质谱技术在诊断急淋中枢神经系统白血病中的应用研究

田文洪　王晓燕　莫志芳

【摘要】目的 研究质谱技术在诊断急淋中枢神经系统白血病中的应用价值。方法 选取我院2015年1月～12月收治的急性淋巴白细胞（ALL）患者20例作为研究对象，及健康体检者10名为研究对象，应用SELDI-TOF-MS质谱技术检测其脑脊液建立蛋白质指纹模型图，并分析差异蛋白。结果 与对照组比较，单纯ALL组发现有8个差异显著的蛋白峰，差异有统计学意义（P<0.05）；与单纯ALL组比较，ALL合并CNSL组发现有11个差异显著的蛋白峰，差异有统计学意义（P<0.05）。对差异蛋白建立决策树模型，用此模型诊断ALL合并CNSL，敏感性85.71%（6/7），特异性为91.30%（21/23）。结论 应用SELDI-TOF-MS质谱技术建立急淋中枢神经系统白血病患者脑脊液蛋白质指纹模型图，发现差异蛋白，有助于疾病诊断。

【关键词】急淋中枢神经系统白血病；质谱技术；蛋白质指纹图谱；诊断

【中图分类号】R733.7 【文献标识码】B 【文章编号】ISSN.2095-6681.2016.16..02

研究表明[1]，中枢神经系统白血病（CNSL）是ALL复发的主要根源之一，因此，早期诊断CNSL，并及早给予干预措施有助于改善患者预后。随着蛋白质组学的发展，采用现代先进科学仪器，如质谱，发现一些与肿瘤的恶性转化、细胞增殖、抑制凋亡等相关的蛋白在病理状态下会出现异常，对疾病诊断及预后判断具有重要价值。本文以此为背景，研究质谱技术在诊断急淋中枢神经系统白血病中的应用价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取我院2015年1月～12月收治的ALL患者20例作为研究对象，根据是否合并CNSL分为两组：单纯ALL组13例，男8例，女5例，年龄29～58岁，平均年龄（39.5±7.06）岁；ALL合并CNSL组7例，男4例，女3例，年龄31～54岁，平均年龄（41.1±6.42）岁。所有患者均符合WHO制定的诊断标准，并经骨髓形态学、免疫组化等检查确诊。同期接收的脑脊液及生化检查无异常的健康体检者10名为对照组，男6名，女4名，年龄30～60岁，平均年龄（40.8±7.47）岁。三组一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05）。

1.2 标本采集及检测方法

腰椎穿刺抽取脑脊液标本，3000 r/min离心处理10 min，取上清液，置于-20℃冰箱内保存。取脑脊液标本，冰浴解冻后与等体积U9裂解液充分混匀。将处理好的样品加入到弱阳离子交换型蛋白质芯片（WCX2，Ciphergen Biosystems 公司）的每一个孔中。置于振荡器中反复震荡冲洗后，吹干。使用Protein Chip Biology System（PBS?-c）质谱仪进行测定。

1.3 统计学方法

采用SPSS 19.0统计学软件对数据进行分析处理，计量资料以“x±s”表示，采用t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

与对照组比较，单纯ALL组发现有8个差异显著的蛋白峰，差异有统计学意（P<0.05）；与单纯ALL组比较，ALL合并CNSL组发现有11个差异显著的蛋白峰，差异有统计学意（P<0.05）。

3 讨 论

白血病是造血干细胞恶性克隆的白血病细胞增殖失控、在骨髓或者其他造血组织中大量累积、浸润，抑制正常造血细胞功能的一种恶性克隆性血液系统疾病，任何年龄均可发病，ALL是最常见的成人急性白血病之一，据统计[2]，其在我国人群中的发病率高达5～6/10万人次。随着白血病发病机制研究的深入，化疗方案可以最大限度的杀灭体内白血病细胞，对于无高危因素存在的ALL患者有效率可高达70%[3]。但是对于存在高危因素的患者，如ALL患者合并CNSL时，会导致病情进展加快、髓外浸润范围广等，化疗方案治疗有效率不足50%，患者死亡率高。目前，除根据患者脑脊液常规细胞学涂片法结果外，因该病缺乏灵敏的实验室数据检测指标，导致对CNSL的早期诊断造成一定的困难。

本文研究表明，应用SELDI-TOF-MS质谱技术检测急淋中枢神经系统白血病脑脊液建立蛋白质指纹模型图，与单纯ALL组比较，ALL合并CNSL组发现有11个差异显著的蛋白峰，差异有统计学意义（P<0.05），为ALL合并CNSL诊断有积极的临床意义。但是本研究中，对差异蛋白建立决策树模型，用此模型诊断ALL合并CNSL，敏感性85.71%（6/7），特异性为91.30%（21/23），低于文献报道[4]，可能与本研究纳入例数较少有关。

综上所述，应用SELDI-TOF-MS质谱技术建立急淋中枢神经系统白血病患者脑脊液蛋白质指纹模型图，发现差异蛋白，有助于疾病诊断。

参考文献

[1] Patel JP，G6nen M，Figueroa ME，et a1.Prognostic relevance of integrated genetic profiling in acute myeloid leukemia[J].N Engl J Med，2012，366（12）：1079-1089.

[2] 刘育欣，王婷婷，肖玉玲，等.不同临床分类的急性白血病患者病原学数据分析[J].现代预防医学，2016，43（10）：185-187，192.

[3] 赵 玥，孙雪静，万岁桂，等.急性髓系白血病细胞免疫表型与疾病复发的关系[J].白血病，淋巴瘤，2011，20（5）：307-309.

[4] 何爱丽，白 菊，黄 辰.等.急性髓系白血病血清标志物初步筛选及临床意义[J].中国实验血液学杂志，2010，18（5）：1132-1137.

本文编辑：刘帅帅