飞天蜈蚣七不同提取物的药效学研究

杨秦雁　李　博

陕西省中医医院药剂科 (西安 710002)



飞天蜈蚣七不同提取物的药效学研究

杨秦雁李博

陕西省中医医院药剂科 (西安 710002)

目的：研究比较飞天蜈蚣七不同极性部位提取物的抗炎、镇痛、抗疲劳和耐缺氧的活性。方法：分别采用二甲苯所致耳廓肿胀实验、角叉菜胶所致小鼠足肿胀实验、小鼠扭体法、热板法、负重游泳实验和常压耐缺氧实验对其抗炎、镇痛、抗疲劳、和耐缺氧活性进行研究。结果：飞天蜈蚣七提取物乙醇部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位均表现出不同程度的抗炎、镇痛、抗疲劳作用，尤其以正丁醇部位活性最为显著，而其各部位的耐缺氧活性均不高。结论：飞天蜈蚣七不同极性部位提取物均具有抗炎、镇痛、抗疲劳作用，其中正丁醇部位活性最强。

主题词中药制剂实验，动物@飞天蜈蚣

ABSTRACT

Objective: To study the anti-inflammation, analgesia, anti-fatigue and anti-hypoxia activity of the different extracts from Aralia chinensis L.Methods: The pharmacological actions of anti-inflammation and analgesic were observed by xylene-induced ear swelling in mice, carrageenan-induced paw swelling in mice, acetic acid- induced writhing test and the hot-plate test in mice. Meanwhile, the anti-fatigue and anti-hypoxia effects were investigated by the load bearing swimming test and the hypoxia tolerance test respectively. Results: The ethanol extraction, ethyl acetate extraction and n-butanol extraction of Aralia chinensis L. all had anti-inflammation, analgesia and anti-fatigue effects. The n-butanol extraction had the most significant effect.The anti-hypoxia activity of all the different extracts was weak. Conclusion: The different extracts from Aralia chinensis L. all showed the anti-inflammation, analgesia and anti-fatigue effects. And the n-butanol extract had stronger activity.

飞天蜈蚣七为五加科植物楤木的根皮，分布于陕西、河北、山东、浙江、江西等地, 在陕西主要分布于秦岭、巴山各个山区,主治风湿性关节炎、急慢性肝炎、跌打损伤、痈肿等[1-2]。目前已有文献报道飞天蜈蚣七具有抗肝纤维化作用，但其它药理活性有待进一步研究[3-4]。本研究旨在进一步对飞天蜈蚣七不同极性部位提取物进行药理研究，探讨各部位的药理活性差异，筛选飞天蜈蚣七的主要活性部位，为飞天蜈蚣七药材的进一步开发利用提供参考。

1材料1.1动物昆明种小鼠，体重20±2g，雌雄兼用，购于第四军医大学实验动物中心，合格证号为陕动准字第01号。

1.2仪器旋转蒸发仪(上海申胜生物技术有限公司)；AY220 电子分析天平(日本岛津分析仪器公司)；HH-4数显恒温热板水浴锅(国华电器有限公司)；8mm打孔器。

1.3实验试药飞天蜈蚣七药材采自秦巴山区、角叉菜胶、阿司匹林肠溶片、十全大补丸、二甲苯、冰醋酸。

2方法2.1样品制备取飞天蜈蚣七药材，粉碎，过3号筛，用75 %乙醇冷浸提取，回收溶剂，得乙醇粗提取物，即乙醇部位；然后依次用石油醚、乙酯乙酯、正丁醇进行索氏提取，将各部分提取液减压浓缩，回收溶剂，得到飞天蜈蚣七各极性部位提取物，分别为石油醚部位、乙酯乙酯部位、正丁醇部位。临用前将各提取部位密封置冰箱中冷藏，灌胃前用1%吐温-80溶液混悬均匀。

2.2抗炎活性考察2.2.1对二甲苯所致小鼠耳郭肿胀的影响[5]：选取昆明种小鼠 140 只，雌雄各半，随机分成 14组，每组10 只。空白对照组给予1%吐温-80溶液，阳性对照组给予阿司匹林(0.2g/kg)，给药组分别为乙醇部位组、石油醚部位组、乙酸乙酯部位组、正丁醇部位组，给药剂量分别设高、中、低剂量组(4、2、1g/kg生药)。口服灌胃给药，1次/d，连续给药7d，末次给药后，于小鼠右耳涂抹0.5ml/只二甲苯致炎，左耳不涂，1h后颈椎脱臼法处死小鼠，剪下左右两耳，用直径8mm打孔器在相同位置打下耳片，称量，计算不同给药组的肿胀度及肿胀抑制率。

2.2.2对角叉菜胶所致小鼠足趾肿胀的影响：取昆明种小鼠，分组及给药同“2.2.1”，连续灌胃给药7d，末次给药后1h，于各小鼠右后足皮下注射1%角叉菜胶0.05 ml/只，5h后于同一位置剪下左右两足，称量，肿胀度即为右足质量减去左足质量，并计算肿胀抑制率。

2.3镇痛活性考察2.3.1小鼠热板镇痛试验[6]：取雌性小鼠，水浴温度调节为(55±0. 5)℃，记录小鼠足底接触热板至出现舔后足反应的时间即为小鼠痛阈值，选取痛阈值在5～30s小鼠140只。分组、给药方法和剂量同“2.2.1”，连续灌胃给药7d，分别于给药前及末次给药1h后分别测定小鼠痛阈值，痛阈值超过60s者按60s计算，并计算痛阈提高率。

2.3.2醋酸所致小鼠扭体反应的影响：选取小鼠140只，分组及给药同“2.2.1”，末次给药1h后，于各小鼠腹腔注射0.6% 醋酸溶液0.2ml/10g，观察并记录注射醋酸溶液后20min内小鼠出现扭体(伸展后肢、臀部抬高、腹部内凹、蠕行)的次数，并计算给药组的扭体抑制率。

2.4抗疲劳能力考察负重游泳实验选取昆明种小鼠，分组、给药方法和剂量同“2.2.1”，阳性对照组给予十全大补丸(2g/kg)，末次给药1h后，开始负重游泳实验。将小鼠体重的10%铅块绑至背部，负重游泳，放入水温30℃左右的水浴锅中游泳，当小鼠沉入水中6s不能浮出水面时，即为体力耗竭时间。比较给给药组的体力耗竭时间，通过计算游泳力竭时间延长率来评估其抗疲劳能力。

2.5耐缺氧能力考察常压耐缺氧实验选取昆明种小鼠，分组、给药方法和剂量同“2.2.1”，阳性对照组给予十全大补丸(2g/kg)。末次给药1 h后，将小鼠放入密闭瓶内，瓶内装有10g钠石灰，加盖瓶塞。记录放入小鼠至小鼠因缺氧而死亡的时间，并计算耐缺氧存活时间延长率。

3结果3.1抗炎活性飞天蜈蚣七各极性部位提取物均表现出不同强度的抗炎作用。其中以正丁醇部位作用最为明显，其高剂量组抑制率达到了68.4%，接近于阿司匹林组水平77.3%，低剂量组抑制率也达到35.6%；乙醇部位和乙酸乙酯部位的抗炎作用也较为明显；石油醚部位抗炎效果不明显。与空白对照组比较，正丁醇部位各剂量组对二甲苯所致的耳廓肿胀均有显著的抑制作用(P<0.01)，且存在一定的量效关系。飞天蜈蚣七各极性部位对角叉菜胶致小鼠足肿胀均有一定的抑制作用，正丁醇部位抑制作用最显著，而石油醚部位几乎没有抗炎作用。其中当给药剂量为4g/kg时，正丁醇部位的作用最强，达到57.3%，乙醇部位次之，为50.1%，乙酸乙酯部位也有一定抗炎作用(37%)，与空白对照组相比，显著抑制小鼠足趾肿胀程度(P<0.05)，且呈现量依赖性。见表1。

表1　对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀和角叉菜胶所致小鼠足趾肿胀的影响(n=10)

3.2镇痛活性从表2可见，热板试验表明飞天蜈蚣七不同极性部位提取物对醋酸所致的小鼠扭体反应均有一定的抑制作用，而正丁醇部位抑制作用最强，高剂量组扭体反应抑制率达到60.1%，阿司匹林组为79.1%；正丁醇部位各剂量组与空白对照组相比，扭体次数显著减小(P<0.05)，且有一定的量效关系；乙醇部位和乙酸乙酯部位对小鼠扭体也有一定的抑制，但不如正丁醇部位，而石油醚部位作用并不明显。从表2可见，飞天蜈蚣七正丁醇部位提取物能显著减少醋酸所致的小鼠扭体次数，有明显的镇痛作用。正丁醇部位高剂量组对痛阈的提高率最大，达到62.9%，接近于阳性对照组阿司匹林(66.9%)的镇痛效果；而且乙醇部位和乙酸乙酯部位的高剂量组对痛阈的提高率分别达到53.5%和44.2%，而石油醚部位对小鼠痛阈没有明显影响。

表2　对扭体法和热板法小鼠疼痛的影响(n=10)

3.3抗疲劳能力由表3可知，正丁醇部位和乙酸乙酯部位高剂量组小鼠游泳时间有一定延长，明显低于阳性对照组；而其他给药组均没有明显延长小鼠力竭游泳时间。飞天蜈蚣七正丁醇部位具有一定的抗疲劳作用，但抗疲劳能力不强。

3.4耐缺氧能力如表3所示，十全大补丸组能显著延长小鼠存活时间(P<0.05)，延长率可达到31.7%。而其它给药组对小鼠常压耐缺氧能力均没有显著影响，正丁醇部位的延长率能达到9.2%，存活时间延长率不高，且规律性不强。表明飞天蜈蚣七不同极性部位提取物不能提高小鼠的耐缺氧能力。

表3　抗疲劳和耐缺氧能力考察结果(n=10)

4结论本研究结果表明，飞天蜈蚣七不同极性部位提取物均有一定的抗炎、镇痛和抗疲劳的疗效，其中正丁醇部位的活性最强，接近于阳性对照组的效能，与空白对照组相比，具有显著性差异(P<0.05)，且呈现一定的剂量依赖性；而对小鼠常压耐缺氧能力均没有显著影响，存活时间延长率不高，且规律性不强。

飞天蜈蚣七根皮中富含的楤木皂苷A、银莲花苷、楤木皂苷D、竹节人参皂苷Ib等，均属于三萜皂苷类化合物，而三萜皂苷类化合物具有抗炎、镇痛、抗肿瘤、杀菌、降胆固醇等功效。由于正丁醇部位富含三萜皂苷成分，故推测飞天蜈蚣七正丁醇部位的抗炎、镇痛和抗疲劳的活性与三萜皂苷成分密切相关。此外，飞天蜈蚣七药材先经过乙醇提取，其中含有包括三萜皂苷、胆碱、挥发油等在内的大量有机成分，因此也表现出一定的抗炎镇痛活性，但活性不如正丁醇部位。本研究仅对飞天蜈蚣七不同部位提取物的抗炎、镇痛和抗疲劳等的活性进行了研究，而对正丁醇部位的化学成分并未进行详细研究，接下来本课题组也将对飞天蜈蚣七正丁醇部位进行提取分离，从而得到飞天蜈蚣七的三萜皂苷类化学成分，进而确定飞天蜈蚣七生物活性的有效成分。有研究表明，当机体组织发生炎症后，组织细胞会生成并释放多种炎症介质，比如白细胞介素-1，肿瘤坏死因子，前列腺素2、组胺等，从而产生炎症反应；镇痛作用包括中枢镇痛作用和外周镇痛作用，外周镇痛作用与炎症因子密切相关；抗疲劳作用主要通过提高体内抗氧化酶SOD的水平，加强机体清除自由基、抗氧化作用，从而达到抗疲劳效果。本研究结果显示飞天蜈蚣七正丁醇部位有一定的抗炎、镇痛和抗疲劳的疗效，而关于该部位抗炎、镇痛及抗疲劳活性的作用机理尚需进一步深入研究。

综上所述，飞天蜈蚣七不同极性部位提取物均有一定的抗炎、镇痛和抗疲劳的疗效，其中正丁醇部位的活性最强，乙醇部位次之，石油醚部位活性不明显,而对小鼠常压耐缺氧能力并没有显著影响。说明飞天蜈蚣七正丁醇部位是其活性有效部位，而对正丁醇部位化学成分并未进行详细研究，本课题组也将进一步对飞天蜈蚣七正丁醇部位进行提取分离，以期确定飞天蜈蚣七生物活性的有效成分，从而深入研究其抗炎、镇痛和抗疲劳的作用机理，为飞天蜈蚣七药材质量控制、临床合理用药和综合开发利用提供科学依据。

[1]江苏新医学院.中药大辞典[M].上海:上海人民出版社,1977:2440.

[2]宋小妹,王薇.太白七药[M].上海:上海科技出版社,2012:30-31.

[3]崔大江,王志勇,聂丹丽,等.飞天蜈蚣七对大鼠肝纤维化醛固酮的影响[J].中西医结合肝病杂志,2003, 13(3):160-162.

[4]崔大江,郅敏,聂丹丽.飞天蜈蚣七对实验性肝纤维化大鼠胰岛β细胞功能的影响[J].河北中医药学报, 2004, 27(1):21-23.

[5]陈奇.中药药理实验方法学[M].北京:人民卫生出版社,1994:70.

[6]徐叔云,卞如濂,陈修.药理实验方法学[M].北京:人民卫生出版社,2002:882.

(收稿2016-04-21；修回2016-05-30)

Comparative studies on pharmacodynamics effects of different extracts from Aralia Chinensis L

Department of Pharmacy, The Shaanxi Province Hospital of Traditional

Chinese Medicine (Xi’an 710002)Yang Qinyan Li Bo

Chinese materia medica preparationAnimal experimentation @ Aralia Chinensis L.

R258.6

A

10.3969/j.issn.1000-7369.2016.09.073