208.

[5] 张建平.超声波溶剂提取-气相色谱法测定烟草及烟草制品中19种有机氯农药残留[J].分析科学学报，2012,28(3):377-380.

[6] 张蔷,高文远,满淑丽.黄芪中有效成分药理活性的研究进展[J].中国中药杂志，2012,37(21):3203-3207.

[7] 国家药典委员会.中国药典(一部)[S].北京:中国医药科技出版社,2010:283,附录IXQ．

[8] 中华人民共和国商务部.药用植物及制剂外经贸绿色行业标准[S].WM/T2-2004.北京：中国标准出版社,2005.

[9] 香港特别行政区卫生署中医药事务部.香港中药材标准第一册[S].中华人民共和国香港特别行政区卫生署,2005.

[10] 李辉,吴虹,沈晨,等.不同产地黄芪中有机氯农药残留的分析[J].中国实验方剂学杂志,2013,19(10):131-134.

Determination of organochorine pesticide residues in Radix Astragali by GC-ECD

DU Yan1，2， ZONG Kai1， XIA Quan3,et al

(1.AnhuiEntry-ExitInspectionandQuarantineTechnology,Hefei,Anhui230022,China;2.SchoolofPharmaceuticalSciences,AnhuiMedicalUniversity,Hefei,Anhui230032,China;3.TheFirstAffiliatedHospitalofAnhuiMedicalUniversity,Hefei,Anhui230022,China)

Objective To investigate organochlorine pesticides residue in Radix Astragali collected from different medical institutions.Methods We collected samples and information of sources from different medical institutions.According to the "Chinese pharmacopoeia" we used gas chromatography method.Samples were extracted with mixed solvents by ultrasonic,then purified with sulfuric acid.Splitless injection was adopted before the detection of ECD detector and determination of contents by external standard method.Results Organochlorine pesticides residue in Radix Astragali produced in Gansu and Inner Mongolia were much lower than the standard of Chinese pharmacopeia,but there were some differences among samples from different sources.Conclusions This method is quick and accurate,which can provide a guarantee for the safe use of drug.

Radix Astragali;Residue of organochlorine pesticides;Status survey

国家质检总局科技计划项目(2015IK001)

余晓峰，男，研究员，研究方向:研究方向为食品安全,E-mail：amyxf@126.com

10.3969/j.issn.1009-6469.2016.10.011

2016-02-26，

2016-05-22)