嗜铬粒蛋白A与去势抵抗性前列腺癌的相关性研究

程树林，余文博，周文浩，龚志勇

（川北医学院附属医院泌尿外科，四川 南充 637000）

嗜铬粒蛋白A与去势抵抗性前列腺癌的相关性研究

程树林，余文博，周文浩，龚志勇

（川北医学院附属医院泌尿外科，四川 南充 637000）

目的探讨嗜铬粒蛋白A（CgA）与去势抵抗性前列腺癌（CR PC）的相关性。方法选取2011年1月-2012年8月于川北医学院附属医院经前列腺穿刺活检证实为前列腺癌的75例组织标本，以免疫组织化学方法检测CgA在穿刺标本中的表达情况，分析CgA表达率与前列腺癌各临床病理参数的关系，并比较CgA表达阳性组与阴性组发展至CR PC的差异。结果75例前列腺癌穿刺标本中，36例CgA表达阳性（48.0%）。CgA的表达与PSA水平、Gleason评分以及临床分期有关（P<0.05），CgA阳性组发展至CR PC的发生率明显高于CgA阴性组（P<0.01）。结论CgA与CR PC的发生密切相关。监测CgA的表达情况，对前列腺癌的内分泌治疗效果的预测可能有一定的临床指导意义。

前列腺癌；嗜铬粒蛋白A；去势抵抗；神经内分泌分化

在欧美地区，前列腺癌（prostate cancer，PCa)已成为威胁男性健康的第一大恶性肿瘤。近年来，我国前列腺癌的发病率呈逐年上升的趋势[1]。由于早期前列腺癌缺乏典型临床表现，部分患者就诊时已失去根治性治疗的机会，或者因年龄较大、合并心肺疾病等因素导致根治性治疗风险较大，需要选择去势治疗。但多数患者在2～3年后发展为去势抵抗性前列腺癌（castration resistant prostate cancer，CRPC）[2]。目前的研究认为，CRPC的发生可能与前列腺癌的神经内分泌分化（neuroendocrine differentiation，NED）和雄激素受体等因素有关[3]。

嗜铬粒蛋白A（CgA）是判断NED最敏感的标记物，本研究采用免疫组化方法，检测75例穿刺活检的前列腺癌组织中CgA的表达情况，以探讨前列腺癌CgA表达率与PCa各临床病理参数及CRPC发生的相关性。

1 资料与方法

1.1临床资料

选取2011年1月-2012年8月于川北医学院附属医院前列腺穿刺活检证实为前列腺癌的75例组织标本，所有患者均有完整详细的临床随访资料。患者年龄61～79岁，中位年龄72岁；活检前前列腺特异性抗原（prostate specific antigen，PSA）水平15～1200ng/ml，平均125ng/ml。所有患者均选择了最大限度雄激素阻断治疗（包括手术去势58例和药物去势治疗17例）。由于多数患者在治疗2～3年后发展至CRPC[2]，因此，本次研究以3年为随访期限，共有32例发展至CRPC。

1.2免疫组织化学法染色

兔抗人单克隆抗体嗜铬粒蛋（Chromogranin A，CgA）购自Santa Cruz公司，LSAB试剂盒购自博士德公司。主要实验步骤：石蜡包埋组织，5μm连续切片，HE染色复查。石蜡切片脱蜡、水洗、抗原修复、羊血清封闭、滴加一抗、PBS漂洗、滴加二抗（室温孵育）、DAB显色、苏木精染色、中性树胶封片。查阅文献[4]，用PBS代替一抗作阴性对照，正常胰腺组织胰岛细胞为神经内分泌细胞，恒定表达CgA，因此作阳性细胞对照组。免疫组织化学结果判定标准：CgA的阳性表达为棕黄色颗粒，主要位于细胞浆中。

1.3统计学方法

采用SPSS 17.0统计学软件进行数据分析，分析CgA表达率与PCa各临床病理参数的关系，并比较CgA表达阳性组与阴性组发展至CRPC的差异。用χ2检验进行统计学分析，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1免疫组织化学染色结果

在前列腺癌组织中，CgA阳性表达主要位于细胞浆中，镜下观察到棕黄色颗粒为阳性表达（见图1）。在本组75例前列腺癌中，有36例肿瘤标本呈CgA阳性表达（见图2），阳性率为48.0%。

图1　CgA在前列腺癌中的阳性表达（×400）

图2　正常胰腺组织胰岛细胞CgA阳性（×200）

2.2CgA与PCa患者临床病理参数的关系

从表1可见，CgA的表达与PSA水平、Gleason评分以及临床分期有关，PSA及Gleason评分更高组或临床分期较晚组的CgA阳性表达率更高，差异有统计学意义（P<0.05），但与年龄分段比较差异无统计学意义（P>0.05）。

表1　CgA与PCa患者临床病理参数的关系

2.3CgA与CRPC发生的相关性

在本组36例CgA表达阳性病例中共有24例发展为CRPC，39例CgA阴性表达病例中，8例发展为CRPC。CgA阳性组发展为CRPC的发生率明显高于CgA阴性组（P<0.01，见表2），而且两变量间Pearson列联系数为0.423，提示前列腺癌CgA阳性与CRPC的发生具有相关性。

表2　CgA与CRPC的相互关系

3 讨论

正常的前列腺组织中存在着几种类型的上皮细胞，包括神经内分泌细胞、基底细胞和腔分泌细胞。神经内分泌细胞因为具有内分泌和神经功能而得名，通过自分泌和旁分泌作用于正常前列腺腺泡和管腔，对前列腺上皮生长、分化发挥着重要作用[5]。研究者发现，几乎所有的前列腺癌均存在不同程度的NED细胞。前列腺癌的神经内分泌细胞致密核心胞质颗粒储存着肽类激素和前激素，如CgA、NSE及Syn等[6-8]。

CgA是一种分子量为68 kD的酸性糖蛋白，最初从牛肾上腺髓质嗜铬颗粒中提取，几乎所有的神经内分泌肿瘤中均可检测到CgA，它可以调节激素的分泌，从而影响肿瘤的发展。CgA是前列腺癌组织中神经内分泌细胞最敏感的标记物，高达84%[9]。本研究结果显示，CgA的表达与PSA水平、Gleason评分以及临床分期有关，与ATHER的观点一致，进一步证实前列腺癌的神经内分泌分化与PCa的进展及患者的不良预后有关[10]。

同时，前列腺癌NED细胞可能通过旁分泌、自分泌作用促进肿瘤细胞去势抵抗性增殖[11]。本研究发现，观察期内CgA阳性组发展为CRPC的发生率明显高于CgA阴性组，提示前列腺癌CgA的表达与CRPC的发生具有相关性。监测CgA的表达情况，可能对前列腺癌的内分泌治疗效果的预测有一定的临床指导意义。

本组例数较少，随访时间短，进一步的研究需加大病例数和延长随访时间。同时，发展为CRPC后再次行前列腺穿刺并检测CgA，与治疗初CgA是否阳性或染色强度是否增加进行比较，结果可能更有说服力。

[1]韩苏军,张思维,陈万青,等.中国前列腺癌发病现状和流行趋势分析[J].临床肿瘤学杂志,2013,18(4):330-334.

[2]SMITH M R,COOK R J,COLEMAN R,et al.Predictors of skeletal complications in men with hormone-refractory metastatic prostate cancer[J].Urology,2007,70(2):315-319.

[3]MATEI D V,RENNE G,PIMENTEL M,et al.Neuroendocrine differentiation in castration-resistant prostate cancer:a systematic diagnostic attempt[J].Clin Genitourin Cancer,2012,10(3):164-173.

[4]肖明朝,陈在贤,赵涌,等.嗜铬粒蛋白A在前列腺癌组织中的表达[J].重庆医科大学学报,2000,25(3):272-274.

[5]LIMA MV,NOGUEIRA C,OLIVEIRA J A,et al.Prostatic carcinomas with neuroendocrine differentiation diagnosed in needle biopsies,a morphologic study of 7 cases among 465 sequential biopsies in a tertiary cancer center[J].Int Braz J Urol,2011,37(5): 598-604.

[6]CONTEDUCA V,BURGIO S L,MENNA C,et al.Chromogranin Ais a potentialprognostic marker in prostate cancer patients treated with enzalutamide[J].Prostate,2014,74(16):1691-1696.

[7]SUN Y,NIU J,HUANG J.Neuroendocrine differentiation in prostate cancer[J].Vojnosanitetski Pregled,2009,1(2):148-162.

[8]SANTONI M,CONTI A,BURATTINI L,et al.Neuroendocrine differentiation in prostate cancer:novel morphological insights and future therapeutic perspectives[J].Biochimica Et Biophysica Acta, 2014,1846(2):630–637.

[9]BURGIO S L,CONTEDUCA V,MENNA C,et al.Chromogranin A predicts outcome in prostate cancer patients treated with abiraterone[J].Endocr Relat Cancer,2014,21(3):487-493.

[10]ATHER M H,ABBAS F,FARUQUI N,et al.Correlation of three immunohistochemically detected markers of neuroendocrine differentiation with clinical predictors of disease progression in prostate cancer[J].BMC Urol,2008,8(1):1-5.

[11]JEETLE S S,FISHER G,YANG Z H,et al.Neuroendocrine differentiation does not have independent prognostic value in conservatively treated prostate cancer[J].Virchows Arch,2012,461 (2):103-107.

（张西倩编辑）

Study on correlation between chromogranin A and castration resistant prostate cancer

Shu-lin Cheng，Wen-bo Yu，Wen-hao Zhou，Zhi-yong Gong
（Department of Urology，Affiliated Hospital of North Sichuan Medical College，Nanchong，Sichuan 637000，China）

Objective To investigate the relationship between chromogranin A（CgA）and castration resistant prostate cancer（CRPC）.MethodsA total of 75 cases of prostate cancer specimens were stained by immunohistochemistry，and the relationship between CgA expression and CRPC were analyzed.Results Among 75 cases，36 cases were CgA positive（48.0%）.CgA expression was significantly associated with Gleason score，serum prostate specific antigen and disease stage（P＜0.05）.The incidence of CRPC in CgA positive group was significantly higher than that in CgA negative group（P＜0.05）.Conclusions The results suggest that CgA is associated with CRPC.Monitoring the expression of CgA may be helpful for the treatment of prostate cancer patients who receive endocrine therapy.

prostate cancer；Chromoanin A；castration resistant prostate cancer；neuroendocrine differentiation

R 737.14

A

10.3969/j.issn.1005-8982.2016.20.006

1005-8982（2016）20-0027-03

2016-02-10

龚志勇，E-mail：gzy0404@sina.cn，Tel：13990717621