猪瘟及大肠杆菌混合感染的诊断与防治

孙福南（广西南宁市良庆区农业服务中心，广西 南宁 530219）

猪瘟及大肠杆菌混合感染的诊断与防治

孙福南
（广西南宁市良庆区农业服务中心，广西 南宁 530219）

猪瘟作为一种急性、热性和高度接触性传染病一直严重地危害着我国的养猪行业，而且常常会继发或者是混合感染别的疾病，最为常见的便是和大肠杆菌的混合感染。本文笔者将对该病的临床症状、病理变化、诊断的方法和防制措施作出相应详细的报告，希望对同行专业技术人员有所帮助。

猪瘟；大肠杆菌；混合感染；诊断；防治措施

猪瘟是一种危害性极强的动物疫病，一旦猪场有猪瘟的出现，就很难控制这场灾难，尤其是猪瘟与大肠杆菌的混合感染极难治愈和控制，从而导致大批量的猪病变死亡，大量的散户、私人养猪场面临倒闭，对我国的生猪产业带来不可估量的影响。

1　病例介绍

本文以某私人养猪场为例，该猪场离人群比较远，地理位置比较偏僻，有效地抑制了外来病原的入侵，在2015年年底存栏有生猪加上母猪总计500头的数量，2016年的4月份大部分的猪都出现了体温烧达41 ℃，用药无明显效果，高烧不退，后面相继出现精神状态极度不佳、食欲非常差、消瘦的问题，而仔猪全部87头都出现严重腹泻现象，接着出现仔猪死亡，死状呈划水状。仔猪死亡率超过了95%，母猪抵抗力较好，仅仅出现3头的死亡，肉猪也相继出现死亡，死亡率约30%［1］。

2　临床症状

在发病的初期，猪的食欲开始下降，精神状态差，常伴随着腹泻，在病发2 d左右，就开始出现高烧症状，一直不会消退，不吃食，喜欢饮用水，在其后肢内侧、腹下、耳背等部位会出现紫斑或黄豆大的紫点，逐渐消瘦，行走时呈现乏力与摇晃状态，病发后无法站立，呼吸困难，至终衰竭而亡，死亡时呈四肢划水状。

3　病理变化

通过病猪的解剖，可以明显看见其心肌、膀胱出现斑点状态的出血，皮下组织包括脂肪与肌肉等普遍出血，肝脏出血且存在发黑的淤血；在脾脏的周边已经出现梗死并且呈现暗红色，而且脾脏有水肿；肾脏呈现土黄色，并有针孔般大小的血点浮现于表面；颌下淋巴结、肺门淋巴结以及肠系膜淋巴结均出现了出血和肿大，其切面呈现红白条纹；喉头和气管部位也出现了出血，而肠黏膜出现脱落，并且肠壁逐渐变薄，肠内物发出腥臭味并呈现红色，说明肠壁也有出血的现象，还有一些肠壁出现了水肿［2］。

4　诊断的方法

4.1猪瘟实验室诊断方法

4.1.1兔体交叉试验 选取健康兔6只，分成两组，试验组接种被检材料乳剂1 ml，对照组不接种。经5～10 d，两组家兔全部接种猪瘟兔化弱毒苗，静脉注射1 ml，连续3 d测温，试验组体温不变，对照组1 d后体温升0.5 ℃以上，即可确诊此材料为猪瘟病毒材料。

4.1.2猪体免疫试验 这是诊断猪瘟的可靠方法，用未免疫的健康猪4头，2头用猪瘟兔化弱毒苗（5～10头份）免疫，另2头不免疫。12～14 d后将待检病料（1∶5脾乳剂），经细菌滤器过滤或加抗生素处理后，接种于上述4头猪，每头猪肌肉注射1 ml，接种后隔离观察两周，如免疫猪不发病，未免疫猪发病死亡，即可诊断为猪瘟。

4.1.3猪瘟荧光抗体诊断 首先需要取出病死猪的扁桃体与肾组织样本，使用Bright冰冻切片机把两种样本进行冷冻，并且切片。其次，把已经处理过的扁桃体与肾组织依附在载玻片上，使用丙酮进行固定，大概需要15 min的时间，在其自然干燥的基础上，将猪瘟荧光抗体滴落于载玻片上。最后，将载玻片放入湿盒里面，在37 ℃的环境温度下作用半个小时，使用PBS进行三次浸洗，每次浸洗时间约5 min，待其自然干燥，通过荧光显微镜对其进行观察。若发现亮绿与黄绿的荧光，则可说明猪瘟病毒存在。

4.2细菌分离鉴定

将病死猪的肺、肝、脾与淋巴结等取出，并在无菌操作的技术下，把其接种到一般琼脂培养基之中，再放置于恒温箱进行培养，温度设定为37 ℃，时间为24 h，可以看见在培养基中出现具有如下特征的菌落：颜色为灰黄色，且不透明；呈圆形，凸起，而且边缘不平整；菌落较大，而且比较湿润。任意采取某一菌落进行革兰氏染色，通过显微镜检查可以发现长与宽分别为3 μm、0.4 μm的革兰氏阴性短粗的杆菌。

取两只小鼠作为菌液腹腔接种的生化实验对象，这两只小鼠都注射0.15 ml的菌液，再使用一只身体状况健康的小鼠，对其注射0.15 ml的无菌生理盐水，过了18 h之后其中一只接种菌液的小鼠出现死亡，20 h之后另一只接种菌液的小鼠也出现死亡，而注射无菌生理盐水的小鼠身体状况依旧健康。对这两只死亡小鼠进行解剖分析实验结果，剖检发现它们的肺脏、肝脏、脾脏均出现出血现象。

使用普通琼脂菌落与浓度为0.5%的Nacl溶液进行均匀混合，形成一种新的菌悬液。对病原性大肠杆菌进行分组，一组为OK多价血清，另一组为O分型血清，将两组进行玻片凝集，结果发现该菌悬液会和第一组OK分型血清发生凝集现象，和第二组O分型血清却不会出现凝集现象。对OK与O分型血清进行检查，结合食品病原微生物检验技术手册中的相关内容，可知该菌为O101型。

用试管吸取2.0 ml的0.45%Nacl溶液，然后将其滴进基物安培管，将基物安培管置于Vitek比浊仪中，并且调零。使用铂金耳选取单个菌落，将其与基物安培管的稀释液进行均匀的混和，制作每毫升含菌有3×108个的MCFARLAND菌悬液，将其吸附到GNI+ 和Gns-120药敏鉴定卡上，再将其插入生化鉴定仪之中进行反应，时间大概为2～12 h，根据观察可知与大肠埃希氏菌的相关生化特征相符合。最后根据药敏实验结果（见表1），诊断该病为猪瘟疾病与大肠杆菌病原体的混合感染。

表1　药敏试验结果

5　防治措施

众所周知，猪瘟病毒与大肠杆菌发生混合感染后治疗是极其困难的，所以建议养殖户平时就防止该病的发生。若一旦出现了该病，也应该立即使用相对应的方法及时处理，有效地进行综合性治疗。下面是笔者的一些防治建议：

5.1自繁自养

可以有效防止外来的病原进入猪场，若需要引进种猪，也必须把隔离、检疫及防疫工作做到十分严密。平时需要保持猪舍卫生，及时通风换气，定期消毒，为猪提供卫生、舒适而且具有安全性的生活环境，同时防止病原微生物的传播。另外，夏季高温时进行降温，潮湿天气要注意防潮，低温天气则需要采取保暖措施。一个良好的养猪环境可以减少疫情的传播，做好预防，让潜在威胁降到最低。

5.2对病死猪进行无害化处理，比如深埋或病猪尸体高温处理等，以便有效地遏制该病的传播

对于与病猪隔离开来的健康猪群，可以对其开展进一步的健康检查，用猪瘟兔化弱毒疫苗进行紧急预防接种，同时对尚未死亡的病猪使用猪瘟免疫血清进行肌肉注射，然后根据药物敏感试验来选择治疗方案。

5.3定期进行猪瘟疫苗接种才是最有效的防治方法，从最根本上消灭病菌的源头

在定期进行猪瘟疫苗预防猪瘟病毒时，时间的选择非常重要，每个猪场的消毒规律是不一样的，用的饲料等也不一样，所以猪场都应该根据自身情况来选择猪瘟疫苗接种的时间。

5.4猪场的饲料管理 夏季高温高湿的天气导致饲料极其容易变质，导致猪体的抵抗力水平下降，易感染疾病。管理人员可以对饲料进行一些投药性计划，比如氟苯尼考、土霉素等药物和饲料可以混合在一起给猪食用，检查2～3个星期，降低猪瘟与大肠杆菌混合感染的机率，也可以对别的病菌产生有效的防护作用，进而降低病猪死亡率。

6　总结

猪瘟严重影响着我国生猪产业的发展与生猪的健康，每个猪场都应对生猪进行定期的猪瘟疫苗接种，把控制生猪染上猪瘟的危险程度降到最低。猪场可以采取“自繁自养”的方式，避免外面的病原进入猪场，防止猪瘟和其他病原体混合感染的发生，尤其是猪瘟疾病与大肠杆菌病原体的混合感染。在猪场的消毒和卫生方面也要做到严谨并始终坚持，减少病原微生物的存在和传播，保持舒适卫生的猪场环境。另外，及时发现猪场内的病猪，从而及时隔离，甚至展开有效治疗。在对病猪用药前，需要进行药物敏感实验，有利于在猪产生耐药性前使用最好最合理的药品来进行治疗。

［1］龙冬梅，韦冠东，汤德元，等.贵州省某规模化猪场猪瘟、猪伪狂犬病和大肠杆菌病混合感染的诊断［J］.黑龙江畜牧兽医，2016，（2）.

［2］何竞铭.中小猪场猪瘟与大肠杆菌的诊断与防治［J］.现代农业科技，2014，（24）.

（编辑：尹 云）

S858.28

B

1006-799X（2016）12-0066-02

孙福南（1971-），男，广西南宁人，助理兽医师，主要从事动物防疫，检疫及动物诊疗工作等。