急性脑梗死患者神经功能缺损与血清PON-1和ox-LDL水平的相关性研究

黄廷富　何永利　潘小平



急性脑梗死患者神经功能缺损与血清PON-1和ox-LDL水平的相关性研究

黄廷富何永利潘小平

目的检测急性脑梗死患者血清对氧磷酶-1 ( paraoxonase 1,PON-1)和氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)水平，分析急性脑梗死患者神经功能缺损与血清PON-1和ox-LDL水平的相关性。方法根据第四届全国脑血管病会议制订的诊断标准,选择符合条件的急性脑梗死患者78例、非脑梗死对照组52例。双抗体夹心ELISA法测定ox-LDL血清水平，采用乙酸苯酯法测定血清PON-1水平，所有急性脑梗死患者进行NIHSS评分和Glasgow昏迷评分。结果与非脑梗死对照组比较，脑梗死患者在性别、平均年龄和Glasgow昏迷评分上没有统计学意义，在危险因子上具有显著差别，脑梗死患者ox-LDL 血清水平均显著高于对照组，PON-1血清水平均显著低于对照组。脑梗死患者NIHSS评分分数随着ox-LDL血清水平的增高而增加，随着PON-1血清水平的降低而增高。脑梗死患者Glasgow评分分数随着ox-LDL血清水平的增高而降低，随着PON-1血清水平的增高而增高。结论在急性脑梗死患者中血清PON-1和ox-LDL水平和神经功能缺损有着密切的关系。ox-LDL血清水平的越高，神经功能缺损就越重，相反PON-1血清水平的越低，神经功能缺损就越重。

急性脑梗死神经功能缺损对氧磷酶-1 氧化型低密度脂蛋白

根据中国脑卒中学会10月25日发布的中国脑卒中流行报告，目前，我国每年死于脑血管病的患者约130万，脑卒中已经成为我国居民的第一位死亡原因。其中缺血性脑梗死是最常见的重大慢性疾病。脑血管病以其较高发病率、较高复发率和较高致残率的特点成为严重阻碍我国社会经济发展的重大疾病，随着我国人口老龄化不断加剧，这一疾病负担日趋严重。急性缺血性脑卒中的处理应强调早期诊断、早期治疗、早期康复和早期预防再发。因此，通过有效干预急性缺血性中风的风险因素是防止脑梗死发生的重要措施。

急性脑梗死通常依靠体格检查、CT扫描和核磁共振扫描来诊断。急性脑梗死的早期阶段CT扫描的特异性和灵敏度较低，CT和MRI扫描在许多基层医院没有，这些常规诊断会错过最早期的诊断和延迟治疗。因此，血清生物标志物可能用于急性脑梗死的早期诊断，排除其他相似中风的疾病，有利于急性脑梗死的及时有效的治疗。

氧化应激是导致动脉粥样硬化斑块形成和破裂的重要病理生理过程，是引起急性脑梗死的重要病理学基础。氧化应激生物学标记物PON-1和ox-LDL可能有助于急性脑梗死早期的诊治，高ox-LDL和低PON-1生物活性可能是相辅相成的脑梗死危险因素，可以间接反应脑梗死脑损伤程度和病程的演进[1,2]。我们以期评估急性脑梗死患者血清PON-1和ox-LDL水平与神经功能缺损的关系。确定检测血清PON-1和ox-LDL水平能否可以作为评估急性脑梗死诊治的有效依据。

1　对象与方法

1.1研究对象

根据第四届全国脑血管病会议制订的诊断标准,选择符合条件的急性脑梗死患者78例(2011年10月～2014年1月)。实验分为2组：急性脑梗死组(CI组)(78例)、非脑梗死对照组(N组)(52例)。非脑梗死对照组：来自我院体检中心自愿者(2012年8月～2014年2月)。急性脑梗死患者：男48例，女30例；年龄32～89岁,平均年龄(68.6±7.9)岁。非脑梗死对照组：男36例，女16例，年龄30～81岁，平均年龄(65.7±8.3)岁。急性脑梗死患者病例选择符合以下标准：(1)发病时间在24 h以内；(2)既往无脑卒中病史；(3)所有脑卒中的患者都经头颅CT或核磁共振检查明确诊为急性脑梗死；(4)入院后24 h完成美国国立卫生研究院卒中量表(National Institute of Health Stroke Scale,NIHSS)评分。排除脑外伤、中毒、癫痫后状态、瘤卒中、高血压脑病、低血糖昏迷、 高血糖昏迷、 脑部炎症以及躯体重要脏器功能严重障碍引起的脑部病变。

临床评估：急性缺血性中风患者进行体格检查、神经系统检查、常规实验室检测、Glasgow昏迷评分和NIHSS评分。Glasgow昏迷评分测定对照组的患者，但对照组的患者没有进行NIHSS评分。根据Glasgow昏迷评分分数把受损的意识水平分为轻微受损(>14分)、中度受损(8～14分)和重度受损(3～7分)。根据NIHSS评分，神经功能缺损分为轻中重度：2～4分为轻度、5～20为中度、20分以上为重度[3]。

1.2观察指标

分别抽取患者清晨空腹肘静脉血,以检测血清PON-1和ox-LDL，以3000 r/min离心5 min，提取血清放置-80 ℃冰箱保存，用同一批号试剂测定。双抗体夹心酶联免疫法测定血清ox-LDL水平 (北京博奥森生物科技有限公司)，乙酸苯酯法测定血清PON-1水平(北京达科为生物技术有限公司提供)，常规生物化学法测相关指标。实验方法严格按照试剂说明书进行。

根据血清PON-1水平最低值(103.2 U/L)和最高值(316.8 U/L)，分为低(103.2～185.9 U/L)、中(186～258.9 U/L)和高(259～316.8 U/L)三个等级。根据正常对照组ox-LDL最低水平值(42.5 mg/L)、脑梗死患者ox-LDL最高水平值(208.1 mg/L)，分为低(42.5～82.9 mg/L)、中(83～126.9 mg/L)和高(127～208.1 mg/L)三个等级，每个等级26例。

1.3统计学处理

2　结　果

2.1临床资料分析

与非脑梗死对照组比较，脑梗死患者在性别、平均年龄和Glasgow昏迷评分上没有明显差异，在危险因子(高血压病、糖尿病、高脂血症、心脏病、TIA、复发脑卒中)上具有显著差异，脑梗死患者ox-LDL血清水平均显著高于对照组，PON-1血清水平均显著低于对照组(表1)。

表1　脑梗死患者和非脑梗死患者的临床资料分析

2.2脑梗死患者NIHSS评分与PON-1和ox-LDL血清水平的关系

脑梗死患者NIHSS评分分数随着ox-LDL血清水平的增高而增加，随着PON-1血清水平的降低而增加；NIHSS分数与ox-LDL血清水平成正相关(R=0.462,P<0.001)，与PON-1血清水平成负相关(R=-0.369,P<0.001)(表2)。

表2　脑梗死患者NIHSS分数与PON-1和ox-LDL血清水平的关系

2.3脑梗死患者Glasgow评分与PON-1和ox-LDL血清水平的关系

脑梗死患者Glasgow评分分数随着ox-LDL血清水平的增高而降低，PON-1血清水平的增高而增加；Glasgow分数与ox-LDL血清水平成负相关(R=-0.741,P<0.001)，与PON-1血清水平成正相关(R=0.581,P<0.001)(表3)。

表3　脑梗死患者Glasgow分数与PON-1和ox-LDL血清水平的关系

2.4脑梗死患者PON-1血清水平与NIHSS和Glasgow分数关系的分析

脑梗死患者PON-1血清水平随着Glasgow评分分数的增高而增高，随着NIHSS分数的增高而降低；PON-1血清水平与NIHSS分数成负相关(R=-0.632,P<0.001)，与Glasgow评分分数成正相关(R=0.573,P<0.001)(表4)。

2.5脑梗死患者ox-LDL血清水平与NIHSS和Glasgow分数关系的分析

脑梗死患者ox-LDL血清水平随着NIHSS分数的增高而增高，随着Glasgow分数的增高而降低；ox-LDL血清水平与NIHSS分数成正相关(R=0.724,P<0.001)，与Glasgow分数成负相关(R=-0.601,P<0.001)(表5)。

表4　脑梗死患者PON-1血清水平与NIHSS和Glasgow分数的关系

表5　脑梗死患者ox-LDL血清水平与NIHSS和Glasgow分数的关系

3　讨　论

氧化应激参与了急性缺血性脑梗死的病理生理过程，在缺血性脑梗死发病机制中的作用已是国内外学术界公认的事实。氧化应激诱发的一系列的炎症级联反应，会更进一步加重脑组织的损伤[4-5]。大量的研究资料表明PON-1和ox-LDL是缺血性脑卒中的生物学标志物，近年来的研究也表明血清PON-1和ox-LDL活性与冠心病、心肌梗塞、糖尿病等动脉硬化性相关疾病的发病机制有关[6-7]。本研究的目的在于探讨血清对氧磷PON-1和ox-LDL酶活性与急性脑梗死之间的关系。所以，检测血清PON-1和ox-LDL生物学标记物可能有助于预测颈动脉动脉粥样硬化和急性脑梗死。本研究的目的是评估血清PON-1和ox-LDL水平在急性脑梗死患者和神经功能缺损的关系，确定检测血清PON-1和ox-LDL水平能否可以作为评估诊治急性脑梗死有效性的依据。

PON-1是一种与高密度脂蛋白(HDL)相关性酯酶，是HDL的重要组成部分。PON-1是与HDL紧密相连的钙离子依赖型酶蛋白，PON-1通过水解脂质过氧化物发挥抗LDL氧化的作用[8]。PON-1可以抑制低密度脂蛋白氧化修饰以及抑制巨噬细胞转化为泡沫细胞，从而具有抗动脉粥样硬化保护作用[4,9]。本研究结果表明，与非脑梗死对照组比较，急性脑梗死患者ox-LDL血清水平均显著高于对照组，PON-1血清水平均显著低于对照组，进一步验证了氧化应激参与了急性脑梗死的发病机制过程。通过对脑梗死患者进行NIHSS和Glasgow评分，分析与PON-1和ox-LDL血清水平的关系，发现脑梗死患者NIHSS评分分数随着ox-LDL血清水平的增高而增加，NIHSS分数与ox-LDL血清水平成正比关系；脑梗死患者Glasgow评分分数随着ox-LDL血清水平的增高而降低，Glasgow分数与ox-LDL血清水平成反比关系；NIHSS评分分数随着PON-1血清水平的增高而降低，NIHSS分数与PON-1血清水平成反比关系；脑梗死患者Glasgow评分分数随着PON-1血清水平的增高而增高，Glasgow分数与PON-1血清水平成正比关系。这与以往文献报道是一致的，再次证明了氧化应激标志物PON-1和ox-LDL与急性脑梗死神经功能损伤的发生过程有着密切联系。

氧化应激是动脉粥样硬化相关性缺血性事件的重要病理生理机制。尤其在脑卒中病理生理学、诊断和预后上，对缺血性脑血管病生物标志物已进行了大量研究。因此，许多的生物标志物，如D-二聚体、IL-6、IL-18、S100B、hs-CRP等已被评估为检测急性缺血性中风较为实用的生物学指标，但仍没有被全球公认的生物学标志物[10-11]。本研究证明了氧化应激标志物PON-1和ox-LDL与急性脑梗死神经功能损伤的发生过程有着密切联系。所以，PON-1和ox-LDL血清生物学标志物可能对那些被怀疑有急性缺血性脑卒中患者是有用的，尤其是在急诊急救时。在紧急情况下特定的生物标志物可以检测中风的早期阶段更有助于准确的诊断，特别是在没有CT或MRI检测情况下。

本研究样本量小，特别是根据脑卒中严重程度中风患者分为亚组时。脑卒中的严重程度是通过体检和神经量表来评估的，发病率和病死率的长期随访未执行，PON-1和ox-LDL血清水平与发病率和病死率也没有评估。所以，目前的研究结果为今后的研究提供更多的理由，通过检测PON-1和ox-LDL血清水平来评价急性脑梗死神经损伤的程度，并给治疗上以期指导。

总之，本研究发现血清PON-1和ox-LDL水平与急性脑梗死的神经损伤严重程度有关。因此，对于急性脑梗死的诊断和治疗，PON-1和ox-LDL可能是有效的生物标志物。

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(2016-02-19收稿2016-04-10修回)

Correlation analysis between neurological deficit and serum levels of PON-1 and ox-LDL in the patients of acute cerebral infarction

HuangTingfu,HeYongli,PanXiaoping.

TheThirdDepartmentofInternalMedicine,ChongqingOccupationalDiseasePreventionandTreatmentHospital,Chongqing400060

ObjectiveTo analyse the relationship between neurological dysfunction in acute cerebral infarction and serum levels of PON-1 and ox-LDL,and evaluate the role of PON-1 and ox-LDL in the pathogenesis of acute cerebral infarction.Methods78 cases of patients with acute cerebral infarction were collected according to the fourth Chinese national diagnostic criteria of cerebrovascular diseases.The subjects were divided into two groups:acute cerebral infarction group (78 cases),control group without acute cerebral infarction (52 cases).Ox-LDL was measured by enzyme linked immunosorbent assay; phenyl acetate method is used to determine serum levels of PON-1,all of the patients with acute cerebral infarction tested by NIHSS score,Glasgow coma scale and CT and MRI diagnosis.ResultsThere is no statistical significance in average age,gender and Glasgow coma scale between control group and cerebral infarction one.It has significant difference on risk factors and PON-1 and ox-LDL levels.In patients with cerebral infarction NIHSS score increased with serum levels of ox-LDL while Glasgow score negatively correlated with serum levels of ox-LDL.The PON-1 serum level of cerebral infarction patients positively correlated with Glasgow score and negatively correlated with the NIHSS score.ConclusionThe serum PON-1 and ox-LDL levels are closely related with neurological deficit in the patients of acute cerebral infarction.Serum levels of PON-1 and ox-LDL can indirectly reflect the acute cerebral infarction neurological symptoms.The serum levels of PON-1 and ox-LDL may be used to evaluate diagnosis and treatment of acute cerebral infarction effectively.

Acute cerebral infarctionNeurological deficitParaoxonase 1Oxidized low density lipoprotein

400060重庆市职业病防治院 重庆市第六人民医院内三科[黄廷富何永利(通信作者)]，放射科(潘小平)

R

A

1007-0478(2016)04-0250-05

10.3969/j.issn.1007-0478.2016.04.009