尿肾损伤分子1、血清胱抑素C和尿中性粒细胞明胶酶相关性脂质运载蛋白预测子痫前期发病和早期肾损伤的价值

黄　菁，郑美玲，王玉珏，于　庭

（吉林大学第二医院检验科，长春130041）

尿肾损伤分子1、血清胱抑素C和尿中性粒细胞明胶酶相关性脂质运载蛋白预测子痫前期发病和早期肾损伤的价值

黄菁，郑美玲，王玉珏，于庭

（吉林大学第二医院检验科，长春130041）

目的探讨新型生物学标志物尿肾损伤分子1（KIM-1）、血清胱抑素C和尿中性粒细胞明胶酶相关性脂质运载蛋白（NGAL）与子痫前期的关系及预测子痫前期发病和早期肾损伤的价值。方法选择2014年10月至2015年7月在吉林大学第二医院住院的30例重度子痫前期孕妇、30例轻度子痫前期孕妇作为子痫前期组，并选取同期住院足月分娩的60例健康孕妇作为对照组。采用ELISA法测定尿KIM-1和尿NGAL，采用免疫浊度法测定血清胱抑素C。结果子痫前期组孕妇的尿KIM-1、尿NGAL、血清胱抑素C水平明显高于对照组（均P＜0.05），随着病情进展各指标均逐渐升高。体质量指数（BMI）、肾小球滤过率（eGFR）、尿蛋白/肌酐比值、尿KIM-1、血清胱抑素C和尿NGAL是子痫前期发生的危险因素；尿KIM-1、血清胱抑素C、尿NGAL及联合预测因子作为子痫前期早期肾损伤筛查指标的灵敏度分别为83.3%、75.0%、88.9%、96.8%；特异度分别为72.7%、70.0%、75.6%、86.4%。结论尿KIM-1、血清胱抑素C和尿NGAL的水平可反映子痫前期的病情进展和子痫前期肾损伤的程度。尿KIM-1、血清胱抑素C、尿NGAL联合检测对子痫前期早期肾损伤有更高的预测价值。

子痫前期；肾损伤分子1；血清胱抑素C；脂质运载蛋白，中性粒细胞明胶酶相关性

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子痫前期（preecalampsia，PE）是妊娠期特有的高血压疾病，常发生于妊娠20周以后，该病以高血压，蛋白尿和肾、肝、脑、心等多器官系统损害为主要表现，常导致胎儿宫内发育迟缓或胎儿死亡。PE最常累及肾脏，引起肾小球毛细血管通透性增高，尿蛋白增加等肾功能损害［1］。快速诊断和早期治疗PE肾损伤对于保护肾功能和预防肾损伤十分必要。近年来，尿肾损伤分子1（kidney injury molecule-1，KIM-1）、尿中性粒细胞明胶酶相关性脂质运载蛋白（neutrophil gelatinase-associated lipocalin，NGAL）和血清胱抑素C等标志物对肾损伤的诊断价值越来越引起广泛关注。本研究对PE尿KIM-1、尿NGAL及血清胱抑素C进行检测，分析其与24 h尿蛋白、血尿酸、肾小球滤过率（estimated glomerular filtration rate，eGFR）和血肌酐、血尿素、尿蛋白/肌酐比值的相关性，分析评估其对PE早期肾损伤的诊断效能，探讨尿KIM-1、尿NGAL、血清胱抑素C与PE发病的关系及对PE早期肾损伤诊断的预测价值。

1　材料与方法

1.1研究对象及分组

选择2014年10月至2015年7月在吉林大学第二医院住院的孕妇120例，均为单胎妊娠，年龄24～36岁，孕周24～39周。PE孕妇60例，其中重度PE（severe preecalampsia，SPE）30例（SPE组），入院时收缩压为（165±16）mmHg，舒张压为（104±11）mmHg；轻度PE（mild preecalampsia，MPE）30例（MPE组），入院时收缩压为（138±13）mmHg，舒张压为（95±10）mmHg。同期住院足月分娩的健康孕妇60例作为对照组，入院时收缩压为（116±10）mmHg，舒张压为（75±7）mmHg。PE的诊断标准参照文献［2］。排除标准：孕前有高血压，系统性红斑狼疮、类风湿等风湿免疫性疾病，肝脏、肾脏等全身性疾病或慢性消耗性疾病，糖尿病、甲状腺功能亢进、原发性甲状旁腺功能亢进等其他内分泌疾病；肿瘤、结核等病史，长期吸烟饮酒，子痫前期确诊前服用降血压及改善心血管功能的药物；妊娠合并肾脏疾病、妊娠期糖尿病、胎儿畸形。

1.2尿液和血清样本收集与处理

收集中段尿样本20.0 mL置于无菌容器，4℃ 3 000 g离心15 min分离去除沉渣。制备的上清液每1.5 mL分装在无菌的离心管中，加入5 μL蛋白酶抑制剂存储在-80℃冰箱中待测。收集5.0 mL空腹血清样品，4℃1 500 g离心15 min。血清置于无菌的离心管中-80℃储存待测。样品均在使用任何药物前采集，所有样品只解冻1次。

1.3检测方法

血清胱抑素C采用免疫浊度法，利用雅培C12000全自动生化分析仪及相关配套试剂进行测定。KIM-1和NGAL试剂购自R&D Systems公司，尿KIM-1和尿NGAL采用ELISA法测定，结果在450 nm处由Multiskan公司Mirco酶标仪测定并与标准曲线比较。各组均常规测量收缩压、舒张压、肾功能（血尿素、血尿酸、血肌酐、eGFR）、24 h尿蛋白总量和尿蛋白/肌酐比值。

1.4统计学方法

应用SPSS 19.0统计学软件，计量资料以x±s表示，组间比较采用单因素方差分析，并对单因素分析有统计意义的因素进行多因素的逐步logistic回归分析；应用Pearson相关分析尿KIM-1、血清胱抑素C和尿NGAL与其他指标的相关性，根据各单项血清指标的预测界值应用logistic方程建立联合预测因子并绘制ROC曲线。P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.13组患者一般资料比较

结果如表1所示，MPE组、SPE组平均孕周低于对照组，而体质量指数（body mass index，BMI）明显高于对照组，SPE患者更明显，差异均有统计学意义（均P＜0.05）；与对照组比较，MPE组、SPE组24 h尿蛋白、eGFR、尿蛋白/肌酐比值、尿酸以及新生儿体质量、身高的差异均有统计学意义（均P＜0.05）。

表1　3组患者一般资料比较Tab.1 Patients' characteristics and clinical outcomes

2.23组患者尿KIM-1、血清胱抑素C和尿NGAL水平比较

结果显示，MPE组、SPE组尿KIM-1、血清胱抑素C以及尿NGAL水平与对照组比较均明显增加（P分别为0.001、0.013、0.002）；MPE组与SPE组相比尿NGAL、尿KIM-1和血清胱抑素C水平均明显增加（P分别为0.009、0.002、0.018），见表2。

表2　3组尿KIM-1、血清胱抑素C和尿NGAL比较（x±s）Tab.2 Comparison of urine KIM-1，serum cystyatin C and urine NGAL among 3 groups（x±s）

2.3PE危险因素的logistics分析

将单因素分析具有统计意义的因素进行多因素的逐步logistics回归分析。结果显示，BMI、 eGFR、尿蛋白/肌酐比值、尿KIM-1、血清胱抑素C、尿NGAL是PE发生的独立危险因素。见表3。

2.4尿KIM-1、血清胱抑素C和尿NGAL和联合检测因子在PE早期肾损伤诊断中的特点和诊断效能分析

表3　子痫前期危险因素的logistic分析Tab.3 Multivariate logistic regression analysis for preecalampsia patients

以尿KIM-1、血清胱抑素C、尿NGAL和联合检测因子作为检验变量，以PE肾损伤［eGFR＜90 mL/（min·1.73m2）］作为状态变量绘制ROC曲线，得出预测价值最高的总阻力分值作为PE诊断的临界值。尿NGAL、血清胱抑素C、尿KIM-1、联合检测因子的ROC曲线下面积分别为0.831（95%CI 0.686～0.891，P＜0.01）、0.755（95%CI 0.652～0.864，P＜0.01）、0.872（95%CI 0.705～0.901，P＜0.01）、0.966（95%CI 0.882～0.978，P＜0.01）。尿KIM-1、血清胱抑素C、尿NGAL、联合预测因子对PE早期肾损伤均有预测价值（P均＜0.05），联合预测因子的敏感性和特异性明显提高。见表4。

3　讨论

PE是妊娠期特有的多器官系统损害的高危疾病，常最先累及肾脏，引起尿蛋白含量的升高，这可能是近端肾小管功能进一步损害的结果［1］。研究显示KIM-1、血清胱抑素C、NGAL较血肌酐、eGFR、24 h尿蛋白等更能精确反映肾小管损伤［3］。大量临床试验［4］表明KIM-1作为肾小管上皮损伤的特异性标志物在急性肾损伤中增加。本研究发现尿KIM-1在PE组中均显著高于对照组（P＜0.01），且随着病情进展尿KIM-1的浓度也逐渐升高，以SPE时浓度最高。说明尿KIM-1可以提示PE肾损伤的早期病变。同时进一步证实KIM-1参与肾小管上皮细胞的早期损伤和修复，具有黏附、凋亡细胞清除和参与免疫反应和维持肾小管正常结构等功能［5］。

表4　在子痫前期早期肾损伤诊断中尿KIM-1、血清胱抑素C、尿NGAL和联合检测因子的诊断效能评价Tab.4 The best cut-off value，sensitivity and specificity of kidney injury markers

血清胱抑素C作为早期肾功能损伤的敏感指标能准确反映肾小球滤过率［6］。国内外大量研究［7-8］显示MPE的孕妇在孕早期血清胱抑素C明显高于正常对照组，对PE的早期诊断及监测发展趋势具有一定价值。本实验也证实PE组血清胱抑素C水平均显著高于对照组（P＜0.05），随着病情进展血清胱抑素C的浓度也逐渐升高，以SPE时浓度最高。

当发生肾缺血灌注损伤时，肾小管上皮细胞内的NGAL会在短期内应激性的升高，通过降低肾小球的超滤液量而减少肾小球滤过率［8］。有研究［9-10］表明PE孕妇尿NGAL水平明显高于同期正常妊娠妇女，与MPE和SPE比较差异仍有统计学意义（P＜0.05）。本实验研究显示SPE患者的尿NGAL、血肌酐、尿素水平均显著高于对照组和MPE，但MPE仅NGAL明显高于对照组，而肌酐和尿素比较无统计学差异（P＞0.05），说明在肾小管发生轻度病变时NGAL预测肾损伤的敏感性高于肌酐和尿素。因此，尿NGAL不仅可作为预测PE发病的指标，更可反映PE疾病的严重程度。

综上所述，尿KIM-1、血清胱抑素C和尿NGAL水平反映PE病情进展和PE肾损伤程度，对PE肾损伤具有一定的诊断价值。尿KIM-1和尿NGAL对PE早期肾损伤的诊断价值明显优于血清胱抑素C。但尿KIM-1、血清胱抑素C与尿NGAL联合更能预测PE早期肾损伤，但由于本研究样本例数较少，此结论还需要进一步的临床研究及实践来证实。

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（编辑武玉欣）

Clinical Significance of Urinary Kidney Injury Molecule-1，Serum Cystatin Cand Urinary Neutrophil Gelatinase-associated Lipocalin in the prediction of Early Kidney Damage in preeclampsia

HUANG Jing，ZHENG Meiling，WANG Yujue，YU Ting
（Department of Laboratory，The Second Hospital，Jilin University，Changchun 130041，China）

Objective To investigate the relationship between serum cystain C，urinary neutrophil gelatinase-associated lipocalin（NGAL），urinary kidney injury molecule-1（KIM-1）and preeclampsia，and explore the value in predicting preeclampsia and early kidney damage.Methods A total of 30 cases of pregnant women with severe preeclampsia，30 cases of mild preeclampsia and 60 cases of healthy pregnant women admitted in the Second Hospital of Jilin University from October 2014 to July 2015 were enrolled for the study.ELISA was performed to check urinary KIM-1 and urinary NGAL，and the serum cystatin C was detected by immune turbidity method.Results KIM-1，NGAL，serum cystatin C in the preeclampsia were significantly higher than the normal control group（P＜0.05）.In addition，with the development of their concentrations，the progression of preeclampsia gradually rise；BMI，e-GFR，urine protein/creatinine ratio，KIM-1，serum scystatin C and NGAL are the risk factors for preeclampsia；uKIM-1，serum scystatin C and NGAL and combined predictors of preeclampsia are taken as the early indicators of renalinjury，which sensitivity are separately 83.3%，75%，88.9%，96.8%；specificity are respectively 72.7%，70%，75.6%，86.4%.Conclusion KIM-1，serum scystatin C and NGAL may reflect the progression of renal injury in preeclampsia.Combined predictors have a higher predictive value in the early renal injury of the preeclampsia.

preeclampsia；kidney injury molecule-1；serum cystatin C；lipocalin，neutrophil gelatinase-associated

R714.259

A

0258-4646（2016）05-0460-04

10.12007/j.issn.0258-4646.2016.05.020

黄菁（1986-），女，硕士研究生.

于庭，E-mail：yuting485@163.com

2015-12-10

网络出版时间：