宁泌泰胶囊对大鼠的长期毒性研究

陆泉，蒋丽平，张飞，李定祥，窦圣姗，张杰

（1.上海海天医药科技开发有限公司，上海200023；2.上海理工大学，上海200093；3.上海交通大学，上海200240；4.上海中医药大学，上海201203；5.中国人民解放军第二军医大学，上海200433）

宁泌泰胶囊对大鼠的长期毒性研究

陆泉1，蒋丽平2，张飞3，李定祥4，窦圣姗5，张杰4

（1.上海海天医药科技开发有限公司，上海200023；2.上海理工大学，上海200093；3.上海交通大学，上海200240；4.上海中医药大学，上海201203；5.中国人民解放军第二军医大学，上海200433）

目的研究宁泌泰胶囊连续灌胃给药35 d对大鼠的毒性。方法将60只大鼠随机分为3组，药物组大鼠分别灌胃宁泌泰胶囊4.0 g/kg和1.5 g/kg，对照组大鼠灌胃相同体积的蒸馏水。给药（或蒸馏水）35 d后，每组处死动物数的1/2（n=10），并对其进行血液生化检测和病理解剖。停药14 d后，剩余的动物（n=10）进行恢复性实验检测。结果宁泌泰胶囊对大鼠的生长发育、造血功能和血液生化学指标均无明显的毒性，对大鼠的心、肝、脾、肺、肾、睾丸、子宫等组织的形态学检查亦未发现有明显损伤性毒性变化。结论宁泌泰胶囊长期服用毒性低，临床用药量安全。

宁泌泰胶囊；大鼠；长期毒性；恢复性实验；安全性评价

近年来，随着中药产品品种的增加、应用范围的日渐扩大以及中药现代化的客观现实，加强中药毒理学的研究，用准确可靠、科学客观的数据阐述中药的毒副作用，是中药研究、开发和应用的重要内容［1］。为评价宁泌泰胶囊长期应用的安全性，本研究中观察宁泌泰胶囊长期给药后大鼠的体重、主要器官变化、脏器系数、造血功能、各种血液生化指标等方面的改变，为临床安全使用宁泌泰胶囊提供实验室依据。现报道如下。

1　材料与方法

1.1试药

宁泌泰胶囊（贵阳新天药业股份有限公司，批号为9504212）。

1.2动物

SD大鼠60只，SPF级，雌雄各半，体重110～130 g，由贵阳医学院实验动物中心提供，动物合格证号京动管质（94）072号。

1.3方法［2］

参照《中药新药研究指南》《中药新药临床研究指导原则》，按动物体重及性别随机分3组，每组20只，高、低剂量组大鼠分别灌胃宁泌泰胶囊4.0 g/kg和 1.5 g/kg。对照组大鼠灌胃相同体积的蒸馏水，每天给药1次，连续35 d，每周称重1次，根据体重变化调整给药量，并观察饮食、活动、大小便、毛发光泽等。试验35 d后，将各组1/2动物（n=10）处死。

对处死的动物进行血常规分析、血液生化指标检测和病理解剖。血常规包括：红细胞、白细胞、血红蛋白、血小板、白细胞分类（包括淋巴细胞、中性粒细胞和单核细胞）。血液生化指标检测包括：天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）、总胆红素（TBIL）、总胆固醇（TCHO）、血糖（GLU）、尿素氮（BUN）、肌酐（Crea）、总蛋白（TP）及白蛋白（ALB）等。

对处死的动物取脏器和组织进行肉眼观察、称重，并进行病理组织学检查。送检样本包括：心、肝、脾、肾、肺、睾丸和子宫。

对每组剩余的动物（n=10）进行恢复性检查，即停药后每天给水、喂食，直到停药14 d处死。对处死的动物进行血常规分析、血液生化指标检测、病理解剖和病理组织学检查。

1.4统计学处理

2　结果

2.1对大鼠生长发育的影响

结果表明，大鼠连续灌胃给予宁泌泰胶囊35 d后，高、低剂量组和对照组大鼠的饮食、活动及大小便均正常，毛发有光泽。期间各组大鼠体重均持续增长，经统计学处理，未见显著性差异（P＞0.05）。见表1。

2.2对大鼠血常规的影响

大鼠连续灌胃给予宁泌泰胶囊35 d后，高、低剂量组和对照组大鼠的血常规指标无显著性差异（P＞0.05）。红细胞、白细胞、血红蛋白、血小板、白细胞分类（包括淋巴细胞、中性粒细胞和单核细胞），均在正常生理值范围内。结果见表2。

2.3对大鼠血液生化指标的影响

大鼠连续灌胃给予宁泌泰胶囊35 d后，高、低剂量组和对照组大鼠的血液生化指标均在正常生理值范围内，组间比较无显著性差异（P＞0.05）。见表3。

2.4对大鼠主要脏器系数的影响

结果表明，大鼠连续灌胃给予宁泌泰胶囊35 d后，对大鼠主要脏器系数无明显影响（P＞0.05）。见表4。

表1　连续给药35 d对大鼠体重的影响（±s，g，n=10）

表1　连续给药35 d对大鼠体重的影响（±s，g，n=10）

组别雄性对照组高剂量组低剂量组雌性对照组高剂量组低剂量组给药前体重1 2 2 . 6 0 ± 6 . 6 9 1 2 2 . 3 0 ± 6 . 8 4 1 2 2 . 3 0 ± 6 . 4 6 1 2 4 . 5 0 ± 4 . 7 7 1 2 3 . 7 0 ± 4 . 9 2 1 2 4 . 3 0 ± 4 . 8 3给药后体重7 d 1 5 4 . 0 0 ± 7 . 7 0 1 5 5 . 1 0 ± 9 . 6 9 1 5 3 . 4 0 ± 9 . 0 7 1 4 7 . 5 0 ± 7 . 8 6 1 4 6 . 3 0 ± 5 . 9 6 1 4 6 . 7 0 ± 8 . 7 9 1 4 d 1 8 4 . 7 0 ± 1 2 . 4 8 1 8 4 . 1 0 ± 1 1 . 9 0 1 8 7 . 0 0 ± 9 . 6 5 1 6 7 . 9 0 ± 7 . 1 1 1 7 0 . 7 0 ± 1 1 . 0 8 1 7 0 . 0 0 ± 9 . 6 6 2 1 d 2 0 2 . 1 0 ± 1 5 . 3 1 2 0 3 . 0 0 ± 1 3 . 4 0 2 0 6 . 4 0 ± 9 . 9 6 1 8 2 . 9 0 ± 1 1 . 0 8 1 8 8 . 2 0 ± 1 4 . 2 1 1 8 4 . 9 0 ± 1 3 . 1 6 2 8 d 2 3 2 . 5 0 ± 1 3 . 4 5 2 3 6 . 3 0 ± 1 3 . 2 1 2 3 5 . 5 0 ± 1 1 . 8 6 1 9 9 . 5 0 ± 6 . 9 5 2 0 2 . 7 8 ± 1 6 . 9 1 2 0 1 . 4 0 ± 2 0 . 3 8 3 5 d 2 5 4 . 9 0 ± 1 8 . 2 3 2 6 4 . 0 0 ± 1 0 . 3 7 2 5 6 . 1 0 ± 1 7 . 0 8 2 1 0 . 9 0 ± 1 0 . 9 2 2 1 4 . 8 0 ± 1 6 . 4 6 2 1 1 . 5 0 ± 1 8 . 1 4

表2　连续给药35 d对大鼠血常规的影响（±s，n=10）

表2　连续给药35 d对大鼠血常规的影响（±s，n=10）

白细胞分类（%）组别对照组高剂量组低剂量组红细胞（× 1 012/ L）5 . 2 7 ± 0 . 4 4 5 . 2 7 ± 0 . 4 4 5 . 2 1 ± 0 . 6 1白细胞（× 1 09/ L）1 2 . 4 7 ± 2 . 7 2 1 2 . 2 5 ± 2 . 8 1 1 2 . 2 1 ± 3 . 5 0血红蛋白（g / L）1 3 5 . 6 1 ± 2 . 8 2 1 3 6 . 1 7 ± 5 . 0 6 1 3 7 . 1 5 ± 3 . 6 1血小板（× 1 09/ L）6 5 8 . 6 0 ± 4 7 . 9 9 6 5 7 . 6 4 ± 5 1 . 2 8 6 6 7 . 5 0 ± 5 2 . 9 3淋巴细胞7 2 . 5 0 ± 5 . 4 6 7 0 . 7 0 ± 2 . 5 8 7 1 . 8 0 ± 4 . 1 8中性粒细胞2 4 . 0 ± 5 . 0 5 2 5 . 7 0 ± 2 . 6 3 2 4 . 6 0 ± 4 . 0 3单核细胞3 . 2 0 ± 1 . 1 5 3 . 6 0 ± 0 . 9 7 3 . 6 0 ± 0 . 8 4

表3　连续给药35 d对大鼠血液生化指标的影响（±s，n=10）

表3　连续给药35 d对大鼠血液生化指标的影响（±s，n=10）

组别对照组高剂量组低剂量组A S T（卡门氏单位）3 9 . 3 9 ± 6 . 5 2 3 3 . 1 4 ± 8 . 4 4 3 3 . 3 0 ± 7 . 4 0 A L T（卡门氏单位）2 9 . 3 8 ± 5 . 4 5 2 8 . 9 4 ± 5 . 8 6 2 9 . 8 9 ± 4 . 2 7 A L P（金氏单位）3 5 . 7 2 ± 6 . 8 4 3 5 . 4 0 ± 8 . 3 5 3 5 . 3 0 ± 6 . 6 8 T B I L（ m o l / L）8 . 2 7 ± 1 . 1 2 8 . 8 3 ± 1 . 8 5 8 . 9 8 ± 1 . 3 6 T C H O（m m o l / L）0 . 8 4 ± 0 . 1 7 0 . 8 2 ± 0 . 1 2 0 . 8 5 ± 0 . 1 5 G L U（m m o l / L）4 . 4 4 ± 0 . 6 9 4 . 5 2 ± 0 . 6 3 4 . 4 2 ± 0 . 7 1 B U N（m m o l / L）5 . 8 7 ± 1 . 0 1 6 . 4 7 ± 0 . 7 2 5 . 9 6 ± 1 . 2 6 C r e a（ m o l / L）5 1 . 1 5 ± 1 0 . 8 0 5 0 . 8 8 ± 7 . 3 6 5 1 . 9 0 ± 9 . 0 8 T P（g / L）7 3 . 0 6 ± 4 . 7 6 7 5 . 2 0 ± 3 . 9 4 7 4 . 4 0 ± 4 . 1 2 A L B（g / L）2 4 . 2 1 ± 3 . 0 3 2 4 . 2 6 ± 2 . 9 2 2 4 . 2 9 ± 3 . 8 2

表4　连续给药35 d对大鼠各脏器系数的影响（±s，g/100 g）

表4　连续给药35 d对大鼠各脏器系数的影响（±s，g/100 g）

组别脏器（除生殖系统外，n = 1 0）生殖系统（n = 5）心肝脾肺肾对照组高剂量组低剂量组0 . 3 4 ± 0 . 0 3 0 . 3 5 ± 0 . 0 3 0 . 3 5 ± 0 . 0 3 3 . 5 9 ± 0 . 3 4 3 . 6 4 ± 0 . 2 6 3 . 6 3 ± 0 . 4 1 0 . 3 2 ± 0 . 0 6 0 . 3 2 ± 0 . 0 4 0 . 3 3 ± 0 . 0 5 0 . 8 2 ± 0 . 1 0 0 . 7 9 ± 0 . 1 4 0 . 8 1 ± 0 . 1 2 0 . 7 0 ± 0 . 0 7 0 . 7 2 ± 0 . 1 6 0 . 7 1 ± 0 . 0 9睾丸0 . 9 9 ± 0 . 0 9 0 . 9 9 ± 0 . 0 4 1 . 0 0 ± 0 . 0 7子宫0 . 1 4 ± 0 . 0 3 0 . 1 4 ± 0 . 0 4 0 . 1 5 ± 0 . 0 3

2.5对大鼠主要脏器组织形态学的影响

结果表明，大鼠连续灌胃给予宁泌泰胶囊35 d后，大体检查高、低剂量药物组和对照组大鼠器官，无异常发现。病理组织学检查，高、低剂量药物组与对照组比较，未见与药物有关的病理改变，说明宁泌泰胶囊毒性较低。

2.6恢复性实验结果

停药14 d后，高、低剂量药物组和对照组大鼠血常规、血液生化指标以及主要脏器系数均未见异常，结果见表5至表7。另外，药物组和对照组大鼠的主要脏器结构清楚，主要脏器的组织形态学检查，未见与药物有关的病理改变。

3　讨论

宁泌泰胶囊来源于贵州苗族民间验方［2］，是治疗泌尿、生殖系感染的经典专利苗药，以四季红、白茅根、大风藤、三颗针、仙鹤草、芙蓉叶和连翘等7味中药组方，具有清热解毒、利湿通淋等功效，用于湿热蕴结所致淋证，症见小便不利、淋漓涩痛、尿血，以及下尿路感染、慢性前列腺炎见上述证候者。宁泌泰胶囊治疗泌尿、生殖系感染等疾病的疗效良好，同时，文献［4-13］均表明宁泌泰胶囊的临床不良反应发生率低，无明显毒副作用。

表5　连续给药35 d停药14 d后对大鼠血常规的影响（±s，n=10）

表5　连续给药35 d停药14 d后对大鼠血常规的影响（±s，n=10）

白细胞分类（%）组别对照组高剂量组低剂量组红细胞（× 1 012/ L）5 . 2 7 ± 0 . 5 2 5 . 1 2 ± 0 . 6 2 5 . 2 1 ± 0 . 4 7白细胞（× 1 09/ L）1 2 . 5 2 ± 1 . 9 9 1 2 . 3 2 ± 2 . 5 0 1 2 . 9 3 ± 2 . 1 2血红蛋白（g / L）1 3 6 . 8 1 ± 4 . 2 1 1 3 6 . 6 0 ± 5 . 7 9 1 3 5 . 9 3 ± 4 . 8 5血小板（× 1 09/ L）6 5 7 . 7 0 ± 4 7 . 9 9 6 6 2 . 9 0 ± 6 2 . 5 9 6 5 5 . 7 0 ± 6 8 . 0 1淋巴细胞7 1 . 5 0 ± 4 . 0 6 7 1 . 7 0 ± 3 . 6 5 7 2 . 1 0 ± 4 . 7 9中性粒细胞2 4 . 8 0 ± 4 . 0 8 2 4 . 6 0 ± 3 . 8 3 2 4 . 3 0 ± 4 . 7 1单核细胞3 . 6 0 ± 0 . 8 4 3 . 7 0 ± 1 . 0 5 3 . 5 0 ± 0 . 9 7

表6　停药14 d后对大鼠血液生化指标的影响（±s，n=10）

表6　停药14 d后对大鼠血液生化指标的影响（±s，n=10）

组别对照组高剂量组低剂量组A S T（卡门氏单位）3 3 . 8 0 ± 5 . 5 9 3 3 . 4 6 ± 5 . 3 8 3 3 . 9 0 ± 5 . 5 7 A L T（卡门氏单位）2 8 . 8 9 ± 5 . 1 7 2 8 . 5 4 ± 5 . 4 4 2 8 . 7 0 ± 5 . 1 9 A L P（金氏单位）3 5 . 5 7 ± 5 . 7 1 3 5 . 8 0 ± 5 . 1 3 3 5 . 6 8 ± 5 . 4 5 T B I L（ m o l / L）8 . 8 5 ± 1 . 2 3 8 . 6 5 ± 1 . 7 2 9 . 0 7 ± 1 . 2 6 T C H O（m m o l / L）0 . 8 6 ± 0 . 1 2 0 . 8 5 ± 0 . 1 3 0 . 8 5 ± 0 . 1 1 G L U（m m o l / L）4 . 4 7 ± 0 . 5 8 4 . 3 9 ± 0 . 7 2 4 . 3 5 ± 0 . 6 2 B U N（m m o l / L）6 . 2 0 ± 0 . 7 1 6 . 4 0 ± 0 . 7 4 6 . 2 1 ± 0 . 8 9 C r e a（ m o l / L）4 8 . 9 6 ± 7 . 1 9 5 0 . 1 6 ± 7 . 6 9 4 9 . 5 5 ± 7 . 1 7 T P（g / L）7 4 . 3 0 ± 3 . 3 7 7 4 . 3 0 ± 4 . 4 2 7 3 . 7 0 ± 3 . 5 9 A L B（g / L）2 4 . 7 6 ± 3 . 5 1 2 4 . 4 2 ± 3 . 3 8 2 5 . 0 9 ± 3 . 5 4

表7　停药14 d后对大鼠各脏器系数的影响（±s，g/100 g）

表7　停药14 d后对大鼠各脏器系数的影响（±s，g/100 g）

组别脏器（除生殖系统外，n = 1 0）生殖系统（n = 5）心肝脾肺肾对照组高剂量组低剂量组0 . 3 5 ± 0 . 0 3 0 . 3 5 ± 0 . 0 3 0 . 3 5 ± 0 . 0 3 3 . 5 3 ± 0 . 3 4 3 . 6 4 ± 0 . 2 6 3 . 5 7 ± 0 . 2 7 0 . 3 3 ± 0 . 0 3 0 . 3 2 ± 0 . 0 4 0 . 3 3 ± 0 . 0 3 0 . 7 4 ± 0 . 0 3 0 . 7 6 ± 0 . 0 5 0 . 7 5 ± 0 . 0 5 0 . 7 0 ± 0 . 0 4 0 . 7 1 ± 0 . 0 5 0 . 7 0 ± 0 . 0 6睾丸0 . 9 8 ± 0 . 0 3 1 . 0 0 ± 0 . 0 5 1 . 0 0 ± 0 . 0 4子宫0 . 1 5 ± 0 . 0 2 0 . 1 4 ± 0 . 0 1 0 . 1 5 ± 0 . 0 2

本研究结果表明，宁泌泰胶囊高、低剂量组和对照组的血常规、血液生化学等指标均在正常生理值范围内，对主要脏器的形态学观察未见与药物有关的病理改变。本研究中经过动物长期毒性试验表明，以宁泌泰胶囊4.0 g/kg，1.5 g/kg（分别相当于临床日剂量的42倍和15.6倍）对大鼠连续灌胃给药35 d，对大鼠的生长发育、造血功能、血液生化学均无明显的毒性影响，对大鼠的主要脏器均无明显的毒性影响，宁泌泰胶囊长期服用毒性较低，临床用量安全。

［1］吴凤花，黄明华.中药毒理学研究进展［J］.中国现代药物应用，2009，3（14）：201-202.

［2］章元沛.药理学实验［M］.北京：人民卫生出版社，1996，78-79.

［3］包骏，冉懋雄.贵州苗族医药研究与开发［M］.贵阳：贵州科学技术出版社，1999：396.

［4］范萍，邓顺有，何洁莹，等.宁泌泰胶囊治疗下焦湿热型泌尿生殖系统感染316例［J］.上海中医药杂志，2015，49（3）：57-58.

［5］林英立，李艳丽，戚景光，等.宁泌泰胶囊联合盐酸坦洛新缓释胶囊治疗ⅢB型前列腺炎疗效观察［J］.临床合理用药杂志，2015，8（11）：56-57.

［6］蔡健，陈熙猛，汪广兵.宁泌泰胶囊治疗精囊炎所致血精症的疗效观察［J］.中草药，2014，45（23）：3 440-3 442.

［7］刘蕾，田明清，黄文杰.宁泌泰胶囊治疗糖尿病尿路感染的临床疗效观察［J］.中国中西医结合急救杂志，2014，21（5）：368-371.

［8］种庆贵，宋爱君，郭艳，等.宁泌泰胶囊治疗慢性前列腺炎临床观察［J］.中国中西医结合外科杂志，2014，20（2）：178-180.

［9］唐开发，石家齐，乔筠，等.雌三醇软膏联合宁泌泰胶囊治疗女性复发性尿路感染临床疗效观察［J］.现代泌尿外科杂志，2014，19（3）：167-169.

［10］车煜华.宁泌泰胶囊联合左氧氟沙星治疗慢性前列腺炎临床观察［J］.新中医，2013，45（8）：43-44.

［11］黄宝星，宿恒川，孙福康.复方环丙沙星栓联合云南白药、宁泌泰治疗组织学前列腺炎伴PSA升高患者的疗效评价［J］.中华男科学杂志，2012，18（11）：986-990.

［12］刘左成，李广宇，黄伟，等.宁泌泰联合盐酸坦索罗辛缓释胶囊治疗慢性非细菌性前列腺炎疗效观察［J］.临床合理用药杂志，2010，3（16）：26-27.

［13］范伟，周光军，於裕福.宁泌泰胶囊治疗慢性前列腺炎500例临床观察［J］.浙江中医杂志，2008，43（12）：736.

Study on Long-Term Toxicity of Extracts from Ningmitai Capsules on Rats

Lu Quan1，Jiang Liping2，Zhang Fei3，Li Dingxiang4，Dou Shengshan5，Zhang Jie4
（1.Shanghai Haitian Pharmaceutical Development Co.，Ltd.，Shanghai，China200023；2.University of Shanghai for Science and Technology，Shanghai，China200093；3.Shanghai Jiao Tong University，Shanghai，China200240；4.Shanghai University of Traditional Chinese Medicine，Shanghai，China201203；5.PLA Second Military Medical University，Shanghai，China200433）

ObjectiveTo observe the property and degree of long-term toxicity of Ningmitai and evaluate whether the toxic injure can beprevented or recovered，so as to provide the reference for clinical safe use.M ethods60 rats were randomlydivided into three groups，Ningmitai（4.0，1.5 g/kg）groups and control（ig same volume of distilled water）group for all being treated for 35 d，respectively.Then the rats were sacrificed 1/2（n=10）in each group and the anatomy and pathological biochemical detection were carried on.The remaining（n=10）were sacrificed after 14 d of withdrawal drug to use for the reversible experiment.ResultsThere was no significance of the extract from Ningmitai Capsules on the growth/hematopoietic function/biochemical criterion of serum or the pathological feature，i.e.toxicity changes with obvious injury in heart，liver，spleen，lung，kidney，testes，and uterus.ConclusionThere is very low toxicity of the extract from Ningmitai Capsule for the long-term safe use which is safe to be used in clinic.

Ningmitai Capsules；rats；long-term toxicity；withdrawal drug；safety evaluation

R285.5；R286

A

1006-4931（2016）15-0046-03

陆泉（1983-），男，安徽无为人，硕士研究生，工程师，研究方向为中药临床研究，（电子信箱）luquan5918@126.com；张杰，男，博士研究生，研究方向为中药临床研究，本文通讯作者，（电话）021-64222293（电子信箱）guide.zhang@163.com。

（2016-04-22）