卧龙自然保护区一鬣羚死亡原因剖析

李才武 瞿春茂 金森燕 何永果 杨 乾杨 波 王承东 刘世才 李德生*

(1.卧龙自然保护区管理局中国保护大熊猫研究中心，都江堰，611800；2.四川省卧龙自然保护区管理局，都江堰，623006)

卧龙自然保护区一鬣羚死亡原因剖析

李才武1瞿春茂1金森燕1何永果1杨 乾1杨 波1王承东1刘世才2李德生1*

(1.卧龙自然保护区管理局中国保护大熊猫研究中心，都江堰，611800；2.四川省卧龙自然保护区管理局，都江堰，623006)

鬣羚；

为调查2008年汶川大地震后卧龙自然保护区每年冬季都会有野生鬣羚死亡的原因，作者对2015年1月6日卧龙自然保护区内1死亡的野生鬣羚进行病理、细菌、寄生虫病原等实验室诊断。根据实验室诊断结果，并综合分析野生鬣羚的生存环境，其死亡原因为：受2008年汶川大地震影响，鬣羚野外栖息地遭受严重破坏，采食不足；且长期感染体表寄生虫疥螨，造成营养物质代谢障碍，导致机体免疫力低下；金黄色葡萄球菌侵入机体，引起全身多器官发生实质性病变而死亡。本研究结果为保护区野生动物保护人员对鬣羚及其他野生动物的保护提供了指导意义。

鬣羚(Capricornissumatraensis)，也叫苏门羚、明鬃羊、山驴子、岩驴、四不像、天马、牧羊等，属洞角科(Bovidae)，典型林栖兽类，是亚洲东南部热带、亚热带地区的典型动物之一，主要活动于海拔1 000～4 400 m针阔混交林、针叶林或多岩石的杂灌林。它的角像鹿不是鹿、蹄像牛不是牛、头像羊不是羊、尾像驴不是驴，人们据此将其与驯鹿(Ramgifertarandus)、驼鹿(Alcesalces)和麋鹿(Elaphurusdavidianus)一起称为“四不像”。因其最早是在印尼的苏门答腊被发现的，因此又叫苏门羚。在中国，目前主要分布于甘肃、青海、浙江、安徽、湖北、江西、四川、云南、西藏、福建、广东、广西等地，是中国国家Ⅱ级重点保护动物[1]。

卧龙自然保护区位于四川省西部汶川县境内，1980年初被联合国纳入世界生物圈保护区网。保护区面积为20万hm2，主要保护西南高山林区自然生态系统和大熊猫等珍稀动物[2]。这里是亚热带向青藏高原的过渡地带，由于高山阻挡了太平洋东来的气流及西风环流，形成终年温凉湿润的亚热带山地气候。年均温8.9℃，最高温度29.2℃，最低温度-8.5℃，年降水量931 mm，有着丰富的动植物资源。区内共有列为国家级重点保护的其他珍稀濒危动物川金丝猴(Rhinopithecusroxellana)、羚牛(Budorcastaxicolor)等共有56种，其中属于国家Ⅰ级重点保护的野生动物共有12种，Ⅱ级保护动物44种，常见羚牛、野猪(Susscrofa)、鬣羚等野生动物出没[3]。但自从2008年汶川大地震之后，每年冬季在山下河坝、公路边处常发现有奄奄一息的鬣羚或者已经死亡的尸体。

1 材料与方法

1.1 实验材料

2015年1月6日，卧龙自然保护区工作人员在卧龙海拔1 800 m处发现一鬣羚，经抢救无效于1月7日死亡，采集样品送到四川农业大学实验室检测。

1.2 实验方法

1.2.1 临床检查

眼观有无外伤及明显病灶，触摸有无骨折。

1.2.2 病理学检查

对死亡鬣羚尸体进行剖解，取出心脏、胃、脾脏、大肠、小肠、肝脏(胆囊)、肺脏、膀胱及肾脏，用4%甲醛溶液浸泡固定，进行石蜡包埋、切片，用HE染色法观察其病理组织学变化。

1.2.3 病原微生物检查

对送检病料肺脏、肝脏、肾脏、心脏、胰脏、脾脏，采用美兰触片染色镜检技术进行镜检。将送检的肺脏、肝脏、肾脏、心脏、胰脏、脾脏、肠、气管、胃内容物、外周血和粪便接种至血平板琼脂培养基，恒温培养箱37℃培养48 h，观察结果。挑取培养出的细菌菌落进行革兰氏染色镜检。菌落PCR方法扩增可疑细菌16SrDNA序列片段，将扩增产物送至华大基因测序。

使用已鉴定的可疑病原菌接种5只小鼠，腹腔注射，观察细菌的致病性。解剖死亡的小鼠，并进行细菌分离培养和鉴定。

1.2.4 皮肤螨的检查

显微镜下直接检查法，将患区皮肤和健康皮肤交界处刮下的皮屑置载玻片上，加入少量50%甘油水溶液，覆以另一张载玻片，搓压载玻片使病料散开，分开载玻片，置显微镜下检查。

2 结果

2.1 临床检查

鬣羚，雌性，年龄在2岁左右。外观极度瘦弱，皮毛焦枯无光泽，腹部两侧及眼部周围感染疥螨(Sarcoptessp.)严重，患区皮肤呈麸糠状(附图1)。无外伤，无骨折。

2.2 病理学检查

2.2.1 消化系统

胃粘膜上皮变矮、消失，胃腺间质水肿、炎细胞浸润，出血(附图2)；大肠黏膜上皮断裂，消失，肠腺轻度萎缩，炎性细胞浸润(附图3)；胆囊胆汁浸染上皮，结构基本正常(附图4)；肝组织局部干酪样坏死、肝硬化(附图5)。

2.2.2 呼吸系统

肺气肿，肺泡隔变薄、断裂，可见局部出血(附图6)。

2.2.3 泌尿系统

膀胱上皮中度肿胀伴脱落，出血(附图7)；肾大面积凝固性坏死，部分肾小管萎缩，间质变窄、消失，肾小球增大出血(附图8)。

2.3 病原微生物检查

对送检病料肺脏、肝脏、肾脏、心脏、胰脏、脾脏，采用美兰触片染色镜检技术，只观察到组织细胞未见细菌。对送检的肺脏、肝脏、肾脏、心脏、胰脏、脾脏、肠、气管、胃内容物、外周血和粪便进行细菌分离培养，其中肠、胃内容物、粪便接种的培养基长出的细菌菌落较复杂，故未再做进一步鉴定；肺脏、肝脏、肾脏、心脏、胰脏、脾脏、气管、外周血接种的培养基长出形态较均一的细菌菌落：菌落呈金黄色，边缘整齐，表面光滑，中等大小。革兰氏染色镜检结果显示为革兰氏阳性菌球菌，呈葡萄串状排列，经16SrDNA测序比对，结果与GenBank中已报道的金黄色葡萄球菌同源率最高，为99.1%。说明分离的细菌为金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)。

腹腔注射样品菌液的5只小鼠均在24 h内死亡。剖检死亡小鼠，病理变化如下：肺淤血、水肿；肝脏淤血、肿大，表面有大小不一的脓肿小结节；胸腺偶见出血；脾脏肿大、坏死，在表面和切面上可见多个大小不等的坏死灶；肾脏肿大、色淡；胃粘膜水肿增厚，粘膜下或表面出现脓性溃疡灶；肠系膜和浆膜的小血管扩张、充血，肠粘膜有小的出血点。从肾脏、肺、脾脏接种培养基均长出菌落呈金黄色，边缘整齐，表面光滑，中等大小菌落。革兰氏染色镜检结果显示，分离菌为革兰氏阳性球菌。综合以上结果，鉴定为金黄色葡萄球菌。说明从死亡鬣羚组织病料中分离到的金黄色葡萄球菌对小鼠具有较强致病性，可能是导致鬣羚死亡的原因。

2.4 皮肤螨的检查

皮肤病料实验室镜检可见呈典型的疥螨虫卵(附图9)。

3 讨论与分析

疥螨病是由疥螨科(Sarcoptidae)、疥螨属(Sarcoptes)的螨寄生于动物的表皮层内所引起的慢性、寄生性皮肤病，患病动物以患部巨痒、结痂、脱毛、皮肤增厚和畜体消瘦为特征。由于疥螨在体内不停地分泌毒素、吸收营养、血清中游离脂肪酸显著上升、血液中红细胞压积显著下降等因素的影响直接或间接损伤细胞膜结构，破坏线粒体的氧化酶系统，使3大营养物质代谢发生障碍，ATP生成减少，影响维生素、无机离子的代谢，正常的细胞结构因而遭到破坏[4]。机体表现为表皮细胞变性、坏死，造成体况下降，皮肤受损后引起金黄色葡萄球菌的感染而引起动物的死亡。

2008年5月12日，四川省汶川发生了里氏8.0级大地震，野生动物栖息地受到很大影响，相关文献报道已经很多。如韩文在震后卧龙自然保护区大熊猫生境评价和恢复研究报道，此次地震影响区域广阔，四川、陕西和甘肃3省受损最为严重，以大熊猫等珍稀动物和高山森林系统保护为主的卧龙自然保护区，地表植被大面积破坏[5]；张晋东等在汶川地震后野生动物及栖息地的调查中报道，地震导致的野生动物栖息地受灾面积较大，发生次生地质灾害点较多，野生动物无法避开众多的次生地质灾害点[6]；刘明冲等在卧龙自然保护区地震后植被修复问题初探中报道，地震对大熊猫栖息地产生了较大影响，生境破坏面积达到4 259 hm2[7]。鬣羚主要以各种杂草、树叶、落果、菌类为食[8]，其栖息地及采食受地震影响巨大。

目前圈养动物螨虫病的防治手段已经很成熟了，报道也比较多。如杨兴康等指出，在寒冷季节或个别发病时多采用局部用药，天气较温暖或大批发病时采用喷雾器内脱螨净或敌百虫溶液进行喷洒治疗[9]；殷红等认为应对已经确诊的患畜及时隔离治疗[10]；吴晓明等提出让广大牧民懂得寄生虫病的流行规律，增加群众预防寄生虫病的科学知识[11]。而野生动物螨虫病的防治还缺乏有效的手段，笔者认为要保护好鬣羚等野生动物免遭疥螨虫的侵袭，必须要做到在保护好现有栖息地基础上，增加植被数量及种类；秋末冬初天气寒冷的时候在野生鬣羚等野生动物主要活动区可考虑探索性人工投喂一些拌有杀螨药的饲料。

4 结论

受2008年汶川大地震影响，卧龙自然保护区野生鬣羚野外栖息地遭受严重破坏，采食不足，加上鬣羚长期感染体表寄生虫疥螨，造成营养物质代谢障碍，最终造成机体免疫力低下，金黄色葡萄球菌等强致病性菌侵入机体，引起全身多器官发生实质性病变而死亡。本研究结果为保护区野生动物保护人员对鬣羚及其他野生动物的保护提供了指导意义。

[1] 杨光友，赖从龙，杨学成，等.九寨沟自然保护区苏门羚群发性疥螨病的调查[J].四川动物，1997，16(2)：86.

[2] 卧龙自然保护区管理局，南充师范学院生物系，四川省林业厅保护站.卧龙植被及资源植物[M].成都：四川科学技术出版社，1987：1.

[3] 胡锦矗，夏勒.卧龙的大熊猫[M].成都：四川科学技术出版社，1985：18.

[4] 钟妮娜，徐顶，吴宥析，等.一起自然保护区岩羊皮肤病的诊断[J].动物医学进展.2010，31(1)：122-124.

[5] 韩文.震后卧龙自然保护区大熊猫生境评价和恢复研究[D].北京：首都师范大学，2013.

[6] 张晋东，徐卫华，欧阳志云，等.汶川地震后野生动物及栖息地的调查-以龙溪虹口和千佛山自然保护区为例[J].生态学报，2008，28(12)：5842-5847.

[7] 刘明冲.卧龙自然保护区地震后植被修复问题初探[C]//第二届中国林业学术大会——S5森林病害及其防治论文集.2009.

[8] 向定乾.中华鬣羚[J].知识就是力量，2009(11)：82.

[9] 杨兴康，彭海云，马秀珍.牦牛螨病的防治[J].青海农牧业，2014(3)：41-42.

[10] 殷红，李莉莉.山羊疥螨病及其防治经验[J].养殖技术顾问，2012(2)：135.

[11] 吴晓民，胡罕，张洪峰，等.藏羚羊寄生虫感染现状分析[J].经济动物学报，2013，17(2)：63-66.

附图

Serow；Earthquake；Mites

AnAnalysisofSerowMortalityinWolongNatureReserve

LiCaiwu1QuChunmao1JinSenyan1HeYongguo1YangQian1YangBo1WangChengdong1LiuShicai2LiDesheng1*

(1.ChinaGiantPandaConservationandResearchCenter，Dujiangyan，611800，China；2.SichuanProvinceWolongNatureReserveAdministration，Dujiangyan，623006，China)

After the Wenchuan Earthquake in 2008，every winter there have been deaths of wild serows in Wolong National Nature Reserve.On 6 January 2015，researchers found one dead serow and investigated the cause of death based on diagnosis through pathology，bacteriology，and parasitology laboratory examinations.Based on results of laboratory tests and in view of the living environment，deaths have been attributed to three causal factors.First，food intake is inadequate，because of the severely damaged habitats，which were ruined in the earthquake in 2008.Then，its long-term itch mite infection leads to severe malnutrition and hypoimmunity.Moreover，high pathogenicity bacteria invasion，such as staphylococcus aureus，causes multi-organ solid lesions，resulting in body failure and death.These results can guide serow conservation for wildlife protection personnel in Woolong National Nature Reserve.

稿件运行过程

2015-10-24

修回日期：2016-01-25

发表日期：2016-05-10

地震；

疥螨

S858.9

A

2310-1490(2016)02-147-04

李才武，男，35岁，工程师，兽医硕士；主要从事野生动物保护及大熊猫临床兽医工作。E-mail：83330019@qq.com

*通讯作者：李德生，E-mail:1050133153@qq.com

图1 眼睛及嘴周围结痂、脱毛Fig.1 Crusts and hair loss around eyes and mouth

图2 胃粘膜上皮变矮、消失，胃腺间质水肿，炎细胞浸润，出血Fig.2 Gastric mucosal epithelium become short and disappear；gastric interstitial edema；leukocyte infiltration and hemorrhage

图3 大肠黏膜上皮断裂、消失，肠腺轻度萎缩，炎性细胞浸润Fig.3 Colorectalmucosal epitheliumrupture and disappear gland mild ntestinal atrophy，leukocyte infiltration

图4 胆囊胆汁浸染上皮，结构基本正常Fig.4 Epithelium is disseminated by bile，with normal structure

图5 肝组织局部干酪样坏死，肝硬化Fig.5 Local caseous necrosis in hepatic tissue，hepafic cirrhosis

图6 肺泡隔变薄、断裂，可见局部出血Fig.6 Alveolar septum becomes thin and rupture，local hemorrhage

图7 膀胱上皮中度肿胀伴脱落，出血Fig.7 Bladder urothelium moderate swelling with cells loss and hemorrhage

图8 肾大面积凝固性坏死，部分肾小管萎缩，间质变窄Fig.8 Massive coagulative necrosis in kidney；a portion of renal tubules atrophy，renal interstitium become narrow

图9 镜检：疥螨图像Fig.9 Microscopy x 400：sarcoptes mites