GLUT4和脂联素在大鼠非酒精性脂肪性肝病中的作用

郭威，李松，郭健丽，宋亚邛，孙阳阳，张宏佳黑龙江省齐齐哈尔医学院附属医院消化科，黑龙江齐齐哈尔　161021

GLUT4和脂联素在大鼠非酒精性脂肪性肝病中的作用

郭威，李松，郭健丽，宋亚邛，孙阳阳，张宏佳
黑龙江省齐齐哈尔医学院附属医院消化科，黑龙江齐齐哈尔161021

目的 探讨GLUT4和脂联素在大鼠非酒精性脂肪性肝病中的作用。方法2015年6月—2015年11月选用48只SD大鼠一半雌鼠一半雄鼠，雌鼠雄鼠随机分为对照组与实验组均为24只。对照组为正常，实验组为高脂饮食组。每组又分为3、6、9、12周4组按时间点处死各组大鼠，测定肝组织中GLUT4、血清中的脂联素、空腹血糖。结果 肝组织中GLUT4、血清中的脂联素在脂肪性肝病的形成过程中含量不断减少，肝组织中GLUT4的浓度由对照组（3.65±0.08），3、6、9、12周逐渐降低分别为（3.32±0.07）、（3.13±0.11）、（2.96±0.08）、（2.31±0.19）血清中的脂联素由对照组（4.22±0.43），3、6、9、12周逐渐降低分别为（4.18±0.26）、（3.90±0.27）、（3.96±0.21）、（4.07±0.24）。而且与肝脂肪变程度呈负相关，血糖呈正相关。结论 实验组肝组织中GLUT4、血清中的脂联素相比对照组明显减少，表明CLUT4与脂联素在非酒精性脂肪性肝病中有一定作用。

GLUT4；脂联素；大鼠；非酒精性脂肪性肝病

［Abstract］Objective To investigate the role of GLUT4 and adiponectin in nonalcoholic fatty liver disease.Methods 48 SD rats with half male half female，male female rats were randomly divided into control group and experimental group were 24.Normal control group，the experimental group was high-fat diet group.Each group was divided into 3 weeks，6 weeks，9 weeks，12 Thursday set point in time the rats were sacrificed to measure liver tissue GLUT4，serum adiponectin，fasting blood sugar.Results In liver tissue in GLUT4 and serum adiponectin in fatty liver formation content decreased constantly，concentration of GLUT4 in liver tissue from control group 3.65±0.08，3 weeks，6 weeks，9 weeks and 12 weeks decreased gradually were（3.32±0.07），（0.11±3.13），（2.96±0.08），（2.31±0.19）serum adiponectin comprised the control group（4.22±0.43），3 weeks，6 weeks，9 weeks and 12 weeks decreased gradually （4.18±0.26），（3.90±0.27），（3.96±0.21），（4.07±0.24），respectively.It was negatively correlated with the degree of hepatic steatosis，and the blood glucose was positively correlated.Conclusion The hepatic tissue GLUT4，serum adiponectin was significantly reduced compared to the control group，suggesting that adiponectin CLUT4 and have a role in nonalcoholic fatty liver disease.

［Key words］GLUT4；Adiponectin；Non-alcoholic fatty liver disease；Rats

随着非酒精性脂肪性肝病的发病率也越来越高，这种疾病对肝脏的损害是慢性的最终导致不可逆性的损害，有研究表明非酒精性脂肪性肝病的发病与GLUT4和脂联素有关［1-2］。因此在2015年6月—2015 年11月以48只SD大鼠为研究对象制造模型探究GLUT4和脂联素与非酒精性脂肪性肝病的关系，现报道如下。

1　对象与方法

1.1研究对象

选取6周龄，体重200 g左右健康的SD大鼠48只，来源于同一个厂家，大鼠平均体重在（160±18）g，雌雄各半并将其随机分为对照组与实验组，两组基本情况下P＞0.05，差异无统计学意义。其中对照组24只为正常，实验组24只为高脂饮食到实验结束后有严重的非酒精性脂肪肝。对照组喂养正常饲料即可。实验组除食物不同外其它都相同。动物的饲养条件、护理状况、饲料情况等都符合国际上拟定的动物公约。

1.2研究方法

将对照组与实验组的24只大鼠随机分为四组，分别为3、6、9、12周。在对应的时间点将对照组和实验组的大鼠处死。处死前禁食10 h，处死后观察大鼠肝脏病变情况，并检测肝脏中GLUT4的含量、血清脂联素、空腹血糖［3-4］。

大鼠处死后，一人立即取出大鼠肝脏，观察脂肪变程度，并进行称量计算肝指数。在低温下将大鼠肝脏捣碎离心后测CLUT4的含量。另一人取大鼠空腹静脉血5 mL放入离心机2000 r/min离心10 min后去取清液。用免疫学方法ELISA测血清中的脂联素含量。

1.3统计方法

2　结果

在实验结束前两组大鼠均未出现死亡。对照组的肝脏质地柔软、包膜光滑无油腻感，为暗红色。实验组大鼠肝脏与第六周出现明显病变，肝脏表面有黄色改变而且有油腻感。到第12周时肝脏呈槟榔肝，有颗粒外观见表1、2。

表1　各周监测的肝脏脂肪变面积（±s）

表1　各周监测的肝脏脂肪变面积（±s）

分组　对照组　高脂3周　高脂6周　高脂9周 高脂12周脂变面积015.21±2.9835.62±2.7745.69±3.35 65.12±8.13

对照组没有脂变面积，而实验组高脂饮食后出现不同面积的脂变，且P＜0.05，差异有统计学意义。

表2　测量值变化情况（±s）

表2　测量值变化情况（±s）

CLUT4　　空腹血糖　　脂联素对照组高脂3周高脂6周高脂9周高脂12周3.65±0.08 3.32±0.07 3.13±0.11 2.96±0.08 2.31±0.19 4.96±0.21 5.59±0.25 5.61±0.23 5.63±0.15 5.65±0.21 4.22±0.43 4.18±0.26 4.07±0.24 3.96±0.21 3.90±0.27

随着肝脂肪变面积的增加血糖值在增高，CLUT4和脂联素含量在减少。各组P＜0.05，差异有统计学意义。

3　讨论

CLUT4是肝脏的主要糖转运子，将血液中的糖转运到肝细胞里，加速肝糖原合成［3-5］。血液中葡萄糖含量增加刺激胰岛素的分泌，最后造成胰岛素抵抗。脂联素是一种新型分子，它具有抗炎、抗粥样硬化、增强胰岛素敏感性的作用，主要是通过对胰岛素受体的作用改进全身胰岛素抵抗，加强对糖的利用和极低密度脂蛋白的合成在脂肪变的形成过程中脂联素逐渐减少这些作用逐渐降低，加速肝脏脂肪变的形成［7-9］。

此实验用非酒精性脂肪肝的形成过程中测量大鼠的CLUT4和脂联素来确定这两种物质与肝脂肪变形成的关系。由实验结果可知随着脂肪变程度的增加CLUT4和脂联素含量在逐步减少，表明这2种物质在肝脂肪变形成过程中有一定作用。鲍秀琦，朱捷，张晓波的类似实验也有相似的结果，肝组织中GLUT4的浓度由对照组的3.64±0.09逐渐降为12周的2.42± 0.23［10］。其它研究GLUT4和脂联素在大鼠非酒精性脂肪性肝病中的作用的实验也都采取饲养SD大鼠的方法，利用高脂饮食来制造脂肪肝，同时观察大鼠CLUT4的浓度，实验具有相似处。而且我们实验中采用对照组和实验组同时处死进行对照，减少了一些因素造成实验误差，加强了实验的准确性与真实性。

此实验是在非酒精性脂肪肝形成过程中由病情的不断发展来检测肝脏中CLUT4和血清中脂联素的浓度变化，可以具体的呈现这两种物质在非酒精性脂肪性肝病发展过程的逐步变化，让数据跟加具有说服性。综上所述，非酒精性脂肪性肝病形成过程中与CLUT4、脂联素有关。

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The Role of GLUT4 and Adiponectin in Nonalcoholic Fatty Liver Disease

GUO Wei LI Song，GUO Jian-li，SONG Ya-qiong，SUN Yang-yang，ZHANG Hong-jia
Department of digestive diseases，Affiliated Hospital of Qiqihar Medical，Qiqihar，Heilongjiang Province，161021 China

R575.5

A

2096-1782（2016）05-0009-02

郭威（1972.9-），女，黑龙江齐齐哈尔人，硕士，主任医师，研究方向：肝脏代谢障碍及相关研究。

2016-02-24）