杜仲茶对兔血清SOD和G-SH的活性影响

2016-09-20郑海燕

中国畜牧兽医文摘 2016年8期

关键词：歧化酶超氧化物杜仲

郑海燕

（开州区临江畜牧站，重庆 405400）

杜仲茶对兔血清SOD和G-SH的活性影响

郑海燕

（开州区临江畜牧站，重庆 405400）

通过对兔血清中超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱苷肽（G-SH）活性的影响研究。表明杜仲茶能显著提高兔血清中超氧化物歧化酶（SOD）和增加谷胱苷肽（G-SH）活性，对防止衰老、预防和缓解老年疾病症状具有作用。这对杜仲资源的开发有着重要意义！

杜仲茶 SOD G-SH 活性

1 前言

杜仲（Eucommia ulmoides Oliv）属杜仲科，落叶乔木，是我国传统的一种名贵中药材。据《本草纲目》中记载，杜仲具有补肝、肾、强筋骨、降压、抗衰老、益腰膝之功效。长期以来，人们都以杜仲皮入药，但是皮的来源数量有限，剥皮也对杜仲树造成伤害，对树木生长影响极大，由于皮不能持续性，产量远远不能满足临床需要。近年来的研究表明，杜仲叶与皮具有相似的化学成分和药理作用，叶可代皮供药用，这为杜仲开发拓展了新的渠道。为充分利用荣昌丰富的杜仲资源，我们开发了杜仲叶和茶叶炒制的杜仲茶，本课题以兔为试验动物，研究杜仲茶对血清超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱苷肽（G-SH）活性的影响，从而证明其消除自由基、防衰老的保健作用，这对杜仲叶开发和利用［5］具有理论和现实意义。

2 材料与方法

2.1 主要药品

SOD试剂盒和G-SH试剂盒：购自南京建成生物工程研究所；冰乙酸、无水乙醇、氯化钠均为分析纯。

2.2 主要仪器

722型分光光度计（上海分析仪器厂）；420恒温水箱（上海分析仪器厂）；离心机（上海精宏实验设备有限公司）；5mL一次性注射器、5mL灭菌离心管等均由生化实验室提供。

2.3 杜仲茶的制备

杜仲叶采自荣昌县直升镇道观村5组，茶叶鲜叶由荣昌兴荣茶叶有限公司提供。按杜仲叶：茶叶1：9的比例炒制。

称取杜仲茶叶50g，分别用1000、500、500ml 85℃的蒸馏水分三次提取，每次30min纱布过滤，合并滤液，冰箱冷藏备用，当日用完。

2.4 试验动物和分组

2.4.1 试验动物

选成年新西兰大白兔18只，体重1500～2000g，雌雄各半，由荣昌安富荣华兔场提供。

2.4.2 分组方法

18只家兔，采用随机分组法分为3组，每组6只。第一组：对照组，自由采食兔颗粒饲料，自由饮水；第二组：自由饮用组，自由采食兔颗粒料，自由饮用杜仲茶提取液。第三组：灌服组，自由采食颗粒料，每天每只兔灌服杜仲提取液50ml。

2.4.3 兔子采血

预饲5d，饮用后每隔5d耳静脉采血一次，连续采血5次，自配肝素作抗凝剂，离心分离血清，测定SOD和G-SH的含量。

2.5 血清中超氧化物歧化酶（SOD）和还原性谷胱甘肽（G-SH）活性测定方法

2.5.1 血清中超氧化物歧化酶（SOD）活性测定

依南京建成生物工程研究所提供SOD试剂盒配制方法见表1。

表1　SOD试剂盒配制方法

混匀，室温放置10min，于波长550nm处，1cm光径比色环，蒸馏水调零，比色。

SOD活力（U/ml）=（对照管吸光度-测定管吸光度）/对照管吸光度 ÷50%×反应体系的稀释倍数×样品测试前的稀释倍数

2.5.2 血清谷胱苷肽（G-SH）活性测定方法

依南京建成生物工程研究所提供G-SH试剂盒配制方法见表2。

表2　G-SH试剂盒配制方法

混匀，静置5min，420nm处，1cm光径，蒸馏水调零比色，测各管OD值。

G-SH含量（gG-SH/L）= 测定管吸光度 /（标准管吸光度-空白管吸光度）×准管浓度（20μmol/L）×G-SH分子量（307）×稀释倍数

2.6 数据处理

应用SPSSⅡ软件对SOD和G-SH的活性进行显著性t检验，比较组间差异性。

3 试验结果

3.1 杜仲茶对兔SOD活性的影响

杜仲茶对兔SOD活性的影响，见表3所示，和对照组比较，自由饮用组和灌服组在试验十天内其兔血清SOD活性差异不显著，但可以看出试验组是逐步升高，当试验十五日后，自由饮服和灌服组都和对照差异显著，说明杜仲茶提取液显著地提高了兔血清SOD活性，20日后SOD活性与组间内比较，兔血清SOD活性差异不显著，说明SOD活性的增加是有一定的限度，在20日升到最高。

虽然自由饮服组和灌服组其SOD活性没有多大差异，但是灌服组开初活性的增长要高些，这和我们试验中我们观察到兔子在自由饮服开始时，不习惯茶的苦味，饮的太少有关。

3.2 杜仲茶对兔子G-SH活性影响

杜仲茶对兔G-SH活性的影响，见表4所示，从表4结果看出，杜仲茶对G-SH的影响，自由饮用组和灌服组都不能显著地使G-SH的活性增加，自由饮用组和灌服组内也变化不明显。但我们可以从试验的结果来看，对G-SH活性的改善是显而易见的，增加不显著可能与我们试验的时间太短有关。

表3　杜仲茶对SOD活性的影响

表4　杜仲茶对G-SH活性的影响

4 分析与讨论

人休细胞衰老死亡主要原因，是在于细胞内氧化还原产生超氧阴离子自由基（O2.-）、羟自由基和过氧化氢等，降低了血液及组织中SOD和G-SH活性，提高脂质过氧化物水平。也已证明，过氧化损伤也是心脏毒性的主要原因。现已证明超氧物歧化酶（SOD）是生物内重要的氧自由基清除剂，随着年龄的增加其活性逐步下降，检查老年人高血压、冠心病、肺心病、糖尿病、自身免疫性疾病及恶性肿瘤患者的SOD值，均与正常老年值有极显著差异。G-SH也是体还原体系中重要的组成部分，它和保护细胞通透性，防止水分的流失，以及重金属离子的解毒都起着重要作用。

通过试验看出，杜仲茶对于促进血液中SOD的活性十分明显，G-SH的活性也有增加的现象，表明了长期饮用杜仲茶具有保护细胞膜完整性，促进人体皮肤、骨骼和肌肉中蛋白质胶原合成和分解，促进代谢，预防衰老具有重要的保健作用。对一些老年性疾病的缓解也有一定的效果。此试验结果也验证了美国宇航局将杜仲叶饮料作为宇航员饮品的作用。

在此次试验中，由于时间的关系，没有说明是否长期饮用杜仲茶对G-SH的生成具有诱导作用，这还待以后研究。