重症监护病房病原微生物培养及药敏分析

毛 炜， 黄春华， 赖永才

·论著·

重症监护病房病原微生物培养及药敏分析

毛 炜， 黄春华， 赖永才

目的 了解重症监护病房（ICU）患者感染主要病原菌株及其药敏情况，为临床合理应用抗菌药物提供依据。方法 对2013年1月－2015年10月ICU送检的5 263份患者标本进行培养和菌株分析。使用法国生物梅里埃VITEK 2- Compact全自动、ATB-Expression半自动细菌鉴定及药敏分析仪进行鉴定及药敏试验。结果 共培养出1 307株菌株。其中革兰阴性菌1 061株（81.2 %），革兰阳性菌191株（14.6 %），真菌55株（4.2 %）；其中以肠杆菌科细菌和葡萄球菌为主。结论 ICU患者感染以革兰阴性菌为主，可早期针对性用药。

微生物培养； 病原菌微生物； 药敏试验； 重症监护病房

感染性疾病是临床常见且治疗比较棘手的疾病类型，血流感染更是临床比较严重的感染性疾病，国内外报道近年呈上升趋势[1-2]。感染性疾病的细菌种类根据不同地域和不同时间而发生变化，实际工作中同时结合临床表现和多种检测指标可以更好判断感染[3]。在医院统计中，重症监护病房（ICU）细菌耐药率明显高于普通病房[4]。为了解我院ICU在一定时间范围内细菌感染的分布特点和耐药情况，为临床医师特别是ICU医师规范、合理使用抗菌药物提供依据，本研究对简阳市人民医院ICU送检的培养标本，系统回顾分析细菌检出种类及其耐药情况。结果如下。

1　材料与方法

1.1标本来源

2013年1月－2015年10月，我院ICU送检的有感染症状患者的培养标本5 263份，共检出病原菌1 307株，阳性率24.8 %（剔除重复培养菌株）。

1.2细菌培养和鉴定

根据《全国临床检验操作规程》（第3版）[5]和美国临床和实验室标准化协会（CLSI）要求，规范采集各种样本送检，非血培养标本接种后放入二氧化碳培养箱进行相应病原菌培养。使用血培养仪进行血液培养、细菌鉴定及药敏分析系统进行菌株鉴定及药敏试验，根据CLSI标准判断药敏试验结果[6]。

质控菌株为腐生葡萄球菌ATCC 75713、金黄色葡萄球菌（金葡菌）ATCC 25923、产酸克雷伯菌ATCC 700324和大肠埃希菌ATCC 25922。

1.3仪器及试剂

BACT/ALERT 3D全自动血培养仪，VITEK 2-Compact全自动、ATB-Expression半自动细菌鉴定及药敏分析仪均为法国生物梅里埃公司产品，梅里埃公司配套鉴定、药敏试剂卡。

血琼脂平皿、麦康凯琼脂平皿、万古霉素巧克力琼脂平皿、HIN巧克力琼脂平皿、血培养瓶为法国生物梅里埃公司产品。药敏纸片为杭州天和试剂公司产品。

1.4统计分析

数据采用WHONET 5.6进行分析。

2　结果

2.1细菌构成

5 263份标本培养出菌株1 307株，阳性率为24.8 % ， 其中，革兰阴性菌1 061株（81.2 %），革兰阳性菌191株（14.6 %），真菌55株（4.2 %）。检出菌以肠杆菌科细菌和葡萄球菌为主。所有阳性标本经分离培养均为单一细菌感染。主要送检标本以痰、血液、分泌物和尿液为主，检出细菌构成主要为鲍曼不动杆菌、大肠埃希菌等，见表1。

2.2药敏结果

检出的主要革兰阴性菌、阳性菌的耐药结果见表2、表3。由统计可知，革兰阴性菌耐药率较高，尤其是鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌对头孢唑林、头孢替坦和头孢曲松耐药率在80 %以上，对氨苄西林和部分头孢菌素类100 %耐药。鲍曼不动杆菌对头孢他啶和头孢吡肟耐药率也高达85.0 %，对碳青霉烯类、氟喹诺酮类、酶抑制剂复合制剂、氨基糖苷类耐药率均较高，基本大于80 %，仅对左氧氟沙星和甲氧苄啶-磺胺甲唑耐药率低于25 %。铜绿假单胞菌对头孢他啶和头孢吡肟耐药率低于10 %，对氨基糖苷类、氟喹诺酮类、碳青霉烯类耐药率在40 %左右。大肠埃希菌和肠杆菌属对氨苄西林、氨苄西林-舒巴坦、头孢曲松耐药率在50 %以上，对头孢他啶耐药率低于40 %，对碳青霉烯类耐药率低于10 %。奇异变形杆菌对头孢曲松、环丙沙星、亚胺培南、呋喃妥因、甲氧苄啶-磺胺甲唑耐药率高于50 %。在革兰阳性菌中金葡菌和凝固酶阴性葡萄球对常用抗菌药物青霉素、红霉素、克林霉素的耐药率超过70 %，金葡菌对氟喹诺酮类耐药率低于凝固酶阴性葡萄球菌，但对甲氧苄啶-磺胺甲唑耐药率近60 %，高于凝固酶阴性葡萄球菌，未发现耐万古霉素菌株。肠球菌属对青霉素类、氟喹诺酮类、大环内酯类耐药率大于70 %，对呋喃妥因、替卡西林耐药率低，未发现万古霉素耐药肠球菌（VRE）。

表1　1 307株微生物的菌种构成Table 1 Distribution of 1 307 strains of microorganisms isolated from infections

3　讨论

我院ICU病原菌检出率为24.8 %，阳性率低于相关报道[7]，可能与送检标本类型占比相关。主要以革兰阴性菌为主，与河南、山东等报道一致[8-9]。其中，细菌在血培养中的阳性检出率在15 %左右，与浙江地区ICU血流感染情况相比略低或相近[10-11]，略低于辽西地区ICU血培养阳性率[12]。主要致病菌与辽西地区报道相近，与浙江地区存在一定差异[10，13]。早年有文献指出主要致病菌国内国外不同，而且检出菌种的构成比随年代推移也会出现变化[14]。在本组血培养阳性细菌中，大肠埃希菌为最常见检出细菌（68株，29.7 %），其次为凝固酶阴性葡萄球菌（62株，27.1 %），与国外ICU报道主要病原菌一致[15]。我院ICU中，引起感染的主要致病菌是鲍曼不动杆菌和大肠埃希菌；凝固酶阴性葡萄球菌也明显高于其他菌种。鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌对大多数头孢菌素类抗菌药物耐药，鲍曼不动杆菌在ICU中检出率较高，且耐药情况严重，与抗菌药物大量应用，患者免疫力低下，呼吸道防御屏障受损相关[16]。大肠埃希菌对氨苄西林、甲氧苄碇 -磺胺甲唑耐药率已超过75 %，未发现对亚胺培南耐药大肠埃希菌。而按照卫生行政部门对抗菌药物使用的预警机制[17]，在革兰阴性杆菌感染的经验性用药时应引起高度重视。革兰阴性杆菌的耐药率接近相关文献报道[18]。

表2　主要革兰阴性菌对抗菌药物的敏感率和耐药率Table 2 Susceptibility of gram negative bacteria to antibiotics（%）

表3　主要革兰阳性菌对抗菌药物的敏感率和耐药率Table 3 Susceptibility of gram positive bacteria to antibiotics（%）

在革兰阳性病原菌中金葡菌和凝固酶阴性葡萄球菌对青霉素、红霉素的耐药率超过70 %，且凝固酶阴性葡萄球菌耐药率高于金葡菌，与相关文献报道血培养病原菌耐药情况接近[2,19]，尚未发现耐万古霉素的葡萄球菌。耐药分析可见，检出病原菌对青霉素、苯唑西林、氨苄西林、红霉素这些常用抗菌药物耐药率较高，表明这些药物不宜作为首选治疗药物。而耐药率较低的氨基糖苷类和碳青霉烯类因其不良反应一般不首选用于临床抗感染，但针对多重耐药菌株所致的重度感染，仍是较好选择。因此，要合理规范使用抗菌药物，须在使用抗菌药物前采集标本进行细菌培养及药敏试验。同时，在细菌培养结果出来之前，可根据本院微生物实验室发放的相关细菌耐药情况统计，有针对性地进行经验治疗，合理应用抗菌药物，减少耐药菌的产生。微生物实验室也应在第一时间通知临床，有效缩短临床医师使用有效抗菌药物的时间延迟[20]，定期为临床提供细菌耐药数据及分析对临床合理使用抗菌药物起着至关重要的作用。

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Culture and?antimicrobial susceptibility of pathogenic microorganisms in ICU

MAO Wei, HUANG Chunhua, LAI Yongcai. （Department of Laboratory Medicine, Jianyang People's Hospital, Jianyang Sichuan 641400, China）

Objective To investigate the profi le of pathogenic microorganisms and their susceptibility pattern in intensive care unit. Methods The microbiological data of 1 307 positive cultures in ICU of our hospital during the period from January 2013 to October 2015 were analyzed. The pathogens were identifi ed and subjected to susceptibility testing with VITEK 2- Compact or ATBExpression. Results Of the 5 263 samples, 1 307 bacterial strains were isolated, including 1 061 strains of gram-negative bacteria (81.2 %), 191 strains of gram-positive bacteria (14.6 %), and 55 strains of fungus (4.2 %). Conclusions Gram-negative bacteria, especially Enterobacteriaceae, are the main pathogens of infection in ICU. We can use antimicrobial agents empirically to target such pathogens.

microbiological culture; pathogenic microorganism; antimicrobial resistance; intensive care unit

R378

A

1009-7708 ( 2016 ) 06-0747-04

10.16718/j.1009-7708.2016.06.012

四川省简阳市人民医院检验科，四川简阳 641400。

毛炜（1980—），男，学士，主管检验师，主要从事临床微生物检验。

毛炜，E-mail：312399429@qq.com。

2015-11-09

2016-04-29