胰腺癌患者血清VEGF-C及uPA水平检测的临床意义

潘超 李朱骁 杨坤兴 杨士勇 刘子君 席鹏程



·短篇论著·

胰腺癌患者血清VEGF-C及uPA水平检测的临床意义

潘超 李朱骁 杨坤兴 杨士勇 刘子君 席鹏程

胰腺癌是一种高度恶性、预后极差的消化系统肿瘤，大多数患者在就诊时已存在局部或远处的转移。血管生成及细胞外基质(ECM)降解是肿瘤生长、浸润及转移的重要环节。血管生长因子(VEGF)及其受体在肿瘤血管生成中起重要作用[1]。尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinose plasminogen activator，uPA)在降解ECM中起关键作用[2]。因此，本研究检测胰腺癌患者血清VEGF-C、uPA水平，分析其与临床病理及患者预后的关系，为胰腺癌的治疗和预后判断提供依据。

一、资料与方法

1．临床资料：收集2009年7月至2012年2月南京医科大学附属南京医院(南京市第一医院)胆胰普外科行十二指肠根治术且资料完整的40例胰腺癌患者资料，其中男性26例，女性14例，年龄39～79岁，平均年龄63岁。按美国癌症协会胰腺癌TNM分期(AJCC ，1997年)Ⅰ期2例,Ⅱ期24例，Ⅲ、Ⅳ期14例。选择40名健康志愿者作为对照，其中男性24例，女性16例，年龄37～78岁，平均63岁。试验经医院伦理委员会批准，患者及健康志愿者签署知情同意书。

2．标本采集和测定：患者入院1 d和术后10 d清晨空腹抽取外周静脉血2 ml，离心分离血清，置-80℃保存。同法抽取志愿者空腹外周血。检测前30 min取出血清标本置室温，采用ELASA法检测血清VEGF-C、uPA水平。 ELISA试剂盒购自武汉优尔生科技有限公司，严格按说明书操作。

3．随访：术后随访3年，随访截止日期为2015年2月28日，以日为单位计算生存时间。

二、结果

1．胰腺癌患者血清 VEGF-C及uPA水平的变化：胰腺癌患者术前、术后10 d及对照组血清VEGF-C水平分别为(31.94±22.45)、(14.26±6.29)、(13.70±6.75)pg/L，胰腺癌患者术前VEGF-C水平显著高于对照组(t=4.920)，术后10 d的水平显著低于术前(t=4.796)，差异均有统计学意义(P值均为0.000)，而术后10 d的VEGF-C水平与对照组间差异无统计学意义。

胰腺癌患者术前、术后10 d及对照组血清uPA水平分别为(687.84±351.34)、(521.81±344.45)、(518.14±473.44)pg/L，术前血清uPA水平与对照组间的差异无统计学意义(t=1.820,P=0.073)，而术前与术后血清uPA的差异有统计意义(t=2.134，P=0.036)。

2．胰腺癌患者血清 VEGF-C及uPA水平与肿瘤临床病理参数间的相关性

胰腺癌患者血清VEGF-C水平与肿瘤的直径、淋巴结转移相关；uPA水平与肿瘤的分期、结肠侵犯、淋巴结转移及TNM分期有关(表1)。

3．胰腺癌患者生存时间与患者血清 VEGF-C、uPA水平及肿瘤病理参数间的相关性：40例患者中35例死亡，5例存活，平均生存时间398 d，中位生存时间282 d，1、2、3年生存率分别为40.0%、17.5%、12.5%。

以术前血清VEGF-C 31.9 pg/L为界，>31.9 pg/L的患者生存时间显著短于≤31.9 pg/L者，两组间差异有统计学意义[(302±269)d比(496±348)d，χ2=3.953，P=0.047，图1]；以术后10 d 血清uPA 521.8 pg/L为界，>521.8 pg/L的患者生存时间与≤521.8 pg/L者的差异无统计学意义[(384±319)d比(411±332)d，χ2=0.025，P=0.847，图2]。术前血清VEGF-C高的患者与术后血清uPA高的患者的生存期存在相关性(r=0.334，P<0.05)。

此外，胰腺癌患者术后生存时间与肿瘤直径、淋巴结转移、pTNM分期相关(表2)。

讨论 血管生成是肿瘤生长、转移的重要前提和基础。其中VEGF是广泛存在于血管内皮细胞的刺激血管内皮细胞增生作用最强的因子，在肿瘤新生血管生成中起重要作用[1]，可作为判断多种肿瘤预后的指标[3-4]]。通过阻断VEGF及其受体进行抗肿瘤血管生成的研究虽取得明显效果[5]，但只是处于动物实验阶段，是否对人类大多数肿瘤具有同样效果尚难定论[6]。Kobayashi等[7]研究结果表明，血清VEGF水平可用于鉴别胰腺癌和慢性胰腺炎，且可判断胰腺癌有无远处转移及患者预后。

uPA在许多肿瘤，如前列腺癌、肺癌、乳腺癌和胃肠道恶性肿瘤中高表达，可作为判断肿瘤患者预后的一项指标。uPA在降解ECM的过程中可释放大量的原来储备在ECM中的生长因子或其前体，参与血管生成[8]，也可独立激活某些生长因子，如剪切VEGF189而发挥其促进新生血管的形成。同时，血管生长因子，如表皮生长因子(EGF)、胰岛素样生长因子(IGF)等又可诱导肿瘤组织内的其他相关细胞表达uPA及其受体。

表1 胰腺癌患者术前血清VEGF-C、uPA水平与肿瘤临床病理参数的相关性

图1 不同血清VEGF-C水平的胰腺癌患者生存曲线

图2 不同血清uPA水平的胰腺癌患者生存曲线

表2 胰腺癌患者术后生存时间与肿瘤病理参数的相关性

病理参数例数平均生存时间(d，x±s)t值P值性别 男26376±3030．6420．525 女14443±329年龄(岁) >6015357±2650．6210．540 ≤6025425±374肿瘤直径(cm) >231342±1553．2130．003 ≤29599±350肿瘤分期 高分化4423±3210．2240．824 中低分化36397±214神经浸润 是12378±3290．2580．798 否28409±348结肠侵犯 是10350±3130．6130．543 否30416±287淋巴结转移 有18251±2543．0700．004 无22521±293TNM分期 Ⅰ、Ⅱ期17569±3723．1600．003 Ⅲ、Ⅳ期23275±212

本研究结果显示，胰腺癌患者术前血清VEGF-C水平显著高于对照组，术后血清VEGF-C水平显著下降(P=0.000)，术前血清VEGF-C水平高的患者生存期短于水平低者，与Longo等[9]研究结果相符。另外，患者术前血清VEGF-C水平与淋巴结转移、肿瘤大小相关，提示VEGF在胰腺癌的发生、发展过程中起重要作用，可作为评价胰腺癌预后的指标。本研究结果还显示，术前uPA血清水平与肿瘤的TNM分期、结肠浸润、淋巴结转移有关，但血清uPA水平高、低两组患者的生存期差异无统计学意义，与Dubuisson等[10]报道的肝癌uPA高表达者生存期短的结果不一致，这可能与病例数小有关，有待积累更多病例进一步验证。

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(本文编辑：吕芳萍)

10.3760/cma.j.issn.1674-1935.2016.05.014

210006 南京，南京医科大学附属南京医院(南京市第一医院)胆胰普外科

席鹏程，Email: plt3081@163.com

2016-02-23)