体液细胞块免疫组化在病理诊断中探讨

张敏

南京鼓楼医院集团宿迁市人民医院有限公司病理科，江苏宿迁 223800

体液细胞块免疫组化在病理诊断中探讨

张敏

南京鼓楼医院集团宿迁市人民医院有限公司病理科，江苏宿迁 223800

目的 探讨体液细胞蜡块免疫组化在临床病理中诊断中应用。 方法 回顾性分析2015年1—12月90例体液细胞涂片与细胞块免疫组化对照，观察和分析其细胞块免疫组化在病理诊断中可靠性分析。 结果 细胞学病理诊断结果，90例细胞体液标本中，除4例涂片仅见几个肿瘤细胞，细胞块阴性，另86例标本涂片与细胞块检查结果完全符合（95.6%），其中51例良性，涂片及细胞块结果为间皮增生或炎性病变，未见肿瘤细胞。病理细胞学涂片诊断为肿瘤细胞阳性39例，腺癌为11例，鳞癌为9例，小细胞癌为5例，淋巴瘤7例，难以定性肿瘤为4例，其他肿瘤为3例。用细胞块、免疫组化联合诊断难以定性肿瘤，2例为腺癌，1例为鳞癌，1例为间皮瘤。另31例肿瘤细胞阳性细胞块免疫组化与细胞涂片结果相符合。其他类型肿瘤中，2例为神经内分泌肿瘤，1例为组织细胞瘤。体液细胞块、免疫组化联合应用诊断率高于单一细胞学涂片。 结论 细胞涂片、细胞块免疫组化联合应用具有操作方便、诊断率高特点。

体液细胞块；免疫组化；病理诊断

体液细胞学诊断在胸水、腹水、小便、肿块穿刺液等标本经离心直接涂片固定、染色。单靠细胞学涂片存在漏诊情况，而且鉴别诊断率低[1-2]；在各种体液脱落细胞送检标本经过处理做成细胞块，在细胞块的基础上进行免疫组化检测，此方法可大大提高体液细胞病变病理诊断准确性[3-5]。回顾性分析2015年1—12月90例体液标本，细胞块及免疫组化对于肿瘤细胞的来源和肿瘤细胞类型、感染性疾病的诊断，尤其是恶性肿瘤的定性方面起到重大的作用。

1 资料与方法

1.1 一般资料

该研究选取该院门诊与住院患者中各种体液脱落细胞送检标本90例，年龄18～81岁，平均年龄为50岁，男58例，女32例。胸水60例，腹水18例，小便8例，肿块穿刺液4例。

1.2 试剂及仪器

10%中性甲醛（pH7.4）、无水乙醇(H11022051)、伊红(H31020840)等试剂，离心机，冷藏冰箱，微波炉等。

1.3 细胞块制作方法

将送检体液放在一次性塑料试管中离心后倾其上清液，再用一次性吸管吸干沉淀物上少许残留液体，用剪刀剪去一次性试管空管部分，留取一次性塑料管与沉淀物粘连部分一起用胃镜纸包裹后置于10%中性甲醛中固定30 min，然后放在常规组织片中进行脱水、浸蜡、包埋、制成细胞块后，常规切片、HE染色。

1.4 免疫组化

在常规细胞涂片、细胞块切片基础上难以作出病理诊断情况下，将做成的细胞块，并用免疫组化方法对体液细胞学进一步病理诊断。疑为鳞癌、腺癌，选用抗体为CKpna、TTF-1、P40、CK7、CK20、CEA、EMA、CR、KI67等抗体，疑为小细胞癌，选用抗体CGA、SYN等抗体，免疫组化均采用阴阳性对照。

1.5 统计方法

采用SPSS 20.0统计学软件进行数据分析，计数资料采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 细胞学病理诊断结果

90例细胞体液标本中，除4例涂片仅见几个肿瘤细胞，细胞块性，另86例标本与细胞块检查结果完全符合（95.6%），其中51例良性，涂片及细胞块结果为间皮增生或炎性病变，未见肿瘤细胞。病理细胞学涂片诊断为肿瘤细胞阳性39例（见表1、图1）。用细胞涂片、细胞块免疫组化联合诊断肿瘤39例，其中4例肿瘤细胞少，细胞块阴性。腺癌免疫组化抗体选用 CKpan、TTF1、CEA、EMA、CK7、LCK、KI67等。难以定性肿瘤其中2例TTF1+、LCK+、EMA+、CK7+诊断为腺癌；鳞癌免疫组化选用抗体CKpan、TTF1、ESA、P40、HCK、KI67等，难以定性肿瘤其中 1例CKpan+、P40+、K167+诊断为鳞癌；小细胞癌选用抗体CgA、Syn、TTF1、SCLC、Leu7等，难以定性肿瘤1例CR+、CK5/6+,CK+,诊断为间皮细胞瘤；免疫组化LCA+、CD20+、 CD30+等诊断为淋巴瘤；其他肿瘤中另2例Syn+、CK+为神经内分泌肿瘤，另1例AAT+、vim+为组织细胞瘤。肿瘤细胞涂片阳性中细胞块免疫组化与细胞涂片结果完全符合31例（见图2、表2），细胞块性的4例中，2例为腺癌，2例为鳞癌。

表1 39例细胞学涂片阳性结果情况（n）

图1 左图为细胞块HE染色×100倍；右图为细胞涂片HE染色×100倍

图2 左图为细胞块免疫组化染色×100倍；右图为细胞块免疫组化染色×100倍

3 讨论

根据体液细胞学病理检测资料统计，在90例体液细胞病理诊断中，细胞块及免疫组化检出率约95.6%（86/ 90），与魏谨等[6]报道胸腔积液细胞块组检出率83.3%（25/ 30）大致相符。

表2 35例肿瘤患者细胞块及细胞免疫组化结果

常规的细胞学涂片检查检测体液是诊断的可靠方法，具有重要的临床价值，其操作简便，损伤小，但是由于涂片的细胞量过少、变形、或混有其他的红细胞、炎性物质、多种粘液，或细胞涂片不均匀，则会出现假阴性或假阳性的结果，并且炎性增生、间皮细胞增生及腺癌细胞难以鉴别。单一的细胞学涂片免疫组化准确性低，可重复性差[7]。体液细胞学采用细胞块、免疫组化联合应用，具有以下应用的优点：①避免常规涂片厚薄不均致细胞定位不清，而出现假阴性或假阳性，给临床诊治带来困难。②细胞块能根据病理诊断需要连续切片，还能永久保留标本，基于细胞病理诊断特殊性，可用免疫组化对各种病变进行进一步诊断、分型，还可以判断转移肿瘤组织来源。③细胞块最大优点可以连续切片，在此基础上可以做多种抗体染色，以满足临床病理诊断需要，还可以用于分子技术研究及治疗，从而弥补细胞涂片不足[8]。④细胞块经过特殊处理后，能够提供更多的细胞数量和细胞完整的结构及形态学特征，可以多次切片的同时可以进行免疫组化多种抗体染色的检查[9-10]。⑤体液细胞块、免疫组化联合应用能够保证病理诊断的准确性，同时也能减轻病理医生诊断风险，在细胞学诊断中具有较高的应用价值。

总之，将各种体液标本制作细胞块并联合免疫组化进行病理诊断阳性率高、对于鉴别组织来源及细胞的良恶性具有良好的临床应用价值，对于提高细胞学的诊断水平具有重大的作用。

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[1]Shivakumarswamy U，Arakeri SU，Karigowdar MH，et al.Diagnostic utility of the cell block method versus the conventional smear study in pleural fluid cytology[J].J Cytol，2012，29(1)：11-15

[2]李天潢，黄受方.实用细针吸取细胞学[M].北京：科学出版社，2000：14

[3]王超，周小鸽，余小蒙，等.细胞块免疫细胞化学和原位杂交在针吸细胞学中应用 [J].临床与实验病理学杂志，2006，22(1)：96-97.

[4]马正中.诊断细胞病理学[M].郑州：河南郑州科学技术出版，1999:12.

[5]龚伟，朱忆凌，黎庆荣，等.推荐一种简便的细胞块制作方法[J].温州医学院学报，2011，41（4）：356-357.

[6]魏谨，朱有珍.胸腔积液的细胞块技术应用体会[J].临床肺科杂志，2012,17（2）：352.

[7]李平，赵俊军，张竹青，等.细胞块在胸水细胞病理诊断中的应用[J].中国冶金工业医学杂志，2015,32（1）：107-110.

[8]刘德美.65例胸腹水细胞块免疫细胞化学的研究和分析[J].中国实用医药，2015，10(19):19-20.

[9]杨槐，刘禄，杨娜，等.肺恶性肿瘤伴胸腔积液细胞块病例诊断价值[J].临床医药实践，2015，24（3）:233-235.

[10]唐应成，梁利斌，杨瑞山，等.胸腔积液细胞块免疫组化染色的病例诊断价值 [J].第三军医大学学报，2012，34（5）:1568-1571.

Study on the Pathological Diagnosis of Humoral Cell Block by Immunohistochemistry

ZHANG Min
Department of Pathology,Gulou Hospital Group Suqian People's Hospital,of Nanjing,Suqian,Jiangsu Province,223800 China

Objective To explore the humoral and cellular immunohistochemistry in paraffin blocks in clinical pathological diagnosis. Methods Retrospective analysis of 90 cases of humoral cell smear and cell block from December to January 2015 were compared,and the analysis of the reliability of cell block immunohistochemistry in pathological diagnosis was observed and analyzed.Results Diagnostic results of cytological disease,90 cases of cells specimens,except 4 cases of smear was observed in several tumor cells,cell block negative,the other 86 cases were smear and cell block examination results accord with the (95.6%),including 51 cases of benign,smear and cell block results for mesothelial hyperplasia or inflammatory lesions,no tumor cells.The pathological diagnosis of tumor cells smear，the cell was positive in 39 cases,adenocarcinoma in 11 cases,9 cases of squamous cell carcinoma,small cell carcinoma in 5 cases,7 cases of lymphoma,difficult to characterize tumors of 4 cases,3 cases of other tumors.Using cell block,immunohistochemistry diagnosis difficult to characterize tumors,2 cases of adenocarcinoma,1 cases of squamous cell carcinoma.1 cases of mesothelioma.Another 31 cases of positive cells in tumor cell block by immunohistochemistry and cell smear results.Other types of tumors,2 cases of neuroendocrine tumors,1 cases of humoral and cellular histiocytoma.Block,immunohistochemistry combined diagnosis rate is higher than the single smear.Conclusion Smear,cell block immunohistochemistry combined with convenient operation, The diagnosis rate is high.

Body fluid cell block；Immuno histochemistry；Pathologic diagnosis

R36

A doi 10.11966/j.issn.2095-994X.2016.02.04.11

2016-10-17；

2016-11-25

张敏（1964.5-），女，江苏沭阳人，本科，主治医师，研究方向：细胞学诊断。