大面积脑梗死患者血浆Ghrelin的表达及其与同型半胱氨酸相关性的研究*

杨艳艳　陈德哲　赵　敏　陈研修　杨霞峰

(1.泰山医学院,山东泰安　271016；2.泰山医学院附属聊城医院神经内科,山东 聊城　252000)



大面积脑梗死患者血浆Ghrelin的表达及其与同型半胱氨酸相关性的研究*

杨艳艳1陈德哲2赵敏2陈研修2杨霞峰2

(1.泰山医学院,山东泰安271016；2.泰山医学院附属聊城医院神经内科,山东 聊城252000)

目的研究大面积脑梗死患者不同时期血浆Ghrelin水平的表达及其与同型半胱氨酸(Hcy)的相关性。方法选取42例大面积脑梗死患者(A组)分别于入院后第1、7、14天检测血浆Ghrelin及Hcy水平。另选36例健康体检者作为对照(B组)，检测血浆Ghrelin及Hcy水平。结果1)A组入院后第1、7天的血浆Ghrelin水平较第14天及B组明显下降(P<0.05)；第7天较第1天明显下降(P<0.05)；第14天与B组间Ghrelin水平的差异无统计学意义(P>0.05)。2)A组入院后第14天、B组中正常Hcy组的Ghrelin水平低于高Hcy组，两组中血浆Ghrelin水平与Hcy水平呈正相关(r=0.420，P<0.05； r=0.591，P<0.05)。结论1)大面积脑梗死患者血浆Ghrelin水平随病情变化而呈动态变化；2)Ghrelin可能对Hcy引起的血管内膜损伤有保护作用，减缓动脉粥样硬化的发生、发展。

大面积脑梗死； Ghrelin；同型半胱氨酸;相关性

Ghrelin于1999年由Kojinm等[1]报道以后，国内外进行了诸多研究。发现其对血糖、血脂、血压、动脉粥样硬化等脑血管病的危险因素及脑缺血模型均具有调控作用。因此，研究人脑缺血后血浆Ghrelin水平的表达及其变化规律对缺血性脑血管病的治疗及预防有重要意义。高Hcy血症作为脑血管病的独立危险因素，Hcy与Ghrelin之间的相互关系尚未见报道。本研究选取了42例大面积脑梗死患者和36例对照，旨在探讨大面积脑梗死患者血浆Ghrelin水平的变化规律及其与Hcy之间是否存在某种相互关系，以便更好的认识Ghrelin在缺血性脑血管病方面的影响，也有助于Ghrelin将来的临床应用。

1　对象与方法

1.1研究对象大面积脑梗死患者(A组)42例，其中男26例，女16例，平均年龄(58.0±10.9)岁，均来自我院神经内科住院病人，其诊断均符合全国第四届脑血管病会议缺血性脑血管病的诊断标准[2]，并行颅脑CT或/和MRI检查证实，梗死灶直径>4 cm，要求首次发病，在24 h内入院。对照组(B组)36例，其中男20例，女16例，平均年龄(59.3±11.2)岁，均为同期在我院健康查体者。两组入选者均排除严重的心肝肾功能异常、半年内体重明显变化、饮食行为异常、胃肠道功能异常、各种急慢性炎性疾病、肿瘤患者。两组在性别、年龄组成、危险因素上差异无统计学意义，具有可比性，均获得知情同意。以Hcy≥15 mmol/L为标准，将大面积脑梗死组及对照组均分为高Hcy组与正常Hcy组。

1.2方法

1.2.1一般资料所有受试者记录年龄、性别、高血压病史、糖尿病史、高脂血症、心脏病病史。

1.2.2标本的检测清晨空腹(空腹 10 h以上)采肘静脉血7 ml，取3 ml立即注入含有EDTA-2Na (1 mg/ml)和 aprotinin (0.6 TIU/ml)的冷试管中，迅速离心(1600 r/min、4℃、15 min)，收集血浆，-80℃保存，用于Ghrelin的集中检测。采用酶联免疫法，试剂盒由美国Phoenix Pharmaecu Ticals提供；其余血样用于Hcy及生化等其它常规检测。分别于住院后第7天、第14天采用同样方法取空腹肘静脉血用于Ghrelin及Hcy水平检测。

1.3统计学方法应用SPSS18.0软件进行处理，各组数据采用均数±标准差表示。各组之间采用均衡设计，两组间比较采用t检验，数值间相关性分析采用Pearson相关分析，P≤0.05认为差异有统计学意义。

2　结　果

2.1A组和B组受试者性别及脑血管病传统危险因素的比较，见表1。

表1　两组受试者性别及脑血管病传统危险因素的比较

2.2A组入院后第1天(A1组)、第7天(A2组)、第14天(A3组)及B组间血浆Ghrelin水平的比较，见表2。A1组与A2组、A1组与A3组、A2组与A3组间血浆Ghrelin水平差异有统计学意义，P<0.05。B组与A1、A2组间的Ghrelin水平差异亦有统计学意义，P<0.05。A3与B组间的Ghrelin水平的差异无统计学意义，P>0.05。

表2　各组间血浆Ghrelin水平的比较

2.3按Hcy水平的不同，将A、B组均分为正常Hcy组与高Hcy组，两组间血浆Ghrelin水平的比较，见表3。

表3　正常Hcy组与高Hcy组血浆Ghrelin水平的比较

A1、A2组中a、b两组间血浆Ghrelin水平差异无统计学意义，P>0.05。A3、B组中a、b两组间血浆Ghrelin水平差异有统计学意义，P<0.05。

2.4各组中血浆Ghrelin与Hcy的相关性检验，见表4。

表4　各组中血浆Ghrelin与Hcy的相关性检验

A3、B组中血浆Ghrelin水平与Hcy水平呈正相关(r=0.420,P<0.05； r=0.591,P<0.01)。

3　讨　论

Ghrelin是一个由28个氨基酸组成的小分子多肽，主要由胃肠道分泌。辛酰化的Ghrelin是生长激素促分泌受体(growth hormone secretatogue receptor,GHSR)内源性配体的主要活性形式。GHSR目前确定的有功能性的Ia型和非功能性的Ib型两种形式，大多数的Ghrelin的生物学效应是由GHSRIa介导实现的[3]。GHSR主要在垂体、下丘脑及其它脑组织中表达,提示Ghrelin可能与脑血管病有紧密联系。

研究表明，在大鼠脑缺血/再灌注损伤模型中，缺血区大脑皮层内GHSRIa的表达明显下降，给予外源性的Ghrelin后，GHSRIa的表达明显上调[4-5]；外源性Ghrelin可通过上调Bcl-2/Bax和HSP70水平，并抑制凋亡相关基因caspase 9、3、8的表达，而实现神经保护功能并显著抑制由脑缺血/再灌注而诱导的神经细胞的凋亡[5-6]，亦可减少线栓大鼠大脑中动脉引起的脑梗死的体积，扩张脑血管，增加缺血半暗带区的血流量，显著减少半暗带区的面积[7]。血浆Ghrelin可通过交感神经来调节炎症反应[8]，其水平与炎性介质IL-1β、TNF-α的分泌呈负相关[9]。对脑梗死后Ghrelin水平的变化，目前的研究结果尚不一致。有研究表明缺血性脑卒中患者Ghrelin水平较前下降，可作为缺血性脑卒中的独立预测因素[10-11]；而Xu X等[12]在对大鼠的研究中发现脑梗死后血清Ghrelin水平是升高的；啜佳然等[13]的研究则显示了缺血性卒中的小鼠血浆Ghrelin水平先升高后下降的规律。本研究结果显示大面积脑梗死患者血浆Ghrelin水平入院后第7天较第1天明显下降，第14天较第1、7天水平明显回升，第1、7天较第14天及对照组明显下降，呈动态变化，其差异均有统计学意义，与上述研究有所不同。大面积脑梗死患者体内Ghrelin水平的这种动态变化，考虑可能与脑组织缺血梗死后Ghrelin受体数目的减少以及继发的动态的炎性变化有关。随着脑梗死后继发脑水肿的出现，Ghrelin水平继续下降，削弱了机体的抗炎作用，加剧了炎症的损伤，相对减少了缺血区的血流量，导致神经元的凋亡相对增多，更加剧了缺血对脑组织的损害，而后伴随着脑组织水肿的减退及脑功能的改善，Ghrelin水平亦随之回升。本研究中第14天的Ghrelin水平与对照组的差异无统计学意义也支持上述论述。本研究采用均衡设计，去除了高血压、高血糖、高血脂、心脏病等脑血管发病危险因素对Ghrelin水平的影响，可见Ghrelin水平的变化是和脑梗死后的病理生理变化有直接联系的，是独立于其他相关因素之外的改变。本研究与前述研究结果的不同是否与所观察的物种不同有关，尚待进一步研究证实。

Hcy作为脑血管病的独立危险因素，它可损害血管内皮，降低eNOS活性，减少血管内皮细胞合成、释放NO[14]，使血管扩张性降低。Xu X等[15]在体外培养的血管内皮细胞中加入Ghrelin可迅速激活eNOS，使血管内皮细胞产生NO增多。可见，Ghrelin与Hcy均对血管内皮细胞中NO含量有调控作用。但在脑梗死患者中两者之间的关系尚不明了。本研究显示大面积脑梗死患者第14天时及对照组中高Hcy组血浆Ghrelin水平明显高于正常Hcy组，并且血浆Ghrelin水平与Hcy水平呈正相关，此与许志威等[16]的研究结果相符，考虑可能与高Hcy导致血管内皮损伤，致使血管内皮细胞NO含量降低，反射性诱导Ghrelin代偿性升高有关。本研究中大面积脑梗死患者入院后第1、7天高Hcy与正常Hcy两组间血浆Ghrelin水平差异无统计学意义，血浆Ghrelin水平与Hcy水平之间未表现出相关性，考虑可能与高同型半胱氨酸血症引起的内源性Ghrelin的升高不能代偿炎症、受体等其他因素对Ghrelin水平的影响有关。如果能给予外源性的Ghrelin，不仅可减少脑梗死本身带来的危害，还可降低高同型半胱氨酸血症导致的血管内皮损伤，从而遏制动脉粥样硬化形成的起始环节，减少脑血管病的发生、发展。

[1]Kojima M,Hosoda H,Date Y,et al.Ghrelin is a growth hormone releasing acylated peptide from stomach[J].Nature，1999,402:656-660.

[2] 中华神经学会.脑血管病诊断要点[J].中华神经科杂志,1996,29(6):379-381.

[3] Nils Wierup,Maria Bjorkqvist,Bjorn Westrom,et al.Ghrelin and Motilin Are Cosecreted from a Prominent Endocrine Cell Population in the Small Intestine [J].Clinical Endocrinology & Metabolism,2006,92(9):3573-3581.

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The expression of plasma Ghrelin in patients with large areacerebral infarction and its correlation with homocysteine

YANG Yan-yan1CHEN De-zhe2ZHAO Min2CHEN Yan-xiu2YANG Xia-feng2

(1.Taishan Medical University，Taian 271016，China；2.Dept.of Neurology,Liaocheng People’s Hospital，Liaocheng 252000，China)

Objective：To investigate the expression of plasma Ghrelin in patiens with large area cerebral infarction at different stages and its correlation with homocysteine.Methods：Forty-two patients with large area cerebral infarctionwere selected as the case group (A group),the levels ofplasma Ghrelin and blood homocysteinwere measured at 1st,7th,14th days after hospitalization while.32 cases with health examination were selected as control group (Bgroup),the levels of Ghrelin and Hcy were measured.Results：1)In Group A,the levels of Ghrelin decreased more significantly at 1 st and 7 th days afterhospitalization than 14 th days afterhospitalization and Group B.The levels of Ghrelin at 7th day after hospitalization were lower than those at 1st day.There was no significant difference in the level of Ghrelin between 14th days and Group B.2)In Group B andat 14th day after hospitalization in Group A,the levels of Ghrelinin normal Hcy group were lower than those in high Hcy group，Ghrelin and Hcy levels were positively correlated(r=0.420,P<0.05； r=0.591,P<0.01).Conclusion：1)The plasma Ghrelin in patients with large area cerebral infarctionchanges with the development of patient’s conditions.2)Ghrelin may have the protective effect by Hcy intimal injury,slow downing the occurrence and development of atherosclerosis.

large area cerebral infarction; Ghrelin；homocysteine; correlation

杨艳艳(1990—)，女，硕士研究生，研究方向：脑血管病。

陈德哲,E-mail：15865787257@163.com。

R743.3

A

1004-7115(2016)05-0481-03

10.3969/j.issn.1004-7115.2016.05.001

2016-01-18)