新疆部分规模化奶牛场牛病毒性腹泻调查

刘洁琼　新疆兵团畜牧兽医工作总站　830000

新疆部分规模化奶牛场牛病毒性腹泻调查

刘洁琼新疆兵团畜牧兽医工作总站830000

为了了解新疆部分规模化奶牛场BVDV的感染情况，对采集的奶牛血清、流产死胎和鼻拭子等组织病料应用Ruminant BVD/BD p80-Serum阻断ELISA实验及牛病毒性腹泻 （BVD）实时荧光RTPCR的方法进行检测，BVDV血清学检测阳性率为63.8%，组织病料样品中阳性率为13.46%，结果表明BVDV在新疆规模化奶牛场中已存在感染，因此应该对发病动物进行隔离或者淘汰，避免相互感染传播，降低感染率。

牛病毒性腹泻；阻断ELISA；实时荧光RT-PCR

牛病毒性腹泻（BVDV）又称牛病毒性腹泻-黏膜病，简称黏膜病。与猪瘟病毒和羊边界病病毒同属黄病毒科瘟病毒属。其特征为黏膜发炎、糜烂、坏死和腹泻，还引起患畜的持续性感染，产生免疫抑制或免疫耐受现象。

BVDV是奶牛的主要病原之一，可引起奶牛多种病变或临床综合征。自1980年国内首次报道该病以来，我国许多地区先后报道有该病的发生，给畜牧养殖业造成了巨大的经济损失。新疆部分地区牛场有犊牛腹泻和母牛流产等现象，影响和制约了奶牛业的发展。为了了解BVDV的感染情况，我们对采集的血清和组织病料应用Ruminant BVD/BD p80-Serum阻断ELISA实验及牛病毒性腹泻（BVD）实时荧光RT-PCR的方法进行检测，结果报告如下。

1　材料与方法

（1）样品来源。血清学样品。为了查明新疆地区部分规模化奶牛场牛病毒性腹泻感染状况，2011～2014年，从A、B、C、D、E五个规模化牛场采集存在流产、死胎、弱犊、肺炎和腹泻等临床表现的0～8岁龄奶牛的血液样品。F场主要饲养生活在天山深处（巴音布鲁克草原）的牦牛，上世纪50～60年代从青海引进，经过60年的繁衍，已经适应在天山深处的生活环境，临床表现健康。病原学样品。采集流产死胎的肝、脾和肾等组织59份，1～2月龄有咳嗽、流鼻涕症状的犊牛鼻拭子81头份及耳组织31头份，2月龄内存在腹泻症状犊牛的粪便37头份，总共208头份。

（2）主要试剂。Ruminant BVD/BD p80-Serum试剂盒（批号：1-BVD-015 03-2014）购自法国LSIVET公司，牛病毒性腹泻（BVD）实时荧光RT-PCR检测试剂盒（批号BVD20140926P）。

（3）检测方法。BVDV阻断ELISA和实时荧光RT-PCR的检测均参照试剂盒说明书进行。

2　结果

（1）对6个牛场522份血清进行检测，结果显示有333份阳性，阳性率为63.8﹪，结果详见表1。

表1　牛病毒性腹泻抗体检测结果

（2）采用实时荧光RT-PCR方法检测的组织病料样品中的阳性率为13.46%。在流产死胎和鼻拭子中检出BVDV病毒，粪便和耳组织中未检出该病毒，结果详见表2。

表2　牛病毒性腹泻病原学检测结果

3　讨论和分析

（1）本次调查的规模化奶牛场BVDV血清学检测阳性率为63.8﹪，采用实时荧光RT-PCR方法检测的组织病料样品中阳性率为13.46%，并且所采牛群均未进行BVDV疫苗免疫，说明BVDV在新疆规模化奶牛场中已存在感染。我国内蒙古部分地区的阳性率为62.5%，个别牛场阳性率高达100%［1］。从陕西、甘肃、宁夏、青海和四川五省（区）部分地区的黄牛群、牦牛群采集血清，用细胞中和试验检测牛病毒性腹泻/黏膜病（BVD-MD）抗体，结果黄牛群BVD-MD阳性检出率为46.15%，牦牛群BVD-MD阳性检出率为30.08%［2］。

（2）此次检测中牦牛阳性率为38.3%，其生活在天山深处，有机会接触野生动物和家养牛群，但牦牛群和野生动物与家养牛群之间的传播机制尚不明确，有待进一步验证。

（3）在OIE的陆生动物诊断试验和疫苗手册中推荐病料采集耳廓组织作为检测样品进行检测，此次采用实时荧光RT-PCR的方法在发病犊牛的耳组织未检测到BVDV阳性样品，一种可能是确实耳廓样品中不含有检测病毒，另外一种可能是采集时机不是带毒时间区段，再有一种可能是耳廓的核酸提取有问题，需进一步验证。

（4）BVDV感染牛后引起患畜的持续性感染，产生免疫抑制或免疫耐受现象，而且很少出现临床症状。多数动物外观健康但生产性能下降，这些外观健康的持续性感染动物在传播中具有重要作用。因此，及时对发病动物进行隔离或者淘汰，避免相互感染传播。对感染率高的牛群，可通过疫苗免疫的方法降低发病率，同时保持环境卫生和消毒工作，减少有害致病菌的滋生。

［1］申之义，关平原，李平安等内蒙古地区牛病毒性腹泻-粘膜病流行病学调查.中国兽医杂志，1995，21（8）：5-6.

［2］高双娣，邱昌庆，周继章等西北和西南五省（区）部分地区黄牛牦牛牛病毒性腹泻/粘膜病血清学监测.中国兽医科技，1999，29（7）：17-18.

兵团重点领域科技攻关计划项目—集约化奶牛场奶牛繁殖障碍类传染病流行病学调查与防控技术研究（2013BA004）。