皮肤鳞状细胞癌NF-κB p65表达的临床价值

朱文巍 赵梓纲　丁香玉 林碧雯 孟宪芙 李承新解放军总医院皮肤科，北京 1853

皮肤鳞状细胞癌NF-κB p65表达的临床价值

朱文巍 赵梓纲丁香玉 林碧雯 孟宪芙 李承新#
解放军总医院皮肤科，北京 1008530

目的研究NF-κB p65蛋白在皮肤鳞状细胞癌中表达的临床诊断价值。方法选择30例皮肤鳞状细胞癌患者以及10例健康体检者。比较两组患者的NF-κB p65蛋白阳性表达率，分析NF-κB p65蛋白的表达与皮肤鳞状细胞癌患者的临床病理特征之间的关系。结果皮肤鳞状细胞癌患者体内的NF-κB p65蛋白阳性表达率高于正常组织，差异有统计学意义（P＜0.05）。皮肤鳞状细胞癌组织中NF-κB p65蛋白阳性表达率与侵袭深度、分化程度、临床分期、淋巴结转移、远端转移相关，差异有统计学意义（（P＜0.05）；与性别、年龄、肿瘤大小无关，差异无统计学意义（（P＞0.05）。正常皮肤组织鳞状上皮细胞核基本未见p65表达，胞质p65表达阳性；癌前病变中，病变鳞状上皮细胞细胞核见散在p65弱表达，胞质弱阳性；高度恶性鳞状细胞癌组织病变鳞状上皮细胞细胞核可见较多p65表达，胞质呈弥漫性阳性，血管内皮细胞胞核表达，胞质散在弱阳性。结论NF-κB p65蛋白参与皮肤鳞状细胞癌的形成和发展，随患者病情的进展，NF-κB p65蛋白的阳性表达率越高。

NF-κB p65；皮肤鳞状细胞癌；表达；临床价值

Oncol Prog，2016，14（5）

皮肤鳞状细胞癌是起源于表皮或附属器角质形成细胞的一种恶性肿瘤，发生于皮肤或黏膜上，常发生于某些皮肤病或癌前疾病的基础上，或者由各种癌前疾病发展而来，少数也可为原发性［1-2］。核因子kappa B（nuclear factor kappa，NF-κB）是人体内重要的炎性转录因子，可以激活下游炎性因子的表达，从而促进肿瘤细胞的增殖，抑制细胞的凋亡［3］。最常见的NF-κB有p50和p65两个亚单位构成的异源二聚体，前期研究的重点一直放在NF-κB的免疫和炎性反应，最近对其在肿瘤发生、发展中的作用逐渐关注［4］。本分析研究NF-κB p65蛋白在皮肤鳞状细胞癌中表达的临床诊断价值，报道如下。

1　材料与方法

1.1材料

经医院伦理委员会批准，收集2012年1月至2015年6月在解放军总医院皮肤科确诊的30例皮肤鳞状细胞癌患者（观察组）的手术切除标本及10例体检健康者（对照组）的正常皮肤组织。纳入标准：①所有患者均未接受放疗或化疗；②经患者及患者家属同意。排除标准：①合并其他恶性肿瘤的患者；②拒绝接受研究的患者。30例皮肤鳞状细胞癌患者中男性19例，女性11例，平均年龄（52.81± 12.16）岁，10名健康体检人群中男性6例，女性4例，平均年龄（53.82±11.27）岁。

1.2检测方法

收集患者手术切除标本及健康人群的正常皮肤组织，所有标本在采集离体后10 min内放置于冻存管内，在-80℃的低温冰箱内保存。免疫组织化学标本为本院保存良好的石蜡包埋组织块。免疫组化染色：采用免疫组化SP染色法，以0.01 mol/L柠檬酸进行热修复5 min，山羊血清封闭后，滴加一抗（抗NF-κB p65），37℃孵育1 h，严格按照说明书完成检验。胞质和（或）胞核中出现明显的黄色或黄褐色颗粒视为阳性［3］：阳性细胞＜10%为0分；10%～40%为1分；41%～70%为2分；＞70%为3分。染色强度评分标准［3］：不着色0分；黄色1分；棕黄色2分；黄褐色3分。二者评分相加后计为总分：0～1分为（－）；2分为（+）；3～4分为（++）；5～6分为（+++）。

1.3统计学方法

采用SPSS17.0统计软件进行数据分析和处理，采用Fisher精确概率法，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2　结果

2.1 NF-κB p65在两组样本组织中的表达

正常皮肤组织鳞状上皮细胞核基本未见p65表达，胞质p65表达阳性；高度恶性鳞状细胞癌组织病变鳞状上皮细胞胞核可见较多p65表达，胞质呈弥漫性阳性，血管内皮细胞胞核表达，胞质散在弱阳性（图1）。

图1　NF-NF-κ B pB p6565在正常皮肤组织和鳞状细胞癌组织的表达

2.2 NF-κB p65蛋白在不同组织中表达比较

皮肤鳞状细胞癌患者体内的NF-κB p65蛋白阳性表达率为66.67%，高于正常组织的20.00%，差异有统计学意义（P＜0.05）。

2.3 NF-κB p65蛋白表达与临床病理特征的关系

皮肤鳞状细胞癌组织中NF-κB p65蛋白阳性表达率与浸润深度、分化程度、临床分期、淋巴结转移、远端转移相关（P＜0.05），而与性别、年龄、肿瘤大小无关（P＞0.05）。（表1）

表1　NF-κB p65蛋白表达与临床特征的相关性分析

3　讨论

皮肤鳞状细胞癌起源于表皮或附属器角质形成细胞的一种恶性肿瘤，发病率与环境、遗传等多种因素有关，其发病率和病死率相对较高，早期诊断和治疗对皮肤鳞状细胞癌显得尤为重要［5］。NF-κB属于多功能、多向性的核转录因子，可以调控细胞增殖、凋亡的相关基因，与肿瘤的发生和发展关系密切［6］。皮肤鳞状细胞癌、胃癌、乳腺癌等多种肿瘤组织中均存在NF-κB信号通路激活异常的状况，被激活的NF-κB发生核异位，下游靶基因转录增加，导致部分细胞因子和炎性因子的转录活性增强，加速肿瘤的发生、增殖和侵袭［7-9］。

本次研究结果显示，皮肤鳞状细胞癌患者体内的NF-κB p65蛋白阳性表达率高于正常组织，差异有统计学意义（P＜0.05）。正常皮肤组织鳞状上皮细胞核未见p65表达，胞质阳性；癌前病变中，病变鳞状上皮细胞细胞核见散在p65弱表达，胞质弱阳性；高度恶性鳞状细胞癌组织病变鳞状上皮细胞细胞核可见较多p65表达，胞质呈弥漫性阳性，血管内皮细胞胞核表达，胞质散在弱阳性。NF-κB是一种可以调控细胞增殖和炎性的核转录因子，参与多种疾病、肿瘤的细胞因子、生长因子、细胞黏附因子等基因的调控［10］。NF-κB的转录和表达受多种因素的影响，导致促进细胞转化的靶基因转录增强，作用于肿瘤细胞［3］。NF-κB因子的持续活化可以作为多种肿瘤的标志。细胞凋亡是由基因控制的自主性有序死亡，是生理性细胞死亡过程，对于机体的正常生长具有重要的意义。肿瘤细胞主要通过影响外源性和内源性机制来逃避“死亡”，成为“不死”细胞，即癌细胞。NF-κB最初是在B淋巴细胞胞核中检测出来的，是可以与免疫球蛋白的轻链基因增强子κB序列特异性结合的核蛋白因子，p50/p65异二聚体是细胞质中最常见的两种形式。当肿瘤坏死因子、IL-1等多种物质刺激NF-κB的结合位点时，NF-κB的抑制物IκB就会出现磷酸化，发生解离，NF-κB二聚体激活后进入细胞核内，刺激基因进行表达。NF-κB的组成型激活与致瘤性转化有关，多种恶性肿瘤均与NF-κB的激活相关，NF-κB可以通过调控与细胞生长增殖、抗凋亡、血管生成和转移的相关基因表达有关，促进了恶性肿瘤的发展。本研究结果显示，皮肤鳞状细胞癌组织中NF-κB p65蛋白阳性表达率与浸润深度、分化程度、临床分期、淋巴结转移、远端转移相关，差异有统计学意义（P＜0.05）；而与性别、年龄、肿瘤大小无关，差异无统计学意义（P＞0.05），说明NF-κBp65在癌症的发生和转移中起到重要的作用。

综上所述，NF-κB p65蛋白参与皮肤鳞状细胞癌的形成和发展，患者病情越重，NF-κB p65蛋白阳性表达率越高。

［1］施佳音，夏钰弘.NF-κB、Ki-67和E-cad在皮肤鳞状细胞癌和基底细胞癌的表达及相关分析［J］.山东医药，2011，51 （1）：50-51.

［2］王伟，翟晓梅，刘林蟠.核因子-κB p65在皮肤鳞状细胞癌中的表达及意义［J］.中华实验外科杂志，2015，32（9）：2231-2233.

［3］李慎秋，谢春丽，蒋思，等.皮肤鳞状细胞癌中Axl、NF-κB的表达及意义［J］.华中科技大学学报（医学版），2013，42（5）：569-572.

［4］秦阳，王玲，吕晓娟.NF-κB p50、NF-κB p65在甲状腺癌中的表达及意义［J］.中国生化药物杂志，2014，34（8）：49-51.

［5］王瑞，夏永华.皮肤鳞状细胞癌组织中Notch1和NF-κB p65的表达及意义［J］.中国皮肤性病学杂志，2013，27（1）：16-18；28.

［6］Gong H，Zuliani P，Komuravelli A，et al.Analysis and verification of the HMGBI signaling pathway［J］.BMC Bioinformatics，2010，11（7）：10-11.

［7］陈军，覃思繁，林思彤，等.胃癌组织中c-FLIP、NF-κB p65的表达变化及意义［J］.山东医药，2013，53（3）：22-24.

［8］Jiang W，Wang Z，Li X，et al.Reduced high-mobility group box 1 expression induce by RNA interference inhibits the bioactivity of hepatocellular carcinoma cell line HCCLM3 ［J］.Dig Dis Sei，2012，57：92-98.

［9］那磊，吴斌.NF-κBp65和HIF-1α在肾透明细胞癌中的表达及意义［J］.中国医科大学学报，2014，43（6）：519-522.

［10］周巧，黄杰安，刘宝玉，等.NIBP和NF-κB p65在胃癌中的表达及其临床意义［J］.广西医学，2014，36（5）：585-588.

The clinical value of NF-κB p65 expression in cutaneous squamous celll carciinnoommaa

ZHU Wen-wei ZHAO Zi-gang DING Xiang-yu LIN Bi-wen MENG Xian-fu LI Cheng-xin#
Department of Dermatology，Chinese PLAGeneral Hospital，Beijing 100853，China

ObjectivectiveTo study the clinical value of NF-κB p65 protein in cutaneous squamous cell carcinoma （cSCC）.Methodethod30 cases of cSCC patients and 10 cases of healthy adults were included in this study.The positive expression rate of NF-κB p65 protein and mRNA in the two groups were compared，and the correlation between the expression of NF-κB p65 protein and the clinicopathological features of cSCC was investigated.ResultesultThe positive expression rate of NF-κB p65 protein and mRNA in cSCC patients was significantly higher than that in normal tissues（P＜0.05），and was correlated with the depth of invasion，differentiation，clinical stage，lymph node metastasis and distant metastasis （P＜0.05），but it was irrelevant with gender，age and tumor size（P＞0.05）.In squamous cells of normal tissues，NF-κB p65 expression was barely found in the nuclei，while positive expression was detected in the cytoplasm.In squamous cells of precancerous tissues，p65 expression was sporadic and weak in nuclei，and weakly positive in cytoplasm；In squamous cells cancer tissues，p65 expression was common in nuclei，diffusely positive in cytoplasm，while it was positive in nuclei，and sporadically and weakly positive in cytoplasm of vascular epithelial cells.ConclusionusionNF-κB p65 protein is involved in the formation and development of cutaneous squamous cell carcinoma，and the positive expression rate of NF-κB p65 elevates as the disease progresses.

rdsNF-κB p65；cutaneous squamous cell carcinoma；expression；clinical value

R739. 5

A

10.11877/j.issn.1672-1535.2016.14.05.27

（corresponding author），邮箱：chengxinderm@163.com

2016-01-04）