抗α—胞衬蛋白抗体对原发性干燥综合征的诊断价值

严鸣光　方晓　郭建军

[摘 要] 目的：分析抗α-胞衬蛋白（α-Fodrin）抗体对原发性干燥综合征（Primary Sj?gren syndrom，pSS）的诊断价值。方法：选取我院2012年9月—2015年9月收治的89例pSS患者，并选取同期45例继发性干燥综合征（Secondary SS，sSS）患者、91例系统性红斑狼疮（Systemic lupus erythematosus，SLE）患者、154例类风湿性关节炎（Rheumatoid arthritis，RA）患者及100例健康体检者，使用酶联免疫吸附（ELISA）法对其血清抗α-Fodrin IgA、IgG抗体进行定量检测，均以检测结果>15 U/mL为阳性标准，比较各组受试者血清α-Fodrin IgA、IgG抗体阳性率，并计算抗α-Fodrin抗体对pSS诊断的灵敏度、特异性，分析其诊断价值。结果：pSS组抗α-Fodrin IgA、IgG抗体阳性率均显著高于其他各组，sSS组抗α-Fodrin IgA、IgG抗体阳性率均显著高于SLE组、RA组及对照组，差异有统计学意义（P<0.05）；抗α-Fodrin IgA抗体诊断pSS的灵敏度、特异性分别为65.17%、94.62%，抗α-Fodrin IgG抗体诊断pSS的灵敏度、特异性分别为64.38%、96.67%。结论：抗α-Fodrin抗体诊断pSS有着较高的特异性，但灵敏度有限，故抗α-Fodrin抗体阳性仅可用于pSS的临床辅助诊断，但抗α-Fodrin抗体阴性患者仍不能除外pSS，需以病理检查明确诊断。

[关键词] 抗α-胞衬蛋白抗体；原发性干燥综合征；诊断

中图分类号：R392 文献标识码：B 文章编号：2095-5200（2016）05-084-03

[Abstract] Objective： To analyze the diagnostic value of anti-alpha-fodrin （α-fodrin） antibodies in primary Sj?grens syndrome （pSS）. Methods： 89 cases of pSS patients in our hospital from September 2012 to September 2015 were selected， and 45 cases of secondary Sjogren syndrome （secondary SS， sSS）， 91 cases of patients with systemic lupus erythematosus （SLE）， 154 cases of patients with rheumatoid arthritis （RA） and 100 healthy subjects during the same period were also included. Using enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） on the quantitative detection of serum anti-alpha-fodrin IgG and IgA antibodies， with the detection result of >15 U/mL as positive standard， compare the positive rate of serum anti-alpha-fodrin IgG and IgA antibodies in each group of subjects， and calculate and analyze the sensitivity and specificity of anti-alpha-fodrin antibodies on the diagnosis of pSS. Results： Positive rates of anti-alpha-fodrin IgG and IgA antibodies in pSS group were significantly higher than those in the other groups. Positive rates of anti-alpha-fodrin IgG and IgA antibodies in sSS group were significantly higher than those in SLE group， RA group and control group， the differences were statistically significant （P<0.05）； sensitivity and specificity of anti-alpha-fodrin IgA antibodies in the diagnosis of pSS were 65.17% and 94.62%， and sensitivity and specificity of anti-alpha-fodrin IgG antibodies in the diagnosis of pSS were 64.38% and 96.67%， respectively. Conclusions： anti-alpha-fodrin antibodies in the diagnosis of pSS with high specificity， but the sensitivity is limited， so anti-alpha-fodrin antibodies which were positive can only used for clinical assistant diagnosis of pSS， but the anti-alpha-fodrin antibodies negative patients still cannot be excluded with pSS， which should be pathologically examined for clear diagnosis.

[Key words] anti-alpha cytoplasmic antibody； primary dry syndrome； diagnosis

干燥综合征（Sj?gren syndrom，SS）是常见的自身免疫系统紊乱性疾病，发病率约为0.5%～5.0%，其临床特点以泪腺、唾液腺淋巴细胞浸润并引发角膜结膜炎及口腔干燥为主[1]。其中，原发性干燥综合征（Primary SS，pSS）由遗传、病毒感染和性激素异常等多种因素引发，是SS最常见的类型，且常伴有肺、肝、肾、血液系统和神经系统受累，严重时可威胁患者生存质量[2]。抗SSA抗体、抗SSB抗体是诊断pSS的常用指标，但抗SSA抗体在系统性红斑狼疮（Systemic lupus erythematosus，SLE）等其他自身免疫性疾病中亦有着较高的阳性率，且抗SSB抗体敏感度较低，同时，唇腺活检和腮腺造影为有创检查且费用较高，临床推广受限，因此，目前临床pSS的漏诊率及误诊率仍处于较高水平[3-4]。故寻求一种敏感度、特异性高的血清学指标是早期明确pSS诊断的关键。我们选取抗α-胞衬蛋白（α-Fodrin）抗体，以我院2012年9月—2015年9月收治的479例受试者为研究对象进行了前瞻性研究。

1 一般资料

1.1 病例资料

选取我院2012年9月～2015年9月收治的89例pSS患者，并选取同期45例继发性干燥综合征（Secondary SS，sSS）患者、91例SLE患者、154例类风湿性关节炎（Rheumatoid arthritis，RA）患者及100例健康体检者，分别纳入pSS组、sSS组、SLE组、RA组及对照组，实施前瞻性对照研究。入选者排除： 1）合并其他自身免疫系统病变；2）合并全身感染或恶性肿瘤；3）入组前1个月内有免疫抑制剂、激素类药物使用史。各组受试者年龄、性别比例比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。本临床研究经我院医学伦理学委员会批准，受试者均知情同意并签署知情同意书。

1.2 研究方法

1.2.1 检测方法 抽取各组受试者清晨空腹静脉血3 mL，离心分离血清，置于-20℃冰箱中保存，统一检测。由我院两名检验医师，使用酶联免疫吸附（ELISA）法检测其血清抗α-Fodrin IgA、IgG抗体水平，取平均值[5]。重组人类α-Fodrin抗原ELISA试剂盒购自德国Aesku公司，磷酸缓冲液、96孔板等其余试剂与耗材均购自海门康乐实验器材厂。

1.2.2 观察指标 均以抗α-Fodrin IgA、IgG抗体水平>15 U/mL为阳性判断标准，比较各组受试者血清抗体阳性率，并计算抗α-Fodrin IgA、IgG抗体诊断pSS的灵敏度、特异性、假阳性率、假阴性率、阳性预测值及阴性预测值，计算方法[6]：灵敏度=真阳性人数/（真阳性人数+假阴性人数）；特异性=真阴性人数/（真阴性人数+假阳性人数）；假阳性率=假阳性人数/（真阴性人数+假阳性人数）；假阴性率=假阴性人数/（真阳性人数+假阴性人数）；阳性预测值=真阳性人数/（真阳性人数+假阳性人数）；阴性预测值=真阴性人数/（假阴性人数+真阴性人数）。

1.2.3 统计学分析 对本临床研究的所有数据采用SPSS18.0进行分析，计数资料以（n/%）表示，并采用χ2检验，计量资料以（x±s）表示，并采用t检验，检验水准设定为α=0.05，以P<0.05为有统计学意义，以P<0.01为有显著统计学意义。

2 结果

2.1 各组受试者抗α-Fodrin抗体阳性率比较

pSS组抗α-Fodrin IgA、IgG抗体阳性率均显著高于其他各组，sSS组抗α-Fodrin IgA、IgG抗体阳性率均显著高于SLE组、RA组及对照组，差异有统计学意义（P<0.05），见表1。

2.2 抗α-Fodrin抗体诊断pSS的价值分析

抗α-Fodrin IgA抗体诊断pSS的灵敏度、特异性分别为65.17%、94.62%，抗α-Fodrin IgG抗体诊断pSS的灵敏度、特异性分别为64.38%、96.67%，见表2。

3 讨论

SS是一种慢性全身性自身免疫系统病变，临床表现复杂多样，无论是pSS还是sSS，患者均以淋巴细胞大量浸润外分泌腺为主要病理表现，腺体正常结构的破坏使得其分泌能力下降，继而引发口干、眼干、眼部异物感、进食困难等临床症状，日常工作生活受到严重影响[7]。唇腺活检是SS诊断的“金标准”，但其属于有创检查且成本较高，不易于临床推广[8]。

过往研究表明，抗SSA抗体、抗SSB抗体在SS的诊断中具有较高的阳性率，但同时也在SLE等其他自身免疫性疾病中呈现高表达，故上述指标无法作为SS的有效诊断依据[9]。与此同时，sSS患者多具有诊断明确的结缔组织病，如SLE、RA、皮肌炎等，故通过患者临床症状与血清学检测结果判断sSS并不困难，因此，有效降低pSS的误诊、漏诊率是保证SS诊断准确性的关键。

20世纪70年代末，有学者发现α-Fodrin在SS的发病中扮演了重要角色，并指出抗α-Fodrin抗体可能是SS筛选抗体之一，也是引发SS腺外表现的重要物质[10]。α-Fodrin是一种肌动结合细胞骨架蛋白，由α和β两个亚单位组成。Konttinen等[11]动物实验结果表明，α亚单位在凋亡过程中可裂解释放120 kD片段，可特异性刺激SS小鼠模型的脾细胞增殖，进一步表明α-Fodrin在SS发病中发挥的重要作用。本研究结果示，pSS、sSS患者血清抗α-Fodrin IgA、IgG抗体阳性率均显著高于SLE患者、RA患者及健康人群，且pSS患者阳性率更高，与石亚妹等[12]研究结论一致，说明抗α-Fodrin抗体在SS的诊断中具有一定意义。同时，参照Lucchesi等[13]提出的标准，以15 U/mL为抗α-Fodrin IgA、IgG抗体阳性阈值，抗α-Fodrin IgA抗体诊断pSS的灵敏度、特异性分别为65.17%、94.62%，抗α-Fodrin IgG抗体诊断pSS的灵敏度、特异性分别为64.38%、96.67%，表明可通过抗α-Fodrin抗体阳性结果判定患者pSS发生，但需要注意的是，其诊断pSS的灵敏度不足70%，说明即使抗α-Fodrin抗体阴性患者，仍不能排除pSS，建议通过唇腺活检明确诊断。

Chin等[14]研究发现，传统抗SSA抗体、抗SSB抗体在pSS的诊断中灵敏度仅为30%左右，特异性亦不足90%，较抗α-Fodrin抗体的诊断价值存在较大差距。但我们认为，虽然抗α-Fodrin抗体特异性较高，但仍存在一定局限性，故不能作为诊断pSS的主要指标，亦无法取代其他抗体在pSS诊断中的地位，因此，在今后的pSS临床诊断中，可在传统抗体检测的基础上联合抗α-Fodrin抗体检测，以在一定程度上提高诊断的效果。此外，Kim等[15]指出，由于α-Fodrin在pSS的发生发展过程中发挥了重要作用，且pSS患者组织损伤过程中均伴有IgA循环免疫复合物的参与，因此，根据血清抗α-Fodrin抗体定量检测结果亦有可能明确患者疾病活动度，指导治疗方案的制定与实施，且以抗α-Fodrin靶向治疗有望改善pSS患者预后质量。关于该方面研究，我们将在日后的工作中加以补充。

总体而言，抗α-Fodrin抗体在pSS的诊断中具有较高的特异性，但灵敏度有限，故抗α-Fodrin抗体仅可作为pSS的辅助诊断指标用于临床联合诊断，对于抗α-Fodrin抗体阳性患者，应高度怀疑pSS风险，但抗α-Fodrin抗体阴性患者仍不能被排除pSS，建议行唇腺活检。

参 考 文 献

[1] Okuma A， Hoshino K， Ohba T， et al. Enhanced apoptosis by disruption of the STAT3-IκB-ζ signaling pathway in epithelial cells induces Sj?grens syndrome-like autoimmune disease[J]. Immunity， 2013， 38（3）： 450-460.

[2] 石亚妹， 罗采南， 王爱雪， 等. 抗 α-fodrin 抗体在干燥综合征诊断中的价值[J]. 川北医学院学报， 2015， 30（5）： 659-662.

[3] SINGH N， COHEN PL. The T cell in Sjogrens syndrome： force majeure， not spectateur[J]. J Autoimmun， 2012， 39（3）： 229-233.

[4] 殷寒秋， 马华， 刘春梅， 等. 抗 SSA， 抗 SSB， 抗 α-胞衬蛋白抗体及类风湿因子联合检测在原发性干燥综合征的诊断价值[J]. 徐州医学院学报， 2014， 34（1）： 41-43.

[5] IWASA A， ARAKAKI R， HONMA N， et al. Aromatase controls Sj?gren syndrome-like lesions through monocyte chemotactic protein-1 in target organ and adipose tissue-associated macrophages[J]. Am J Pathol， 2015， 185（1）： 151-161.

[6] 庞春艳， 吕凤凤， 杨麟， 等. α-胞衬蛋白 siRNA 对干燥综合征模型 NOD 小鼠 IFN-γ 和 IL-4 表达水平及基因沉默效果的影响[J]. 吉林大学学报 （医学版）， 2013， 39（3）： 548-553.

[7] XU J， WANG D， LIU D， et al. Allogeneic mesenchymal stem cell treatment alleviates experimental and clinical Sj?gren syndrome[J]. Blood， 2012， 120（15）： 3142-3151.

[8] PAVLAKIS PP， ALEXOPOULOS H， KOSMIDIS ML， et al. Peripheral neuropathies in Sj?grens syndrome： a critical update on clinical features and pathogenetic mechanisms[J]. J Autoimmun， 2012， 39（1）： 27-33.

[9] 庞春艳， 王蓓， 王永福. α-胞衬蛋白 siRNA 对干燥综合征模型 NOD 小鼠血清中 IL-2， IL-6 和 TGF-β 的影响[J]. 包头医学院学报， 2013， 29（4）： 1-3.

[10] Pasoto S G， Ribeiro A C， Viana V S T， et al. Short and long-term effects of pandemic unadjuvanted influenza A （H1N1） pdm09 vaccine on clinical manifestations and autoantibody profile in primary Sj?grens syndrome[J]. Vaccine， 2013， 31（14）： 1793-1798.

[11] Konttinen Y T， Fuellen G， Bing Y， et al. Sex steroids in Sj?grens syndrome[J]. J Autoimmun， 2012， 39（1）： 49-56.

[12] 石亚妹， 武丽君， 李彩萍. 抗 α-fodrin 抗体与干燥综合征关系的研究进展[J]. 新疆医学， 2012， 42（3）： 51-53.

[13] LUCCHESI D， PITZALIS C， BOMBARDIERI M. EBV and other viruses as triggers of tertiary lymphoid structures in primary Sj?grens syndrome[J]. Expert Rev Clin Immuno， 2014， 10（4）： 445-455.

[14] CHIN MS， HOOPER LC， HOOKS JJ， et al. Identification of α-fodrin as an autoantigen in experimental coronavirus retinopathy （ECOR）[J]. J Neuroimmuno， 2014， 272（1）： 42-50.

[15] Kim N， Song Y W， Park K. A Potential Role of Autoantibodies against Muscarinic Type 3 Receptor in Pathogenesis of Sj?grens Syndrome[J]. J Clin Cell Immunol， 2014， 5（275）： 2.