604例盗窃案微量生物检材的DNA检验分析

刘荣鑫 应 适

重庆市公安局沙坪坝区分局，重庆 400038



604例盗窃案微量生物检材的DNA检验分析

刘荣鑫 应 适

重庆市公安局沙坪坝区分局，重庆 400038

本文作者采用硅珠法对2014年以来实验室受理的604例盗窃案涉案微量生物检材(钱包212例、锁具188例、门柜把手98例、首饰盒56例、瓶罐50例)进行了检验分析，以检出性别及13个以上STR基因座，并且图谱峰值≥200RFU的检材计算，604例检材检出率为76.5%。其中钱包检出率为79.7%、锁具检出率为69.1%、门柜把手检出率为74.5%、首饰盒检出率为82.1%、瓶罐检出率为88.0%。经过研究说明，此硅珠法检验效果较理想，并且省时、便捷、高效，适用于法医微量生物检材的DNA检验。

微量物证；DNA；硅珠法

刑事案件中，盗窃案占有的比例最大，而破案率并不高。勘查现场时提取的物证多为微量生物检材，DNA检验难度大，笔者通过改进硅珠法，提升了接触性微量生物检材的检出率，笔者研究分析了2014年以来运用本法处理的盗窃案微量生物检材的检验情况并讨论。

一、实验材料

2014年以来实验室受理的盗窃案涉案微量生物检材钱包212例、锁具188例、门柜把手98例、首饰盒56例、瓶罐50例。共计604例。

二、实验方法

(一)微量物证DNA提取

采用DNA提取试剂盒(飞净生物科技有限公司，福州)。①用干湿法提取微量生物检材后，然后将棉签擦拭子放入离心套管中，加入200μL裂解液后在99℃下裂解5min；②在8000r/min下离心3min，丢弃套管；加入800μL吸附液，14μL硅珠，涡旋后静置15min；③在8000r/min下离心lmin，弃上清；加入700μL漂洗液，混匀后在8000r/min下离心1min，弃上清；④将沉淀物置于56℃金属浴上烘干；再加入25μL洗脱液，混匀后置于56℃金属浴上洗脱15min；⑤最后在15000r/min下离心3min，取上清液进行PCR。

(二)PCR反应及电泳分析

分别取上述检材DNA模板适量，使用AmpFLSTR®Yfiler®PCR扩增试剂盒和GeneAmp PCR System 9700进行PCR复合扩增STR基因座(扩增反应系数为20μL，内含mix8μL，prime set 4μL，DNA 8 μL)，最后对扩增产物应用ABI3500XL型荧光分析仪电泳检测和GeneMapper ID-X分析。

三、实验结果

我们视包含性别及13个以上STR基因座，并且图谱峰值在200RFU及以上的结果为检验成功，对检验604例的结果进行了统计(见表1)。表中结果显示，钱包检出率为79.7%；锁具检出率为69.1%；门柜把手检出率为74.5%；首饰盒检出率为82.1%；瓶罐检出率为88.0%，总检出率为87%。

表1 604例盗窃案检材检验情况统计表

四、讨论

接触性检材(touch DNA)是近年来法医物证学的研究热点和难点。接触性微量生物检材通常细胞含量较少，如何从相关载体上提取到足够多的脱落细胞，是检验成功的关键。本文对涉案检材均采用了干湿两步擦拭法进行提取。此类检材因接触人员复杂，这些皮肤接触部位的脱落细胞松散地遗留在物体表面，往往后接触会把前一次接触者的细胞蹭掉，留下后接触者的细胞，对微量DNA进行检验，大多获得的DNA图谱为最后的接触者，从而在涉案物品上检出嫌疑人的DNA成为可能。

通过对硅珠法进行改良，可获得较高纯度DNA，并且具有以下合理设计：①通过使用具有过滤杂质功能的离心套管，使实验操作更为简便、去除杂质和模板保留效果更为理想；②合理降低硅珠悬浊液的用量，使DNA更容易洗脱；③简化漂洗，避免和减少漂洗过程中的DNA损耗；④小体系洗脱，提高了模板DNA的浓度；⑤适当增加PCR循环数，在高纯度DNA情况下可以极大提高扩增成功率，可适当增加PCR循环数至40个。本文实验从整体上简化了实验操作步骤，并且减少了模板DNA的损耗量，有效提高了检材的检出率，从而印证了硅珠法改良后在微量物证提取及检验中的应用价值。

本文604例检材均为实物提取送检，从而更利于检验人员视情况采用更为合理有效的提取方法，最大程度的进行脱落细胞提取和转移。因微量生物检材会受到时间、湿度、温度、光照、微生物等不利环境因素影响，多会加速DNA的降解，故提取后应妥善保管和及时送检，才能保证和提高检材的检出率，从而发挥接触性微量生物检材的科学证据作用。

[1]王林生，苏勇，顾林岗.硅珠法提取PCR模板DNA[J].中国法医学杂志，2000(1).

[2]姚建，贾东涛，张玉红等.检材量对硅珠法提取脱落细胞DNA的影响[J].中国法医学杂志，2009(5).

D

A

刘荣鑫(1984-)，男，汉族，陕西西安人，西北农林科技大学，硕士研究生，重庆市公安局沙坪坝区分局，法医师，研究方向：法医物证；应适(1986-)，男，汉族，重庆人，中国刑事警察学院本科毕业，重庆市公安局沙坪坝区分局。