银川市售水果中原花青素含量比较

格日勒，亓伟，王剑，邬佳豪，朱启慧，岳炜烨，柳静

（银川能源学院石油化工学院，宁夏银川750011）

银川市售水果中原花青素含量比较

格日勒，亓伟*，王剑，邬佳豪，朱启慧，岳炜烨，柳静

（银川能源学院石油化工学院，宁夏银川750011）

用回流法提取银川市售水果中果肉的原花青素，并用正丁醇-盐酸法对原花青素含量进行测定。同时分析和比较了银川市售的部分水果原花青素的含量。实验结果表明，银川市售水果中原花青素含量为0.03%～5.45%，其中紫葡萄原花青素含量最高，为5.45%；火龙果原花青素含量最低，为0.03%。对原花青素含量与水果种属及水果颜色的深浅进行统计，结果表明，同种属水果颜色深的原花青素含量较颜色浅的含量高。

原花青素；正丁醇-盐酸法；分光光度；水果

原花青素（oligomeric proantho cyanidins，OPC）是一种有着特殊分子结构的生物类黄酮，是目前国际上公认的清除人体内自由基最有效的天然抗氧化剂，主要由不同数量的儿茶素和表儿茶素的单体、二聚体、三聚体到十聚体组合而成。按聚合度大小，二至四聚体称为低聚体，五聚体以上称为高聚体[1]。OPC拥有较强的抗氧化能力、清除自由基能力和改善人体微循环的能力，在体内，其氧化功效是维生素E的50倍，维生素C的20倍[2]。原花青素是纯天然抗氧化剂和高效的自由基清除剂，市售的原花青素提取物大多从葡萄科植物葡萄的种子提取得来，为红棕色粉末，气微、味涩。

原花青素具有一定的药理作用，如抗炎、抗肿瘤、抗辐射、抗衰老、改善免疫力、改善骨的形成、抗糖尿病、降血脂、降血压、促进伤口愈合、组织修复活性、抗癌作用、改善视觉功能等，对近70种疾病具有直接或间接的预防作用[3]，被广泛应用于食品、饮料、化妆品及保健品等领域[4]。健康问题已成为人们当今普遍关注的首要问题。随着健康意识的增强，水果中各成分也越来越引起人们的关注，尤其是其中的原花青素含量。葡萄籽中含有约5%的多酚类物质，多酚的主要成分是3种单体多酚（占总多酚的10%左右）和大量聚合多酚，其中单体多酚包括儿茶素、表儿茶素、表儿茶素没食子酸；聚合多酚主要是原花青素（占总多酚的75%～85%）[5]。目前测定原花青素含量的方法主要有紫外分光光度法、原子吸收法、电化学法、硫酸-香草醛法[6]、高效液相法、正丁醇-盐酸法、毛细管电脉冲法、香草醛-盐酸法[7]等。香草醛-硫酸法在硫酸加入时会产生很高的热量，从而使原花青素氧化分解，造成测量结果偏低[8-10]。正丁醇-盐酸法反应的特征性显色显著，操作简便，测定重现性较好。该文选用正丁醇-盐酸法测定银川市售水果中的原花青素含量并通过改变热水温度以改善对儿茶素等单体不反应，而且对原花青素的高聚体的反应也不是很完全的问题。

1　材料与方法

1.1材料与试剂

紫葡萄、蓝莓、青葡萄、柠檬、珍珠果、紫李子、山竹、橘子、枣子、香蕉、红苹果、黄李子、黄苹果、毛桃、芒果、石榴、杏子、梨、油桃、火龙果：市售。

原花青素标准品（纯度≥95%，批号：MUST-12032802）：成都曼斯特生物科技有限公司；石油醚（沸程30～60℃）、无水乙醇、硫酸铁铵（含量＞99%）、盐酸（含量36%～38%）、正丁醇（含量≥99.5%）：天津市富宇精细化工有限公司。

正丁醇-盐酸：取12.5 mL浓盐酸于250 mL容量瓶中，用正丁醇定容。

20mg/mL硫酸铁铵溶液：取2g硫酸铁铵固体于100 mL容量瓶中，加2 mol/mL盐酸定容至100 mL。

1.2仪器与设备

UV-1800紫外-可见光分光光度计：日本岛津公司；YP1201N电子天平：上海精密科学仪器有限公司；DZKE-4型电子恒温水浴锅：上海树立仪器仪表有限公司；DHG-9023A鼓风式烘干箱：天津市顺诺仪器科技有限公司；80-2B台式离心机：上海安亭科学仪器厂。

1.3方法

1.3.1原料预处理

将各待测的水果洗净，将可食用部分切成小块放入蒸发皿蒸干并不停搅拌，待大部分水蒸干后，放在恒温水浴锅上99℃恒温蒸干60 min，放入烘箱12 h，粉碎，备用。

1.3.2标准储备溶液的制备

精确称取干燥至质量恒定的原花青素标准品0.1009g，用无水乙醇溶解并定容于100 mL容量瓶中，制得质量浓度为1.009 mg/mL的原花青素标准储备溶液[11-12]。

分别移取上述标准溶液1.0mL、2.5mL、5.0 mL、10mL、15.0 mL、20.0 mL、25.0 mL溶液于100 mL容量瓶中加入无水乙醇定容。制得10.09μg/mL、25.23μg/mL、50.45μg/mL、100.90 μg/mL、151.35 μg/mL、201.80 μg/mL、252.25 μg/mL的标准系列使用液。

1.3.3原花青素含量的测定

用电子天平精确称取10 g粉碎备用的各种水果可食部分，放入提取瓶中，按1∶3（g∶mL）加入石油醚脱脂[13]，60℃回流脱脂30 min，倒去石油醚，烘干。再向其中加入150 mL体积分数50%的乙醇，回流提取70min，过滤[14]。取滤液2mL于25mL比色管中，加入18mL正丁醇-盐酸溶液和3滴20mg/mL硫酸铁铵溶液，混匀后塞好瓶塞，在（95±1）℃热水中加热40 min后立即取出冲冷4 min，放置至室温[15-19]，用正丁醇定容至25 mL。在波长550 nm处用正丁醇调零，测定吸光度值，并按如下公司计算原花青素含量[20]。

式中：c为查工作曲线样品溶液OD550nm对应的原花青素含量，μg/mL；V1为待测样品溶液的取样体积，mL；V2为样品定容的体积，mL；d为稀释倍数；M为样品质量，g。

2　结果与分析

2.1标准曲线

分别吸取不同质量浓度的标准系列使用液2mL于25mL比色管中，按1.3.3方法操作，测定吸光度值A，确定线性范围。以吸光度值（A）为纵坐标，原花青素质量浓度（C）为横坐标作图。标准曲线见图1。

图1　原花青素标准曲线Fig.1 Standard curve of procyanidins

由图1看出，标准曲线回归方程为A=-0.00172+0.00237C，相关系数R2=0.999 66，在原花青素质量浓度为10.09～252.25 μg/mL时呈现良好的线性关系。

2.2不同果品的原花青素含量比较

经过正丁醇-盐酸法测定水果的可食部分中原花青素含量，结果如表1所示。

表1　不同种类果品的原花青素含量的比较Table 1 Comparison of procyanidins content of different kinds of fruits

由表1结果可知，20种银川市售水果中原花青素含量为0.03%～5.45%，其中紫葡萄原花青素含量最高，为5.45%；火龙果原花青素含量最低，为0.03%。在已测得的水果中原花青素的含量从多到少依次为紫葡萄、蓝莓、青葡萄、柠檬、珍珠果、紫李子、山竹、橘子、黄李子、枣子、香蕉、红苹果、黄苹果、毛桃、芒果、石榴、杏子、梨、油桃、火龙果。

从水果中原花青素的含量可以看出，水果颜色较深的原花青素含量较高，水果的颜色较浅的原花青素含量低。颜色顺序为深紫色、绿色、黄色、橙色、淡紫色、红色、淡红色、淡黄色、粉色、白色，颜色逐渐变浅。

3　结论

通过实验结果可以看出，银川市售水果中原花青素含量为0.03%～5.45%，其中紫葡萄原花青素含量最高，为5.45%；火龙果原花青素含量最低，为0.03%。从水果中原花青素的含量可以看出，水果颜色较深的原花青素含量较高，水果的颜色较浅的原花青素含量低，水果可食部分含花青素多少的颜色顺序依次为深紫色、绿色、黄色、橙色、淡紫色、红色、淡红色、淡黄色、粉色、白色。

水果中原花青素含量高低与水果种属、气温、光照、土壤性状等因素是否有关，这些问题值得思考。探索水果中原花素含量高低形成的机理和影响因素，对人类培育的果品中原花青素含量高低有决定性的作用。

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Comparison of procyanidin content of commercial fruits in Yinchuan

GERILE,QI Wei*,WANG Jian,WU Jiahao,ZHU Qihui,YUE Weiye,LIU Jing
(College of Petrochemial Technology,Yinchuan Energy Institute,Yinchuan 750011,China)

Procyanidins were extracted by solvent refluxing extraction from commercial fruits of Yinchuan,and the content was determined by n-butyl alcohol hydrochloric acid spectrophotometric method.At the same time,the contents of procyanidins in the fruits were analyzed and compared.The experimental results showed that the content of procyanidinsis in the fruits were 0.03%-5.45%,in which the procyanidins content in purple grapes were the highest of 5.45%,and in pitaya was the lowest of 0.03%.The relationship between the procyanidins content,fruit species,and color were analyzed,and the results showed that the procyanidins content of fruit with deep color was higher than that of light color in same species.

procyanidins;n-butyl alcohol-hydrochloric acid method;spectrophotometry;fruit

TS201.4

0254-5071（2016）08-0152-03

10.11882/j.issn.0254-5071.2016.08.034

2015-10-19

银川能源学院教育教学质量工程基金项目（2012-KY-C-02）；银川能源学院科研基金项目（2012-KY-P-01）

格日勒（1971-）女，高级工程师，硕士，研究方向为天然产物分离与分析。

亓伟（1963-）女，高级工程师，本科，研究方向为药品、保健食品开发。