高尔基体蛋白73在早期肝癌中诊断价值

罗晓云，胡仁静，武标，戴亚新

（1.江苏省无锡市第二人民医院检验科，江苏 无锡 214002；2.江苏省无锡市第五人民医院检验科，江苏 无锡 214005）

高尔基体蛋白73在早期肝癌中诊断价值

罗晓云1，胡仁静1，武标1，戴亚新2

（1.江苏省无锡市第二人民医院检验科，江苏 无锡 214002；2.江苏省无锡市第五人民医院检验科，江苏 无锡 214005）

目的探讨高尔基体糖蛋白（GP73）在早期肝癌中的诊断价值。方法采用酶联免疫吸附试验和化学发光法检测104例肝细胞癌（HCC）血清中的GP73和甲胎蛋白（AFP）的水平，以100例慢性肝炎、肝硬化、61例胃肠腺癌肝转移肿瘤、50例健康人群的样本检测作为对照组做统计学分析。结果在104例HCC患者中，血清GP73和AFP水平高于其他组，经Kruskal-Wallis检验，差异有统计学意义（P＜0.05）；HCC组与慢性肝病组、肝脏转移癌组、对照组的GP73、AFP水平比较，经Mann-Whitney检验，差异有统计学意义（P＜0.05）。GP73、AFP在诊断HCC的受试者工作特征曲线上显示，GP73的曲线下面积为0.932，敏感性为78.9%，特异性为89.0%；AFP的曲线下面积为0.817，敏感性为60.6%，特异性为88.5%。GP73与金标一致性检验的Kappa值为0.75，而AFP的Kappa值为0.63。GP73相对于AFP的NRI的结果为0.53，说明GP73检验效能高于AFP。结论GP73对HCC的诊断价值优于AFP，有望成为较好的HCC早期诊断新指标。

肝细胞癌；高尔基体糖蛋白73；甲胎蛋白

肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）占原发性肝癌（primary hepatocelluar carcinoma，PHC）的90%[1]，恶性程度高，预后差。目前临床常用的筛查HCC的血清学指标仍是甲胎蛋白（alpha fetoprotein，AFP），但其敏感性和特异性都不够理想[2]。近年来报道一项新的诊断HCC血清肿瘤标志物，高尔基体糖蛋白-73（Golgprotein-73，GP73）[3-4]。本文通过比较HCC及其他胃肠腺癌肝转移、肝病、正常体检人群血清中的GP73和AFP检测结果，探讨GP73对HCC的诊断价值。

1 资料与方法

1.1一般资料

选取2013～2015年无锡市第二人民医院和无锡市第五人民医院住院患者265例。其中，慢性肝病100例为慢性肝病组，年龄59（35～80）岁；男性65例，女性35例。HCC 104例为HCC组，年龄58（35～72）岁；男性65例，女性39例。胃肠腺癌肝转移61例为肝脏转移癌组，年龄62（45～76）岁；男性35例，女性26例。慢性肝病患者符合2005年中华医学会肝病学分会、中华医学会感染病学分会联合修订的《慢性乙型肝炎防治指南》诊断标准；HCC患者符合中国抗癌协会肝癌专业委员会2001年制定的《原发性肝癌的临床诊断标准》。对照组50例，来自无锡第二人民医院职工健康体检人群，年龄58（45～70）岁；男性28例，女性22例。

1.2研究方法

AFP检测使用化学发光法与贝克曼配套试剂，参考值＜9 ng/ml，对于初检AFP＞300 ng/ml的标本自动稀释后再检测，检测上限为54 000 ng/ml。血清GP73检测使用北京热景生物技术有限公司提供的商品化酶联免疫吸附试验试剂盒，试剂线性范围为0～250 ng/ml，＞250 ng/ml的样本使用配套稀释液手工稀释后再检测。根据试剂盒说明书进行操作，检测GP73。MK3酶标仪检测吸光度值（A）后，根据标准曲线计算GP73含量。

1.3统计学方法

采用SPSS 17.0统计软件进行数据分析，GP73、AFP呈偏态分布，用中位数和四分位数表示，多组间比较用Kruskal-Wallis检验；两两比较，采用Mann-WhitneyU检验。绘制受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve，ROC）曲线，计算临界值、敏感性、特异性和ROC曲线的线下面积。用Kappa值来评估GP73及AFP与病理结果的一致性，P＜0.05为差异有统计学意义。重分类改善指标（net reclassification improvement，NRI）用于比较两个指标的诊断能力，一个指标比另外一个指标诊断准确率是否提高，判断两者诊断的效能的差异。指标1阳性、金标准阳性表示为A1，指标1阳性、金标准阴性表示为B1，指标1阴性、金标准阳性表示为C1，指标1阴性、金标准阴性表示为D1。指标2阳性、金标准阳性表示为A2，指标2阳性、金标准阴性表示为B2，指标2阴性、金标准阳性表示为C2，指标2阴性、金标准阴性表示为D2。A2-A1为指标2比指标1诊断患者正确提高的人数，p1=（A2-A1）/（A+C）为在患者中指标2相对指标1诊断正确率的提高数；p3=（C2-C1）/（A+C）为在患者中指标2相对指标1诊断错误率的提高数；p2=（B2-B1）/（B+D）为在非患者中指标2相对指标1诊断错误率的提高数；p4=（D2-D1）/（B+D）为在非患者中指标2相对指标1诊断正确率的提高数；NRI=（p1-p3）-（p2-p4），即NRI代表指标2比指标1分类改善的比例，若所得到的NRI＞0则为正改善，＜0为则为负改善，=0则为无改善。

2 结果

2.1GP73和AFP检测结果

HCC组的GP73、AFP水平与慢性肝病组、肝脏转移癌组和对照组比较，经Kruskal-Wallis检验，差异有统计学意义（H=126.501、101.812和76.103，P= 0.013、0.001和0.000），HCC组的GP73、AFP水平高于其他组。HCC组GP73水平分别与慢性肝病组、肝脏转移癌组、对照组比较，组间多重比较用Mann-Whitney检验，差异有统计学意义（U=1 650.103、841.012和174.352，P=0.002、0.000和0.000）；各组AFP水平比较，差异有统计学意义（U=1183.510、1147.820和221.301，P=0.000）。见表1。

2.2GP73和AFP诊断HCC的ROC曲线下面积

为分析无锡地区GP73和AFP对肝癌患者诊断效能，以GP73和AFP诊断肝癌的数据为基础，ROC曲线分析显示，GP73的曲线下面积为0.932（95%CI：0.898，0.958），敏感性为78.9%，特异性为89.0%；AFP的曲线下面积为0.817（95%CI：0.769，0.859），敏感性为60.6%，特异性为88.5%。GP73曲线下面积＞AFP，差异有统计学意义（P=0.023），表明GP73诊断肝癌的价值优于AFP。见附图。

2.3不同GP73水平作为临界值的敏感性和特异性比较

随着GP73水平逐渐增高，筛查的特异性增加而敏感性递减。以GP73 125.2ng/ml为临界值时，其敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值达到最佳，分别为84.1%、90.0%、89.4%和84.9%。见表2。

2.4一致性检验的Kappa值及诊断HCC的NRI指标

以GP73 125.2 ng/ml为临界值时，GP73与金标准一致性检验的Kappa值为0.75，而AFP的Kappa值为0.63。GP73相对于AFP的重分类改善指标NRI的结果为0.53，说明GP73检验效能高于AFP。

表1　各组血清GP73和AFP水平比较[M（P25，P75）]

表2　不同GP73水平作为临界值的敏感性和特异性比较（%）

附图HCC患者GP73和AFP的ROC曲线

3 讨论

尽管HCC是一种进展快、预后差的恶性肿瘤，但是通过体检、B超检查发现生长在肝脏表面包膜下的癌结节和肝左叶的小肝癌，结合血清学肿瘤标志物的检测，及时早期确诊做手术切除，仍然能够长期生存。然而，目前检测的AFP由于敏感性不高，难以满足早期肝癌诊断的需求[5]，当上述患者的血清学检测AFP阴性或低浓度时，常常误诊为结节性肝硬化、肝细胞结节性增生或其他良性病变，从而延误最佳治疗时机。

GP73是存在于高尔基体的一种跨膜糖蛋白，是KLADNEY等[6]研究成人巨细胞性肝炎病原学是偶然发现的，GP73在正常肝细胞中很少或不表达，主要由胆管上皮细胞表达。以后又有学者发现，HCC患者血清中的GP73明显升高[7-10]，在肝癌中的诊断价值优于AFP[11]，在104例HCC患者的GP73和AFP水平高于其他各组，差异有统计学意义（P＜0.05）。ROC曲线分析显示，GP73的曲线下面积为0.932，敏感性为78.9%，特异性为89.00%；AFP的曲线下面积为0.817，敏感性为60.6%，特异性为88.5%，与文献报道一致[12]。GP73与金标准一致性检验的Kappa值为0.75，而AFP的Kappa值为0.63。GP73相对于AFP的NRI的结果为0.53，说明GP73检验效能高于AFP。ROC曲线下面积、Kappa及NRI值表明，GP73在诊断肝癌中敏感性和特异性都高于AFP，对于HCC有早发现、早诊断、早治疗，提高患者的生存质量。

在61例肝脏转移癌中，35例胃肠癌中5例为低分化腺癌，有不同程度的阳性表达。提示部分胃肠癌有肝组织样分化。而该5例胃肠低分化腺癌伴肝细胞样分化的患者恰巧也是血AFP和GP73高于正常值的患者。因此，GP73除用于健康人体检筛查外，也能提示有肝细胞样分化的胃肠低分化腺癌，然后通过胃镜、肠镜检查对肿瘤定位与确诊。通过多学科的协作，GP73检测可以在HCC以外的病种进行拓展研究，GP73将会有更广阔的应用前景。

[1]任建松,乔友林.原发性肝癌危险因素与预防研究进展[J].中国肿瘤,2008,17(4):293-296.

[2]阮秀花,沈彭,张效本,等.5种血清肿瘤标志物联合检测在肝癌诊断中的应用研究[J].中国现代医学杂志,2010,21(2):176-180.

[3]MCGLYNN K A,TSAO L,HSING A W,et al.International trends and pattems of pfimary liver cancer[J].Int J Cancer, 2001,94:290-296.

[4]MARRERO J A,ROMANO P R,NIKOLAEVA O,et a1.GP73, a resident Golgi glycol-protein,is a novel serum marker forhepatoeelluar carcinoma[J].Journal of Hepatology,2005,43:1007-1012.

[5]杨颖,沐尼热·马合苏提,等.GP73和AFP单项与联合诊断原发性肝癌的价值[J].中华检验医学杂志,2012,35(11):1034-1037.

[6]KLADNEY R D,BULLA G A,GUO L,et al.GP73,a novel Golgilocalized protein upregulated by viral infection[J].Gene,2000, 249(1/2):53-65.

[7]WITJES C D,VAN AALTEN S M,STEYERBERG E W,et al. Recently introduced biomarkers of screening of hepatocellelacarcinoma:a systematic review and meta-analysis[J].HepatolInt, 2013,7:59-64.

[8]毛一雷,杨华瑜,许海峰,等.新的肝癌血清标记物GP73在肝癌诊断中初步研究[J].中华医学杂志,2008,88:948-951.

[9]赵秀英,李宁,丁惠国,等.血清高尔基体糖蛋白73在肝细胞癌诊断中的作用[J].中华肿瘤杂志,2010,32:943-946.

[10]石玉玲,曾兰兰,李林海,等.高尔基体蛋白73及其基因检测对原发性肝癌诊断的价值[J].中华检验医学杂志,2010,33(6):507-512.

[11]万豪光,徐浩,顾玉明,等.GP73和AFP单项与联合诊断对原发性肝癌诊断应用的Meta分析[J].中华检验医学杂志,2014,37:378-382.

[12]崔冉亮,李悦国,张鹏宇,等.血清高尔基体蛋白73联合甲胎蛋白检测在原发性肝癌患者中的诊断价值[J].中国肿瘤临床, 2015,42(4):222-225.

（童颖丹 编辑）

Diagnostic value of Golgi protein 73 in early hepatocellular carcinoma

Xiao-yun Luo1,Ren-jing Hu1,Biao Wu1,Ya-xin Dai2
(1.Clinical Laboratory,the Second People's Hospital of Wuxi,Wuxi,Jiangsu 214002,China; 2.Clinical Laboratory,the Fifth People's Hospital of Wuxi,Wuxi,Jiangsu 214005,China)

Objective To evaluate the diagnostic value of Golgi protein 73(GP73)in early hepatocellular carcinoma.Methods Adopting ELISA and chemiluminescence method,the serum levels of GP73 and alpha fetoprotein(AFP)in 104 cases of hepatocellular carcinoma were detected.Meanwhile 100 cases of chronic hepatitis or liver cirrhosis,50 cases of healthy people and 61 cases of gastrointestinal cancer with liver metastases were chosen as control groups.Their data were statistically analyzed.Results The GP73 and AFP levels in the 104 cases of hepatocellular carcinoma were higher than those of the others,and the differences were statistically significant by Kruskal-Wallis test(P＜0.05).By Mann-Whitney test,the GP73 and AFP levels of the hepatocellular carcinoma group were significantly different from those of the patients with chronic liver disease,liver metastases and healthy people(P＜0.05).ROC curves of GP73 and AFP in diagnosing hepatocellular carcinoma showed,the area under the curve(AUC)of GP73 was 0.932,the sensitivity was 78.9%, the specificity was 89.0%;the AUC of AFP was 0.817,the sensitivity was 60.6%,the specificity was 88.5%. The Kappa value between GP73 and the gold standard was 0.75 and the Kappa value between AFP and the gold standard was 0.63.Compared with AFP,the NRI of GP73 was 0.53,which indicated that GP73 was better than AFP.Conclusions The diagnostic value of GP73 is superior to that of AFP in terms of hepatocellular carcinoma,and it is expected to become a better serum marker in the early diagnosis of primary liver cancer.

hepatocellular carcinoma;Golgi protein 73;alpha fetoprotein

R735.7

B

10.3969/j.issn.1005-8982.2016.21.021

1005-8982（2016）21-0100-04

2015-12-09

武标，E-mail：wubiao2011@163.com；Tel：18751578909