探讨微小RNA-451(miR-451)的表达与胃癌的临床病理特征及预后之间的关系

梁晓东

盐城市第三人民医院病理科，江苏盐城 224001

*病理研究*

探讨微小RNA-451(miR-451)的表达与胃癌的临床病理特征及预后之间的关系

梁晓东

盐城市第三人民医院病理科，江苏盐城 224001

目的 探讨微小RNA-451(miR-451)的表达与胃癌的临床病理特征及预后之间的关系。方法 选取该院于2014年6月—2016年8月期间收治的32例胃癌患者当作研究对象。收集这32例患者的胃癌组织标本与癌旁正常组织标本。应用原位杂交技术，对微小RNA-451(miR-451)在胃癌组织、癌旁正常组织之中的表达情况。探讨分析胃癌组织中微小RNA-451(miR-451)的表达水平，并分析胃癌的临床病理特征及预后之间的关系。 结果 微小RNA-451(miR-451)在胃癌组织中的高表达率为36.11%，明显低于癌旁正常组织的77.78%；III～IV期胃癌患者的微小RNA-451(miR-451)高表达率为47.62%，明显低于I～II期胃癌患者的86.67%；有淋巴结转移者的微小RNA-451(miR-451)高表达率为47.06%，明显低于无淋巴结转移者的78.95%；微小RNA-451(miR-451)高表达者的生存率为69.23%，明显高于微小RNA-451(miR-451)低表达者的39.13%；上述差异有统计学意义（P＜0.05）。 结论 微小RNA-451(miR-451)与胃黏膜组织的恶性病变、胃癌组织浸润转移、预后具有明显的相关性，可能是胃癌的新治疗靶点。

微小RNA-451；表达；胃癌；临床病理特征；预后

随着市场经济的发展，人们的生活水平与生活质量不断提高，但随着生活方式与饮食习惯的改变，导致胃肠道疾病的发生率不断上升。胃癌是一种较为常见的消化系统恶性肿瘤性疾病，在我国的发病率较高，严重威胁着患者的生命财产安全与生活质量。胃癌的发生涉及诸多因素，既包括癌基因，也包括抑癌基因，胃癌的病理发展是一个多步骤、多阶段的过程，而微小RNA是近年来分子生物学的一大研究热点[1]。虽然近年来关于微小RNA在胃癌中的表达及临床意义的研究报道层出不穷，但就现阶段来说，关于微小RNA-451(miR-451)在胃癌中的表达以及微小RNA-451(miR-451)与胃癌的临床病理特征、预后的关系方面的研究报道仍旧比较少。基于此，该研究通过对2014年6月—2016年8月期间盐城市第三人民医院收治的32例胃癌患者的临床资料进行回顾性分析，旨在探讨微小RNA-451(miR-451)的表达与胃癌的临床病理特征及预后之间的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料

1.2 方法

1.2.1 仪器与试剂 应用杂交炉，原位杂交检测试剂盒，恒温水浴箱以及微小RNA-451(miR-451)探针。

1.2.2 微小RNA-451(miR-451)表达的检测方法 应用原位杂交技术进行检测。烤片后常规切片，然后进行脱蜡处理，应用梯度乙醇复水的方法[2]；应用3%过氧化氢，对内源性酶进行灭活；在室温条件下，3%胃蛋白酶常规消化15～20 min，然后水洗、固定；滴加提前准备好的预杂交液之后，在55℃的环境中预杂交2 h；miR-451探针使用地高辛标记，并将其置于55℃的环境中杂交过夜；第2天，使用不同浓度的SSC（saline sodium citrate）缓冲溶液对其进行洗涤[3]；之后滴加封闭液，在室温状态下封闭 30 min；取出后滴加生物素化鼠抗地高辛，并在室温状态下孵育2 h然后滴加SABC液，并在室温状态下孵育30 min；最后应用DAB显色，并使用苏木素进行复染，对其进行充分水洗之后，再应用中性树胶进行封片、保存。

1.3 检测结果判定

胃癌细胞胞质、胃癌细胞胞核或胃黏膜上皮出现棕黄色颗粒，为微小RNA-451(miR-451)阳性。评估微小RNA-451(miR-451)阳性信号强度，并赋予分值[4]。无：0～1分（含）；弱信号：1（不含）～2分（含）；中等信号：2分（不含）～3分（含）；强信号：3（不含）～4分（含）。计数阳性细胞，在400倍显微镜下，每个标本分别选取3个典型视野，并对微小RNA-451(miR-451)阳性细胞占比进行计算。阳性细胞占比×信号强度即为表达得分，得分为0～4分,2分以下为低表达，2分及以上为高表达。由两位病理医师对组织芯片结果进行独立镜检以及评分。

1.4 统计方法

应用SPSS 13.0统计学软件进行数据分析与处理。用[n（%）]表示计数资料，组间比较的时候采取确切概率法或χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

对于油脂产品的需求我国甚至是全世界都呈现一种较高的趋势，对于食用油的消费数量也逐年增多，在我国油脂行业存在的优势可见，其发展前景是十分广阔的，随着经济的发展，人口数量的不断增加，生活水平的不断提高，对于未来油脂产品的消费空间还会有较大的上升空间。在我国，城镇化进程不断加快，我国养殖业也必将面临较大的规模增长，人们对于肉食需求的增长也从一定程度上促进了油脂加工行业发展的逐步扩张，对于食用油消费的需求总量上始终保持着刚性增长的趋势。

2 结果

2.1 微小RNA-451(miR-451)在胃癌组织中的表达

微小RNA-451(miR-451)在胃癌组织中的高表达率为36.11%，明显低于癌旁正常组织的77.78%；差异有统计学意义（P＜0.05）。具体见表1。

表1 微小RNA-451(miR-451)在胃癌组织与癌旁正常组织中的表达比较[n（%）]

2.2 微小RNA-451(miR-451)的表达与胃癌的临床病理特征的关系

相比较于I～II期的胃癌患者，III～IV期胃癌患者的微小RNA-451(miR-451)高表达率明显较低，且差异有统计学意义（P＜0.05）；相比较于无淋巴结转移者，有淋巴结转移者的微小RNA-451(miR-451)高表达率明显较低，且差异有统计学意义（P＜0.05）；具体见表2。

表2 胃癌患者微小RNA-451(miR-451)的表达与胃癌各项临床病理特征的关系[n（%）]

2.3 微小RNA-451(miR-451)的表达与胃癌预后的关系

对患者及其家属行4～30个月的电话随访，23例微小RNA-451(miR-451)低表达者中14例死亡，其病死率为60.87%，9例生存，生存率为39.13%；13例微小RNA-451(miR-451)高表达者中4例死亡，其病死率为30.77%，9例生存，生存率为69.23%。微小RNA-451(miR-451)高表达者的生存率明显高于微小RNA-451(miR-451)低表达者，差异有统计学意义 （P＜0.05）。说明微小RNA-451(miR-451)表达水平越高，患者的生存时间也就越好，代表预后越好。

3 讨论

在不同类型的肿瘤中，微小RNA的表达存在很大的差异，表达异常的微小RNA，一般情况下位于相关癌症基因的突变位点[5]。且相关研究发现，胃癌中，微小RNA表达异常的机制主要包括：①RNA甲基化状态；②参与微小RNA形成的蛋白因子存在异常；③微小RNA所在的基因发生了转位、扩增或者缺失等[6]。

在胃癌组织中，有多种微小RNA的表达，微小RNA的表达水平不同，胃癌患者的预后也存在一定的差异。张军等人[7]的研究指出，在胃癌组织中微小RNA-215与胃癌的分化程度、临床病期分类分期及淋巴结转移等密切相关；微小RNA-215的表达在胃癌细胞中高于正常胃黏膜细胞株，其表达量与胃癌细胞的分化程度之间无明显相关性。汪伟等人[8]通过进行试验发现，miR-451及MIFmRNA与胃癌的分化程度、TNM分期、浸润深度及淋巴结转移相关，从而得出如下结论，miR-451可能通过抑制MIF负向调控了胃癌的发生、发展作用。王利平等人[9]发现，癌旁非肿瘤组织、胃癌组织中miRNA-100的相对表达量分别为（0.74±0.36）、（1.31±0.69）；胃癌组织中miRNA-100的表达与患者的性别、年龄、肿块位置、肿块大小、分化程度、TNM分期、淋巴结转移等因素均无明显的相关性，从而得出结论miRNA-100在胃癌中的异常表达可能与胃癌的发生有关。

该研究通过回顾性分析该院于2014年6月—2016年8月期间收治的32例胃癌患者的临床资料，探讨微小RNA-451(miR-451)的表达与胃癌的临床病理特征及预后之间的关系。结果发现：微小RNA-451(miR-451)在胃癌组织中的高表达率为36.11%，明显低于癌旁正常组织的77.78%；TNM分期III～IV期胃癌患者的微小 RNA-451(miR-451)高表达率为47.62%，明显低于TNM分期I期～II期胃癌患者的86.67%；有淋巴结转移者的微小RNA-451(miR-451)高表达率为47.06%，明显低于无淋巴结转移者的78.95%；微小RNA-451(miR-451)高表达者的生存率为69.23%，明显高于微小RNA-451(miR-451)低表达者的39.13%。这一研究结果与相关文献，如陈涛等人[10]的研究结果：92例胃癌组织中 miR-451高表达率为38.04%（35/ 92），正常胃黏膜组织中 miR-451高表达率为76.60%（36/ 47）；III～IV期胃癌患者的微小 RNA-451高表达率为27.3%（15/55），I～II期胃癌患者的高表达率为54.1%（20/ 37）；有淋巴结转移的胃癌组织中 miR-451的高表达率为27.1%（16/59），无淋巴结转移的胃癌组织中 miR-451的高表达率为33.19%（19/33），存在一致性。这一研究结果说明，微小RNA-451(miR-451)在胃癌组织中的高表达率明显低于癌旁正常组织，微小RNA-451(miR-451)在胃癌中的表达水平，与胃癌患者的淋巴结转移以及TNM分期之间密切相关。

综上所述，微小RNA-451(miR-451)与胃黏膜组织的恶性病变、胃癌组织浸润转移、预后具有明显的相关性，可能是胃癌患者的新治疗靶点以及预后及诊断的新的潜在分子标志物。

（

）

[1]张家魁,谢强,刘继超,等.MiR-335表遗传学调控与胃癌临床病理特征和预后相关性研究[J].中华肿瘤防治杂志,2015, 22（21）:1680-1687.

[2]王凡,任晓峰,徐余超,等.微小RNA-451在胃癌组织的表达及对胃癌细胞周期的影响[J].环境与职业医学,2016,33（5）:455-460.

[3]巢海潮,董志峰,张古月,等.miRNA-451在膀胱癌细胞中的表达及对其生物学功能的影响[J].临床与病理杂志, 2016,33（9）:1350-1355.

[4]刘博,田延锋,赵增仁,等.microRNA-451在结直肠癌组织中的表达及其临床意义[J].中国普通外科杂志,2013,22（4）:447-451.

[5]周志威,聂玉强,杜艳蕾,等.活化白细胞黏附分子在胃癌组织中的表达及其调控机制[J].广东医学,2013,34（18）: 2784-2788.

[6]邵彬,李惠平,朱军,等.复发转移性乳腺癌患者血浆miRNA表达水平与临床病理特征、化疗疗效及预后关系的研究[J].癌症进展,2015（2）:106-113，139.

[7]张军,陈兆峰,刘晓光,等.微小RNA-215在胃癌中的表达及其临床意义[J].兰州大学学报：医学版,2013，39（4）:13-16，20.

[8]汪伟,孙晓娜,张玉峰,等.miR-451与MIF在胃癌组织中表达的相关性研究[J].安徽医科大学学报,2013（11）:1384-1387.

[9]王利平,王启之,邓敏,等.微小RNA-100在胃癌中的表达及临床意义[J].蚌埠医学院学报,2015，40（1）:37-39，42.

[10]陈涛,谢黎明,唐海林.miR-451在胃癌组织中的表达及其临床意义[J].天津医药,2015,43（3）:267-269，337.

Objective to Investigate the Relationship between the Expression of Minimal RNA-451(miR-451)and Clinicopatho Logical Features and Prognosis of Gastric Cancer

LIANG Xiao-dong
Department of Pathology Yancheng City Third People's Hospital,Yancheng,Jiangsu Province,224001 China

Objective To investigate the relationship between the expression of minimal RNA-451 (miR-451)and clinicopathological features and prognosis of gastric cancer.Methods 32 patients with gastric cancer who were treated in our hospital from June 2014 to August 2016 were selected as subjects.Specimens of gastric cancer tissues and normal tissues were collected from 32 patients.The expression of small RNA-451(miR-451)in gastric cancer tissues and adjacent normal tissues was studied by in situ hybridization.To investigate the expression of minimal RNA-451(miR-451)in gastric carcinoma and to analyze the relationship between clinicopathological features and prognosis.Results Small RNA-451 (miR-451)in the tissue of gastric cancer high expression rate is 36.11%, significantly less than 77.78%of the normal tissue adjacent to carcinoma;Phase III～IV gastric cancer patients with tiny RNA-451 (miR-451)of high expression rate is 47.62%,significantly less than 86.67%of the patients with stage I～II gastric cancer;With lymph node metastasis is tiny RNA-451(miR-451)of high expression rate is 47.06%,significantly lower than without lymph node metastasis is 78.95%;Small RNA-451 (miR-451)the high expression of survival rate was 69.23%,significantly higher than thesmall RNA-451 (miR-451)lower expression of 39.13%;The difference was statistically significant(P＜0.05).Conclusion Micro RNA-451 (miR-451)has a significant correlation with malignant lesions of gastric mucosa,invasion and metastasis of gastric cancer, and may be a new therapeutic target for gastric cancer.

Minimal RNA-451;Expression;Gastric cancer;Clinicopathological features;Prognosis

R735.2

A doi 10.11966/j.issn.2095-994X.2016.02.04.07

2016-10-01；

2016-11-12

梁晓东（1980.2-），男，江苏盐城人，本科，主治医师，研究方向：病理学。