肺淤血水肿实验教学方法改进

蒲文静 高蓉 马文卓 尹亮亮

（甘肃医学院，甘肃 平凉 744000）

肺淤血水肿实验教学方法改进

蒲文静 高蓉 马文卓 尹亮亮

（甘肃医学院，甘肃 平凉 744000）

淤血、水肿、心力衰竭均为病理学中的重要内容。淤血、水肿、心力衰竭之间存在着内部联系，我们使用大白鼠复制肺淤血水肿模型，通过左心衰竭引起肺水肿的实验来验证水肿的发生机制，同时也可以观察到左心衰的临床表现和肺淤血的病理变化。实践证明，整个实验过程中虽然增加了实验操作，但节约了实验成本，而且提高了教学效果，推广性强。

肺淤血水肿；实验教学方法；改进

淤血、水肿、心力衰竭均为病理学中的重要内容。水肿是过多的体液在组织间隙或体腔中积聚。目前，验证水肿发生机制的教学实验主要有两种，第一种是通过蟾蜍下肢灌流的方法复制水肿模型，第二种是用兔子复制左心衰引起肺水肿的模型。在日常的教学中，水肿和淤血的实验都是单独进行的，实验动物的价格较高，造成实验成本过高。淤血、水肿、心力衰竭之间存在着内部联系，我们使用大白鼠复制肺淤血水肿模型，通过左心衰竭引起肺水肿的实验来验证水肿的发生机制，同时也可以观察到左心衰的临床表现和肺淤血的病理变化。实践证明，整个实验过程中虽然增加了实验操作，但节约了实验成本，而且提高了教学效果，推广性强。

一、实验目的

复制大白鼠左心衰肺水肿模型；验证水肿的发生机制；观察大白鼠左心衰后的临床表现；学习肺系数的测定方法，肺组织的取材、固定及切片制作方法；验证肺淤血水肿的肉眼及镜下改变。

二、实验方法

（一）传统方法

1.实验动物

家兔1只。

2.实验器材及药品

气管插管，静脉导管及静脉输液装置，注射器，兔急性手术器械，烧杯，纱布，线，胶布，兔手术台，婴儿秤，生理盐水，乌拉坦（20%），肾上腺素（0.1%），肝素（3g/L）。

3.实验步骤

取家兔1只称重，用20%乌拉坦5ml/kg耳缘静脉注射麻醉，固定于兔台上；进行颈部手术，分离气管和一侧颈外静脉，作气管插管；肝素化后，作静脉插管并连于输液装置；给药前观察正常呼吸，输入生理盐水（输入总量按100ml/kg，输速150-200滴/分），待滴注接近完毕时立即向输液瓶中加入肾上腺素（0.5ml/kg）继续输液，密切观察呼吸改变和气管插管内是否有分红色泡沫液体流出，死亡动物记录死亡时间，所有动物均打开胸腔，用线在气管分叉处结扎以防止肺水肿液渗出，在结扎处以上切断气管，把肺取出，用滤纸吸去肺表面的水份后称重，然后肉眼观察肺大体改变，并切开肺，观察切面的改变。

（二）改进方法

1.实验动物

SD大白鼠2只。

2.实验器材及药品

注射器及针头，大白鼠急性手术器械，烧杯，滤纸，手术线，胶布，兔手术台，婴儿秤，电子天平，切片机，生理盐水，乌拉坦（20%），肾上腺素（0.1%），肝素（3g/L），福尔马林液，盐酸，酒精，二甲苯，苏木素-伊红染液，石蜡，玻片。

3.实验步骤

（1）取大白鼠2只称体重（g）（体重220g左右，体重相差小于体重的5%）。做好标记（甲鼠、乙鼠），观察动物一般表现、呼吸频率、深度及皮肤黏膜的颜色。每只大白鼠先腹腔注射20%乌拉坦5ml/kg麻醉大鼠，仰卧固定于手术台上，观察大白鼠呼吸状况。

（2）过5分钟后，甲鼠腹腔注射肾上腺素3mg/kg，同时尾静脉推注生理盐水；乙鼠腹腔注射等量生理盐水。

（3）观察2只大白鼠出现的症状（呼吸窘迫、紫绀等）并记录，注意鼻孔是否有液体溢出。待甲鼠死亡或症状明显时用颈椎脱臼法处死之，再处死乙鼠。分别解剖尸体：剪开胸壁，小心

取出肺脏，再用滤纸擦去肺表面血迹后准确称肺重。

（4）肉眼观察肺部的改变，并切开肺，观察切面的改变，注意有无泡沫状液体流出。

（5）双肺观察结束后，将肺组织固定于10%的福尔马林液中，两天后制作石蜡切片、HE染色、观察切片。

三、实验结果

（一）一般情况

乙鼠呼吸平稳，有节奏，心率整齐，唇舌黏膜正常。甲鼠腹腔注射后多数1min后出现呼吸频率加快，3min可见呼吸困难，喘促，全身抽搐，口唇青紫，鼻腔有粉红色泡沫状液体流出。

（二）肉眼观察

乙鼠双肺正常、浅粉红色，表面光滑，未见暗红色的淤血区，切面未见液体溢出。甲鼠双肺体积明显增大，肺系数明显增大，呈现暗红色，有点状或片状出血（见图1），气管断端流出泡沫样液体，肺切面有粉红色泡沫样液体溢出（见图2）。甲鼠肺系数明显高于乙鼠。

图1

图2

（三）光镜检查

乙鼠肺泡结构完整无明显淤血，肺泡腔内及间质无出血及水肿（见图3）。甲鼠大部分肺泡壁毛细血管扩张充血，多数肺泡内可见红染液体（见图4），少部分肺泡内可见出血，呈灶性分布，在肺组织中可以找到扩张淤血的小静脉（见图5）。

图3

图4

图5

四、讨论

在腹腔注射肾上腺素同时尾静脉静脉注射生理盐水组复制大鼠肺水肿模型症状典型，3min后可见呼吸困难，喘促，全身抽搐，口唇青紫，鼻腔有粉红色泡沫状液体流出。肺体积增大，重量增加，呈暗红色；镜下见肺泡壁增厚，小静脉明显扩张充满血液，肺泡腔内可见蛋白水肿液，符合肺淤血水肿的病变特点。

肾上腺素引起肺水肿的机理目前比较清楚，肾上腺素对α和β受体都有激动作用，使皮肤、黏膜及内脏的血管收缩，但对肺血管收缩作用甚弱，肺血管有时由于血压升高还可被动地扩张[1]，可使皮肤、内脏的血液回流增加肺血容量，导致肺毛细血管内压增高，促进肺水肿的发生。皮肤、黏膜及内脏的血管收缩，动脉血压升高增加左心的后负荷[2]，导致左心衰竭引起肺淤血，增加肺毛细血管内流体静压，从而引起水肿。同时给予大白鼠腹尾静脉注射生理盐水，增加其体循环静脉回流，也增加左心室前负荷导致肺淤血水肿，另外注入的生理盐水稀释了血液使血浆胶体渗透压下降导致水肿发生。

本实验通过增加左心前后负荷的方式复制了左心衰肺淤血水肿的模型，让学生进一步理解了左心衰的发生机理和水肿的发生机制，同时加深了学生对肺淤血病理变化的理解程度，加深了学生对左心衰的临床表现的认识，取得了良好的教学效果。在实验中把心力衰竭、淤血、水肿三个内容有机的结合了起来，验证了三方面的理论内容，更使学生深刻理解了病理学、病理生理学和临床是紧密联系的。通过正常与异常肺组织的观察，能够从感性和理性两个角度理解肺水肿，加深了对医学知识的理解。

本实验用两只大白鼠代替了以往实验中用的家兔，实验成本基本相当，但是增加了正常与病变肺组织的对照，更有利于学生观察肺淤血水肿的病理变化，实验中增加了肺组织的取材、固定、切片、染色，加深了学生对病理检验技术的掌握。

[1]杨世杰.肾上腺索受体激动药.见：杨宝蜂，主编.药理学（第6版）[M].北京：人民卫生出版社，2003：89-99.

[2]徐叔云.药理学实验方法学（第2版）[M].北京：人民卫生出版社，1991：1234-1256.

[3]李桂源.病理生理学[M].人民卫生出版社，2010.

[4]陈杰.病理学[M].人民卫生出版社，2010.

Congestion,edema and heart failure are important parts of pathology and there is a closed internal connection between them.Using rats replicate the model of pulmonary congestion edema,we can verify the pathogenetic mechanism of edema through an experiment of pulmonary edema caused by left heart failure.Meanwhile,we can also observe the clinical manifestations of the left heart failure and the pathological changes of the pulmonary blood clot.It has proved that this experiment can save cost and improve the teaching effective,although there are many experiment operation.It deserves to be widely used.

pulmonary congestion edema;experimental teaching method;improvement

G642

A

2096-000X（2016）23-0120-02

蒲文静（1982-），女，本科，讲师，主要从事病理教学和研究工作；高蓉（1981-），女，硕士，讲师，主要从事病理教学和肿瘤病理研究工作；马文卓（1978-），男，硕士，讲师，主要从事病理教学和研究工作。