2型糖尿病肾病患者血清白细胞介素-9、白细胞介素-17和转化生长因子-1的水平及临床意义

吴强鹏，刘红

(1.攀枝花学院附属医院内分泌科，四川 攀枝花　617000；2.川北医学院生理学教研室，四川 南充　637000)



2型糖尿病肾病患者血清白细胞介素-9、白细胞介素-17和转化生长因子-1的水平及临床意义

吴强鹏1，刘红2

(1.攀枝花学院附属医院内分泌科，四川 攀枝花617000；2.川北医学院生理学教研室，四川 南充637000)

目的：探讨2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)肾病患者白细胞介素-9(IL-9)、IL-17和转化生长因子-1(TGF-1)水平的变化及其临床意义。方法：根据尿微量白蛋白与肌酐比值，将62例T2DM患者分为糖尿病非肾病组(T2DM组)32例和糖尿病肾病组(DN组)30例，另选健康对照组 (NC组) 30名。常规方法检测血清生化指标和尿蛋白含量，酶联免疫吸附法测定IL-9、IL-17及TGF-1水平。分析3组血清IL-9、IL-17和TGF-1水平差异。结果：DN组IL-9、 IL-17和TGF-1水平显著高于T2DM组和NC组(P<0.01)。结论：T2DM肾病中患者血清IL-9、IL-17和TGF-1水平升高，可能在T2DM肾病的发生及发展过程中起重要作用。

糖尿病肾病；白细胞介素-9；白细胞介素-17；转移生长因子-1

糖尿病是一种常见的代谢性疾病，其发病率呈逐年上升的趋势，目前中国的患病人数已经超过9 200万[1]；而糖尿病肾病(diabetes nephropathy，DN)作为糖尿病微血管病变的主要并发症之一，其发生率约为35%～40%[2]。既往的观点认为，代谢紊乱和血液动力学改变是DN患者肾小管损害的主要原因；近年来，DN的发病机制被认为与细胞因子介导的炎症反应关系密切。白细胞介素(IL)是由辅助性T细胞9型和17型(Th9和Th17)等细胞分泌的细胞因子，同时Th17细胞还能分泌IL-17；另一方面， IL-9和IL-17的分泌受到转化生长因子 (TGF-)的调控[3]。研究[4]显示，IL-9在肥胖、胰岛素抵抗和肾脏疾病中可能发挥作用，但其在DN中的作用还不清楚。本研究采用酶联免疫吸附( ELISA)方法测定DN患者血清IL-9、IL-17和TGF-1水平，探讨IL-9和IL-17两种T细胞来源的细胞因子及TGF-1在DN发生、发展中的作用。

1　资料与方法

1.1一般资料搜集

2013年12月至2014年12月在攀枝花学院附属医院内分泌科住院2型糖尿病(T2DM)患者62例，分为T2DM非肾病组(T2DM组)和T2DM肾病组(DN组)。T2DM组32例，年龄42～65岁，尿白蛋白定量<30 mg/24 h，肾及其他器官无严重合并症者；DN组30例，年龄48～69岁。所有患者均符合 1999 年 WHO 提出的糖尿病诊断和分类标准[5]。DN诊断标准为：尿白蛋白排泄率持续在 20～199 μg/min，或尿白蛋白排出量>300 mg/h(相当于尿蛋白总量>0.5 g/24 h)，并且排除无其他病症所致肾损伤；同时选取正常对照组(NC组)30名，年龄 25～47 岁，肝、肾功能正常，无糖尿病家族史。

1.2仪器及试剂

日本TOSOH HLC-723G8全自动糖化血红蛋白(HbA1c)分析仪，全自动生化分析仪(拜耳ADVIA-1650型)；北京利德曼公司生产的HbA1c试剂盒，武汉博士德生物工程有限公司生产的IL-9、IL-17 和 TGF- 1，ELISA试剂盒等。

1.3血样标本采集与制备

3组患者均清晨采空腹血6 mL，4 ℃ 4 000 r/min 离心10 min后，血清置于 -70 ℃冰箱保存待测，测定前于室温下复温10 min，再次低温离心5 min，取上清液进行测定。

1.4生化指标的检测

采用HbA1c试剂盒检测HbA1c，全自动生化分析仪测定肌酐(SCr)，使用简化的肾脏病膳食改良试验公式计算肾小球滤过率(GFR)∶GFR=186×(SCr)-1.154×(年龄)-0.203×(0.742女性)。严格按照试剂说明书，采用ELISA检测血清中IL-9、IL-17 和 TGF-1水平。

1.5观察指标

观察3组年龄、体质量指数(BMI)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、空腹血糖(FPG)、HbA1c、SCr、GFR；血清IL-9、IL-17 和 TGF-1水平。

1.6统计学分析

采用方差分析与q检验及χ2检验。

2　结果

2.13组一般资料比较

DN组年龄、BMI、SBP、DBP、FPG、HbA1c和 SCr水平均较NC组和T2DM组升高(P<0.05,P<0.01) ；GFR均降低(P<0.01或P<0.05) ，见表1。

表1　研究对象一般资料的比较

*P<0.05，#P<0.01，与NC组比较；△P<0.05，▲P<0.01，与T2DM组比较。

2.23组血清IL-9、IL-17和TGF-1水平比较

DN组IL-9、 IL-17和TGF-1水平显著高于T2DM组和NC组(P<0.01)，见表2。

表2　3组血清IL-9、IL-17、TGF-1水平比较

*P<0.05，#P<0.01，与NC组比较；△P<0.01，与T2DM组比较。

3　讨论

DN的发病机制与多种因素相关，其中自身免疫反应和细胞因子介导的炎症反应近年来受到广泛研究。细胞因子具有高度的生物活性，部分细胞因子可以引起肾小球组织结构和功能的异常，在病理状态下，肾组织中浸润的白细胞和肾脏固有细胞均具有产生细胞因子的能力，这些因子可以进一步引起肾小球组织结构和功能的异常。

本研究结果显示，在DN患者血浆中IL-9、IL-17及TGF-β水平均均较NC组高(P<0.01)，提示患者体内免疫功能可能发生部分紊乱。 IL-9是一种新型的CD4+T细胞亚群分泌的细胞因子，具有双向性的免疫应答调节功能。IL-9在过敏反应和自体免疫中有害，然而在寄生虫感染时，IL-9有助于病原体的清除，并且在皮肤移植的过程中，IL-9能够环境耐受[5]。IL-9在代谢性疾病中的作用知之甚少。Beriou等[6]首次报道了在Ⅰ型糖尿病(T1DM)患者的身上IL-9、IL-17及记忆CD4+T细胞增加。在随后的研究[7]中，单卵T1DM 4胞胎基因表达分析再次证实IL-9信号的参与胰岛β细胞破坏的发病机制，但IL-9对T2DM具有怎样的作用仍然是未知的。本研究结果表明，DN组较T2DM组患者血浆IL-9水平显著升高(P<0.01)，与Dalmas等[4]报道正常糖耐量者IL-9无法检测到，以及Chen等[8]的肥胖患者(无论有无T2DM)的IL-9轻度升高、正常糖耐量组及T2DM组患者(包括糖尿病肾病患者)IL-9的水平没有差异的结果不一致，这可能与选择的研究对象、检测试剂与仪器不同有关。IL-9作为一种新型的细胞因子，其来源，效应细胞以及免疫生物学功能都比较复杂，因此其在人体内不同病理生理条件下的水平可能受到多种因素的影响。当前有关IL-9与DN的研究较少，本研究显示IL-9在DN患者中的含量升高，这提示IL-9可能参与了糖尿病肾病的发生，但具体的作用仍需进一步研究。

细胞膜表面广泛存在的IL-17受体(IL-17R)，IL-17与其受体结合后，能够诱导巨噬细胞蛋白、中性粒细胞趋化因子及TNF-α等炎症因子的表达，发挥其强烈的致炎作用[9]。崔壮[10]的研究证实IL-17在T2DM继发DN患者血清中水平升高，参与了DN的发生。本研究中，与正常对照组比较，IL-17水平在2型糖尿病肾病组及非肾病组的水平升高(P<0.01)，与上述报道一致。这进一步证实了IL-17也可能与糖尿病肾病的病理机制相关。

研究[11]证实，体内几乎所有细胞均可分泌TGF-β，TGF-β1是在目前已报道的6 种 TGF-β分子中被研究得最为广泛。报道[12]显示TGF-β1在肿瘤、脏器纤维化、创伤修复、炎症性疾病及自身免疫性疾病等的发生中具有重要意义，是重要的强效致纤维化因子。韩晓芳等[13]研究显示，TGF-β1在2型糖尿病肾病患者血清中升高，且与升高水平与糖尿病肾病进程一致。TGF-β1可以诱导肾小管上皮细胞的自我吞噬并促进肾小管上皮细胞的凋亡，进而引起肾小管损伤[14]。我们的数据显示，DN组TGF-β1的水平高于NC组和T2DM组(P<0.01)。分析原因可能是TGF-β1在糖尿病肾病的发病中参与了肾脏的纤维化改变。因此，测定糖尿病患者血中TGF-β1含量的变化对DN发病机制的研究，尤其是监测早期DN的发生和病情进展具有重要意义。

综上所述， IL-9、IL-17及TGF-β1在DN患者血清中水平显著升高，提示它们可能参与了2 型糖尿病肾病的病理。本研究主要从血清学的水平探讨IL-9、IL-17及TNF-β1三种细胞因子在不同患者间的差异，但要理解其在2型糖尿病肾病中的具体作用，仍需更多的研究进一步证实。

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(学术编辑：蒲素)

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The levels and clinical significance of interleukin 9，interleukin 17 and transforming growth factor beta1 in patients with type 2 diabetic nephropathy

WU Qiang-peng1,LIU Hong2

(1.DepartmentofEndocrinology，AffiliatedHospitalofPanzhihuaUniversity,Panzhihua617000;2.DepartmentofPhysiology，NorthSichuanMedicalCollege，Nanchong637000,Sichuan,China)

Objective：To investigate the levels and clinical significance of interleukin 9(IL-9)，IL-17 and transforming growth factor beta1(TGF-1) in patients with diabetic nephropathy (DN).Methods：According to the ratio of micro-albuminuria to creatinine,62 patients with type 2 diabetes mellitus (T2DM) were divided into the T2DM group (32cases) and DN group (30 cases),and the 30 healthy persons were set as the control group(NC group).The serum biochemistry markers and urine albumin levels in three groups were detected using routine biobemical methods.The levels of IL-9,IL-17 and TGF-1 in three groups were detected by the ELISA,the difference of which was analyzed.Results：The levels of IL-9,IL-17 and TGF-1 in DN group were significantly higher than those in T2DM and NC group(P<0.01).Conclusion：The levels of IL-9,IL-17 and TGF-1 in serum of type 2 diabetes patients with nephropathy increased,which may play an important role in the occurrence and development of diabetic nephropathy.

Diabetic nephropathy;Interleukin 9;Interleukin 17;Transforming growth factor beta1

10.3969/j.issn.1005-3697.2016.05.11

四川省教育厅科研项目(2010ZA169)

2015-03-10

吴强鹏(1975-)，男，副主任医师。

刘红，E-mail:1099389691@qq.com

时间：2016-10-2511∶31

http://www.cnki.net/kcms/detail/51.1254.R.20161014.1716.022.html

1005-3697(2016)05-00663-03

R692.39

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