高效液相色谱法测定藿香正气水中苍术素含量

杨立志，姜雪敏

（黑龙江省鸡西市食品药品检验检测中心，黑龙江鸡西158100）

高效液相色谱法测定藿香正气水中苍术素含量

杨立志，姜雪敏

（黑龙江省鸡西市食品药品检验检测中心，黑龙江鸡西158100）

目的建立测定藿香正气水中苍术素含量的高效液相色谱（HPLC）法。方法色谱柱为Agilent Extend-C18柱（250 mm×4.6 mm，5 m），流动相为甲醇-水（78∶22），流速为1.0 mL/min，检测波长为340 nm，柱温为30℃。结果苍术素进样量在0.021 67～0.433 097 g范围内与峰面积线性关系良好，r=1.000 0（n=6），平均回收率为97.44%，RSD=0.83%（n=6）。结论该方法操作简便，结果准确，可用于藿香正气水的质量控制。

苍术素；藿香正气水；高效液相色谱法

藿香正气水由苍术、陈皮、厚朴、白芷、茯苓、大腹皮、生半夏、甘草浸膏、广藿香油、紫苏叶油组方，具有解表化湿、理气和中的功效，用于外感风寒、内伤湿滞所致的感冒。在其质量标准［1］中无苍术素的含量控制项，为更好地控制藿香正气水的质量，笔者参考文献［2-15］采用高效液相色谱（HPLC）法测定了制剂中苍术素的含量。现报道如下。

1　仪器与试药

岛津LC-2010A型高效液相色谱仪（株式会社岛津制作所）；AG285型电子分析天平（瑞士梅特勒托利多公司），KQ-400KDE型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。苍术素对照品（中国食品药品检定研究院，批号为111924-201404）；藿香正气水（市售品，批号分别为150302，150603，150902）；水为屈臣氏蒸馏水，甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯。

2　方法与结果

2.1色谱条件及系统适用性试验

色谱柱：Agilent Extend-C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：甲醇-水（78∶22）；流速：1.0 mL/min；柱温：30℃；进样量：10 μL；检测波长：340 nm。理论板数按橙皮苷峰计算应不低于2 000。

2.2溶液制备

对照品溶液：精密称取苍术素对照品（含量为99.7%）10.86 mg，加甲醇制成每1 mL含21.654 84 μg的溶液，即得。

供试品溶液：精密量取本品5 mL，置50 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，称定质量，超声（功率400 W，频率40 kHz）30 min，放冷，再称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，用微孔滤膜（0.45 μm）滤过，取续滤液，即得。

阴性对照品溶液：按处方量以相同工艺制备不含苍术的阴性对照样品，按供试品溶液制备方法制备，即得。

2.3方法学考察

阴性干扰试验：取2.2项下3种溶液适量，按拟订色谱条件进样测定。结果，阴性对照品溶液色谱中，在与苍术素色谱峰相应位置处无干扰峰出现，表明阴性对照品溶液的其他组分对苍术素的测定无干扰，见图1。

线性关系考察：精密吸取橙皮苷对照品溶液1，2，5，10，15，20 μL，注入高相液相色谱仪，记录峰面积，以苍术素进样量（X）为横坐标、峰面积（Y）为纵坐标进行线性回归，得回归方程Y=1.076 463 1×107X+ 1.872 109×102，r=1.000 0（n=6）。结果表明，苍术素进样量在0.021 67～0.433 097 μg范围内与峰面积线性关系良好。

精密度试验：精密吸取同一对照品溶液10 μL，连续进样6次，计算峰面积。结果的RSD=0.28%（n=6），表明仪器精密度良好。

重复性试验：取同一批（批号为150302）样品，依法制备供试品溶液6份，并进样测定含量。结果的RSD= 1.06%（n=6），表明方法重复性较好。

稳定性试验：取同一供试品溶液，分别于0，2，4，6，8，10，12 h时依法进样测定。结果的RSD=0.36%（n=7），表明供试品溶液在12 h内稳定。

图1　高效液相色谱图

加样回收试验：精密量取同一已知含量的样品（批号为150302，含量为0.172 mg/mL）2.5 mL，共6份，分成3组，每组分别精密加入0.4 mg/mL的苍术素0.8，1.0，1.2 mL。依法制备供试品溶液，按拟订色谱条件进样测定，计算回收率。结果见表1。

表1　苍术素加样回收试验结果（n=6）

2.4样品含量测定

取3批样品，依法制备供试品溶液，并进样测定含量。结果批号为150302，150603，150902的3批样品中苍术素的含量分别为0.172，0.165，0.188 mg/mL。

3　讨论

藿香正气水中，苍术在处方中起到极其重要的作用，故选择测定处方中的苍术素含量作为质量控制。选择测定波长时，对苍术素对照品溶液在300～400 nm波长范围内进行光谱扫描，结果苍术素在340 nm波长处有最大吸收，灵敏度最高，故选择340 nm作为测定波长。

苍术素结构含有较大的不饱和体系，在高温下易分解，在光照条件下也不稳定，很快发生变化，颜色加深呈棕黄色，因此在制备供试品溶液时应控制温度，置棕色瓶中保存，否则会影响测定结果的准确性，且供试品溶液和对照品贮备液均应避光保存。

本试验中考察了甲醇-水、甲醇-0.1%醋酸水溶液、乙腈-0.8%醋酸水溶液等不同的流动相系统。结果发现，采用甲醇-水溶液系统，基线平稳，出峰时间缩短，故选择甲醇-水溶液作为本试验的流动相体系。

制备供试品溶液时，曾分别以甲醇超声和回流处理样品，结果回流提取与超声提取相比，苍术素略有损失，且超声提取操作简便，耗时短，不需加热，故选用以甲醇超声提取。同时，考察发现，超声30 min有效成分即可提取完全，故确定提取时间为30 min。

［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）［M］.北京：中国医药科技出版社，2010：150.

［2］刘树芬，杨晓红，李晓红，等.气相色谱法测定苍术挥发油-环糊精包合物中 -桉叶醇和苍术素的含量［J］.中国中药杂志，1992，17（9）：543-544.

［3］南洋，贾凌云，李倩.RP-HPLC法同时测定苍术中苍术素和白术内酯Ⅱ的含量［J］.药物分析杂志，2010，30（1）：17-20.

［4］张磊，欧阳臻，赵明，等.茅苍术中苍术酮、茅术醇、 -桉叶醇和苍术素的同时含量测定及其聚类分析［J］.中国中药杂志，2010，35（6）：725-728.

［5］陶金华，濮雪莲，江曙.内生真菌诱导子对茅苍术细胞生长及苍术素积累的影响［J］.中国中药杂志，2011，36（1）：27-31.

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［7］张军，叶炳皇，陈威，等.HPLC测定复方挥发油 -环糊精包合物中桂皮醛、丁香酚、苍术素的含量［J］.中国实验方剂学杂志，2013，19（3）：86-89.

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［9］姚慧敏，姚慧娟，李三鸣，等.反相高效液相色谱法同时测定夜明颗粒中肉桂酸、桂皮醛、丹皮酚、23-乙酰泽泻醇B、苍术素醇和苍术素的含量［J］.中国药学杂志，2012，47（15）：1242-1245.

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［12］周军，赵晨，王杰.藿香正气不同制剂中苍术素的含量测定［J］.药物分析杂志，2012，32（8）：1 476-1 478.

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［14］陈云，陈锦玲.平胃分散片的制备及其苍术素的含量测定［J］.中国药师，2015，18（4）：671-673.

［15］张晓兰，王晓玉，张丽媛，等.反相高效液相色谱法同时测定四妙丸中盐酸小檗碱与苍术素的含量［J］.中南药学，2010，8（4）：259-262.

Content Determination of Atractylodin in Huoxiang Zhengqi Liquid by HPLC

Yang Lizhi，Jiang Xuemin
（Jixi Center for Food and Drug Inspection and Testing，Jixi，Heilongjiang，China158100）

ObjectiveToestablish an high performanceliquid chromatographic（HPLC）techniquefor thecontentdetermination of atractylodin in Huoxiang Zhengqi Liquid.MethodsThe optimized method was achieved for the separation and detection of the selected constituent on Agilent Extend-C18column（250 mm×4.6 mm，5 m）using methanol-wather（78∶22）as mobile phase at a flow rate of 1.0 mL/min，and 340 nm as the detection wavelength.The column temperature was 30℃.ResultsAtractylodin showed the good linea relationship when the amounts were between 0.021 67-0.433 097 μg，r=1.000 0（n=6）.The average recovery rate was 97.44%，RSD=0.83%（n=6）.ConclusionThe method is simple，accurate and can be applied for the quality control of Huoxiang Zhengqi Liquid.

atractylodin；Huoxiang Zhengqi Liquid；HPLC

R284．1；R286．0

A

1006－4931（2016）16－0070－03

杨立志（1977-），男，大学本科，副主任药师，主要从事食品药品检验检测工作，（电子信箱）Lizhi669@sohu.com。

（2016－04－06；

2016－05－18）