PARP-1在膀胱癌侵袭转移中的作用及机制研究

梁其仲，陈　铭，余书广



PARP-1在膀胱癌侵袭转移中的作用及机制研究

梁其仲，陈铭，余书广

目的探讨聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)在膀胱癌侵袭转移过程中的作用及可能机制。方法收集我院手术切除的30例膀胱癌患者组织标本30份、患者癌旁正常组织标本为对照，采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法(S-P)检测PARP-1在膀胱癌及癌旁组织中的表达。结果膀胱癌组织中PARP-1阳性表达率高于癌旁正常组织(P<0.01)；膀胱癌组织有淋巴结转移组织PARP-1阳性表达率高于无淋巴结转移组织(P<0.05)，临床分期Ⅲ～Ⅳ期组织PARP-1阳性表达率高于Ⅰ～Ⅱ期组织(P<0.05)。结论PARP-1在膀胱癌组织中表达明显上调，并且与淋巴结转移及临床分期关系密切，提示可能参与了膀胱癌侵袭转移过程。因此，将PAPR-1抑制剂广泛应用于恶性肿瘤的治疗有望成为抗肿瘤靶治疗的新途径。

PARP-1；膀胱癌；侵袭；转移

膀胱癌是泌尿外科最常见的恶性肿瘤之一，在临床上发病具有逐年升高趋势，膀胱癌死亡率较高，主要是由于早期患者多以为是普通的泌尿系感染未进一步诊治，因此部分患者发展到晚期才被确诊。引起恶性肿瘤的转移机制较为复杂，近年来临床上对恶性肿瘤的研究侧重于基因方面，如能从相关基因方面找到治疗靶点，则可能对早期干预及治疗恶性肿瘤具有重要意义。临床研究发现聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)是一种细胞核酶，与细胞增殖、NDA的重组及修复等均有密切关系[1]，临床研究显示PARP-1在多种恶性肿瘤组织中存在异常表达[2-4]。本研究对膀胱癌组织中的PARP-1表达进行了研究，旨在探讨PARP-1在膀胱癌侵袭转移过程中的作用及可能机制。

1　资料与方法

1.1标本来源收集2014年1月～12月我院手术切除的30例膀胱癌患者组织标本30份，其中男17份、女13份，年龄43～85岁，有淋巴结转移18份、无淋巴结转移12份，病理分期Ⅰ～Ⅱ期9份、Ⅲ～Ⅳ期21份。以30份患者癌旁正常组织标本为对照。本研究方案上报医院伦理委员会批准，患者均签署知情同意书。

1.2方法免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法(S-P法) 检测PARP-1在膀胱癌及癌旁组织中的表达，将组织切片、脱蜡、脱水、阻断、抗原修复、封闭后等处理，借助PARP-1一抗、生物素二抗、过氧化物酶标记的链霉素卵白素工作液为三抗，以DAB染色，观察膀胱癌及癌旁正常组织中PARP-1的表达情况。

1.3判定标准染色细胞数量占视野内细胞的百分比：无染色细胞0分，染色细胞数量占1%～4%、5%～19%、20%～39%、40%～59%、60%～79%、80%～100%时分别记为1分、2分、3分、4分、5分、6分；细胞染色情况及强度：无染色0分，染色为浅黄色为1分、棕黄色为2分、棕褐色为3分。染色细胞百分比评分乘以染色强度评分，总分在0～9分为阴性表达，10～18分为阳性表达[4]。

1.4统计学方法数据采用SPSS 17.0统计学软件进行处理，定性数据采用χ2检验及确切概率法。

2　结　果

2.1膀胱癌组织中与癌旁正常组织中PARP-1的表达见表1。膀胱癌组织中PARP-1阳性表达率为60.00%，癌旁正常组织PARP-1阳性表达率为6.67%，二者比较差异具有统计学意义(χ2=19.20，P<0.01)；膀胱癌组织中PARP-1阳性表达率高于癌旁正常组织。

表1　膀胱癌组织中与癌旁正常组织中PARP-1的表达　[份(%)]

2.2膀胱癌组织有无淋巴结转移及不同临床分期时PARP-1的表达有淋巴结转移的18例患者组织中，PARP-1阳性表达为15份(83.33%)，阴性表达为3份(16.67%)；无淋巴结转移的12例患者组织中，PARP-1阳性表达为3份(25.00%)，阴性表达为9份(75.00%)；有淋巴结转移组织PARP-1阳性表达率高于无淋巴结转移者(P<0.05)。

临床分期为Ⅲ～Ⅳ期的21例患者组织中，PARP-1阳性表达16份(76.19%)，阴性表达5份(23.81%)；临床分期为Ⅰ～Ⅱ期的9例患者组织中，PARP-1阳性表达2份(22.22%)，阴性表达7份(77.78%)；临床分期为Ⅲ～Ⅳ期患者组织中PARP-1阳性表达率高于临床分期为Ⅰ～Ⅱ期的患者(P<0.05)。

3　讨　论

PAPR是一种聚合酶，分为PAPR-1、PAPR-2、PAPR-3等亚型，其中PAPR-1在染色体1的q41-42区，主要生理功能是催化合成细胞内的蛋白酶活化受体(PAR)，可影响目标蛋白的功能、细胞效应等。如DNA发生异常损伤，PAPR-1可通过调节DNA拓朴异构酶等途径保持及修复DNA的完整性。PAPR-1对基因表达及信号传导也有影响，如调节DNA甲基化、引起染色体结构改变等；对细胞存亡也有调节作用，在细胞损害严重时如抑制 PARP-1可为调亡细胞储存能量,阻止细胞坏死阻止，让其转为凋亡而不是修复。

有研究报道显示,PARP-1在肝癌、舌癌、乳腺癌等多种恶性肿瘤中表达均表现为上调[2-4]，并且与疾病病程的发展、侵袭力、血管再生能力等均有关，认为是引起恶性肿瘤发生侵袭及转移的主要影响因素。本研究对膀胱癌与癌旁正常组织中的PARP-1表达进行了研究，尝试探讨其在膀胱癌侵袭转移中的作用及可能机制，结果显示膀胱癌组织中PARP-1阳性表达率为60.00%，明显高于癌旁正常组织阳性表达率的6.67%，提示PARP-1表达上调与膀胱癌发生关系密切；膀胱癌组织有淋巴结转移组织PARP-1阳性表达率为83.33%明显高于无淋巴结转移组织阳性表达率的25.00%，临床分期Ⅲ-Ⅳ期组织PARP-1阳性表达率为76.19%明显高于Ⅰ-Ⅱ期组织阳性表达率的22.22%。提示，PARP-1是与膀胱癌的病情严重程度、侵袭力、淋巴结转移等有关，其具体机制有待后期加大样本量进一步研究。

综上所述，PARP-1在膀胱癌组织中表达明显上调，并且与淋巴结转移及临床分期关系密切，提示可能参与了膀胱癌侵袭转移过程。因此，将PAPR-1抑制剂广泛应用于恶性肿瘤的治疗有望成为抗肿瘤靶治疗的新途径。

[1]田凤艳,顾朝辉,刘玉峰,等.多聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶-1 在乙醇致小鼠脑损伤中的表达及意义[J].中华实验外科杂志,2014,31(4):785-787.

[2]刘彭坤,郝吉庆.PARP-1,P-gp和LRP在肺腺癌中的表达和相关性研究[J].安徽医药,2014,18(5):851-854.

[3]李燕,尉蔚,吕树卿,等.PARP-1 对卵巢癌血管生成的影响[J].山东大学学报(医学版),2014,52(4):97-101.

[4]刘涛,文庆一,乔伟强,等.PARP-1在乳腺癌组织中的表达和临床意义[J].中国妇幼保健,2015,30(24):4220-4222.

(2016-01-19收稿2016-05-20修回)

(本文编辑刘喜元)

527200广东省罗定市中医院外二科

[中国图书资料分类号]R 737.14B

10.16485/j.issn.2095-7858.2016.03.047