食管癌患者NK细胞和T淋巴细胞免疫功能的检测及临床意义

刘启胜杨志花卢学兵罗　昱焦阳



论著

食管癌患者NK细胞和T淋巴细胞免疫功能的检测及临床意义

刘启胜1杨志花2卢学兵1罗昱1焦阳1

目的分析食管癌患者NK细胞和T淋巴细胞免疫功能的检测及临床意义。方法以87例食管癌患者为观察组，以80例健康者为对照组。分别对两组对象的外周血NK细胞（CD56）和T淋巴细胞（CD 3、CD4、CD8）的水平进行检测。结果观察组患者外周血CD 56、CD8水平均高于对照组（P＜0.05）；CD3、CD4水平均低于对照组（P＜0.05）。观察组患者不同肿瘤分期中，CD56、CD8水平呈递增趋势，即Ⅰ期＜Ⅱ期＜Ⅲ期（P＜0.05）；在CD3、CD 4水平呈递减趋势，即Ⅰ期＞Ⅱ期＞Ⅲ期（P＜0.05）；有淋巴结转移组和无淋巴结转移组患者的NK细胞和T淋巴细胞指标值比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论食管癌患者存在细胞免疫功能下降，且下降趋势与肿瘤病情进程密切相关。

食管癌；NK细胞；T淋巴细胞；免疫功能

【Abstract】Objective To detectand analyze clinical significance of NK cells and T lymphocytes immune function in the patients w ith esophageal cancer.Methods The study included 87 patients with esophageal cancer（observation group）and 80 healthy persons（control group）.The level of the NK cells（CD56）and the T lymphocytes（CD3，CD4 and CD8）of the peripheralblood in two groupswere detected.Results The levelof CD56 and CD8 in observation groupwashigher than controlgroup（P＜0.05）.However，the levelof CD3 and CD4was lower in observation group（P＜0.05）.According to different tumor staging，CD56 and CD8 showed increasing trend，Ⅰ＜Ⅱ＜Ⅲ（P＜0.05），while CD3 and CD4 showed decreasing trend，Ⅰ＞Ⅱ＞Ⅲ（P＜0.05）.There wasno statistically significantdifference on the levelof NK cellsand T lymphocytes whether the patientswith lymphaticmetastasisor not（P＞0.05）.Conclusion Patientswith esophageal cancer had a decreaseof immunologic function，whichwas closely related to tumor progression.The detection of NK cellsand T lymphocyteswasmeaningful for the condition judgmentand treatmentp lan in esophageal cancer.

【Keywords】Esophageal cancer；NK cells；T lymphocytes；Immune function

随着临床医学对肿瘤疾病发病机制研究的不断深入，肿瘤免疫学研究报道证实，细胞免疫作为机体抗肿瘤的主要途径，机体细胞免疫功能异常是肿瘤发生的重要病理基础，也是影响疾病发展及预后的关键因素［1］。NK细胞和T淋巴细胞亚群作为反映机体细胞免疫功能的重要指标，通过对二者的监测来判断肿瘤患者免疫功能的变化，为临床治疗措施的制定及预后的判断提供参考依据已成为临床关注的热点。食管癌是常见的消化道恶性肿瘤，近年来随着人们生活环境的变化以及饮食习惯的改变，其发病率呈逐渐升高趋势，成为威胁人类生存质量的重要疾病。本文以我院收治的87例食管癌患者为研究对象，探讨患者NK细胞和T淋巴细胞免疫功能的变化及意义，现报告如下。

资料与方法

一、临床资料

选择我院2014年3月至2015年3月期间收治的87例食管癌患者为观察组，所有患者均经手术病理确诊。其中，男46例，女41例；年龄45～75岁，平均（61.425.66）岁；所有患者的采样均于未进行手术、放化疗等治疗前进行。另选择同期于我院行健康体检的80例健康者为对照组，男42例，女38例；年龄45～75岁，平均（62.01±5.04）岁。研究对象纳入标准：①无先天性免疫缺陷病者；②近2周内未使用过激素及免疫调节剂史者；③自愿参与本次研究者。在性别、年龄方面，两组对象比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。

二、方法

分别采集两组对象空腹静脉血2 m L，置入EDTA抗凝的真空采血管中。取抗凝全血0.1m L，加入鼠抗人单克隆CD3-FITC/CD56-PE、CD4-FITC/CD8-PE；双标记抗体20μL（美国贝克曼公司生产），室温下孵育25～30m in。采用流式细胞仪（FCM）对外周血NK细胞CD56和T淋巴细胞CD3、CD4、CD8的指标水平进行检测［2］。

三、观察指标

1.两组对象外周血NK细胞和T淋巴细胞的指标值

根据检测结果，对比分析两组对象外周血NK细胞和T淋巴细胞的指标值。

2.不同病理特征下观察组患者NK细胞和T淋巴细胞的指标值

（1）不同病理分期：根据观察组患者肿瘤的TNM分期（UICC 2009版）标准将87例患者分为Ⅰ期34例，Ⅱ期28例，Ⅲ期25例；

（2）有无淋巴结转移：根据观察组患者淋巴结转移情况，将87例患者分为有淋巴结转移组42例和无淋巴结转移组45例。分别对比分析不同病理特征下观察组患者NK细胞和T淋巴细胞的指标值。

四、统计学方法

结果

一、两组对象外周血NK细胞和T淋巴细胞的指标值

从表1可以看出，观察组患者外周血CD56、CD8指标值均高于对照组（P＜0.05）；CD3、CD4指标值均低于对照组（P＜0.05），见表1。

二、不同病理特征下观察组患者NK细胞和T淋巴细胞的指标值

从表2可以看出，不同肿瘤分期其CD56、CD8指标值呈递增趋势，即Ⅰ期＜Ⅱ期＜Ⅲ期（P＜0.05）；CD3、CD4则呈递减趋势，即Ⅰ期＞Ⅱ期＞Ⅲ期（P＜0.05）。

三、观察组有无淋巴结转移NK细胞和T淋巴细胞的指标值

从表3可以看出，有淋巴结转移组和无淋巴结转移组患者的NK细胞和T淋巴细胞指标值比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。

讨论

淋巴细胞、细胞因子、共同刺激因子、黏附因子等多种细胞及因子的失衡是造成机体细胞免疫功能紊乱的重要原因，而细胞免疫功能又在肿瘤免疫机制中发挥着主导作用，其功能的紊乱是造成肿瘤发生、发展的关键因素［3］。因此，目前通过对肿瘤患者机体细胞免疫功能的检测为疾病的诊断、治疗及预后判断提供参考依据成为临床研究的热点。NK细胞和T淋巴细胞不仅是反映机体细胞免疫状态的直接指标，也是重要的肿瘤免疫效应细胞，在机体抗肿瘤机制中起着重要的作用。

表1　两组外周血NK细胞和T淋巴细胞指标值对比（±s，%）

表1　两组外周血NK细胞和T淋巴细胞指标值对比（±s，%）

注：与对照组比较，*P＜0.05。

组别n CD56 CD3 CD4 CD8观察组87 18.76±5.28*62.63±4.20*30.54±3.04*37.01±5.21*对照组80 13.92±3.71 72.55±5.03 38.85±3.27 28.92±4.27 t值-7.163 6.185 9.224 8.157 P值-0.039 0.045 0.042 0.038

表2　观察组不同分期NK细胞和T淋巴细胞指标值对比±s，%）

表2　观察组不同分期NK细胞和T淋巴细胞指标值对比±s，%）

注：与Ⅰ期比较，*P＜0.05；与Ⅱ期比较，#P＜0.05。

不同分期n CD56 CD3 CD4 CD8Ⅰ期34 14.83±4.02 71.93±4.01 36.86±3.27 30.19±4.21Ⅱ期Ⅲ期28 25 18.82±5.01* 22.81±5.81*#60.23±4.12* 50.82±4.21*#29.12±3.25* 22.71±3.19*#37.91±4.05* 44.66±4.21*#F值-3.852 6.462 3.028 9.242 P值-0.028 0.019 0.033 0.017

表3　观察组有无淋巴结转移NK细胞和T淋巴细胞指标值对比（±s，%）

表3　观察组有无淋巴结转移NK细胞和T淋巴细胞指标值对比（±s，%）

淋巴结转移n CD56 CD3 CD4 CD8有42 18.92±5.14 61.18±4.81 29.18±3.05 38.18±5.29无45 18.45±5.21 63.47±5.02 32.27±3.22 36.28±5.17 t值-2.183 1.336 1.035 2.035 P值-0.135 0.273 1.532 1.392

本研究采用病例对照研究的方法，以健康者为对照，检测分析食管癌患者NK细胞和T淋巴细胞免疫功能的变化，结果显示：①食管癌患者NK细胞比例呈升高趋势，且升高幅度与肿瘤病情的进展一致。CD56作为NK细胞的亚群，与CD3、CD4一起表现出最强的NK细胞杀伤活性［4］。本研究结果显示，观察组患者外周血CD56指标值均高于对照组，且随患者肿瘤分期的增加，其指标值越高。可能是因为随肿瘤病情发生及发展作用机制的影响，对人体的免疫系统造成刺激，进而促进更多NK细胞的产生以参与抗肿瘤免疫［5］。而这些NK细胞因肿瘤疾病相关因素的影响多未发育成熟，不能进入肿瘤组织发挥抗肿瘤作用，最终于外周血中滞留，造成肿瘤患者外周血NK细胞比例的上升［6］。②食管癌患者细胞免疫功能下降，且下降趋势与肿瘤病情的进展一致。CD3、CD4、CD8均为T淋巴细胞亚群，其中，CD3为成熟T淋巴细胞的总和，是反映T淋巴细胞活性的重要标志物；CD4为辅助性T淋巴细胞，在抗肿瘤免疫机制中占据重要地位；CD8为抑制性T淋巴细胞［7］。本研究结果显示，察组患者外周血CD8指标值均高于对照组，CD3、CD4指标值均低于对照组。提示食管癌患者细胞免疫应答受到抑制，尤其是CD4指标值的下降，这可能是机体抗肿瘤免疫功能下降的根本原因。同时，本研究结果显示，在CD8指标值上，Ⅰ期＜Ⅱ期＜Ⅲ期；在CD3、CD4指标值上，Ⅰ期＞Ⅱ期＞Ⅲ期。即CD3、CD4的下降趋势及CD8的升高趋势与食管癌患者的肿瘤分期增加趋势一致，随患者肿瘤病情的进展，患者细胞免疫功能不断下降，机体抗肿瘤免疫功能亦不断下降［8］。另外，本研究结果中，有淋巴结转移组和无淋巴结转移组患者的NK细胞和T淋巴细胞指标值比较，无明显差异；提示，临床上通过食管癌患者NK细胞和T淋巴细胞的检测，并不能作为患者淋巴结转移与否判断的依据。

综上，食管癌患者存在细胞免疫功能下降，且下降趋势与肿瘤病情进程密切相关，临床上通过对NK细胞和T淋巴细胞的检测对食管癌临床治疗方案的制定及病情的判断具有一定的意义。

［1］杜业勤，吴朗杰，阿合力·纳斯茹勒拉，等.食管癌放疗前后中医证型改变与T淋巴细胞亚群以及NK细胞的关系［J］.新疆医科大学学报，2012，35（01）：1-6.

［2］苏文.免疫功能检测在监控肿瘤发生发展中的临床意义［J］.人人健康，2010，（7）：38-38.

［3］李稳霞，张栋，李照，等.CD4-CD8-双阴性T细胞在B细胞介导免疫反应中的作用［J］.免疫学杂志，2015，31（02）：171-175.

［4］张丽萍.T淋巴细胞亚群和NK细胞对非霍奇金淋巴瘤患者疗效的预测价值［J］.海南医学院学报，2015，21（02）：244-246.

［5］卜全慧，韦腾飞，朱美兵.胃腺癌患者外周血中CD4～+T淋巴细胞表面抑制性分子PD-1的表达［J］.现代肿瘤医学，2015，8（10）：1403-1406.

［6］武春涛，刘亮，徐永峰，等.脾多肽对胰腺癌根治术后化疗患者细胞免疫功能的影响［J］.中国癌症杂志，2014，24（12）：906-913.

［7］郭晓东，杨美，余灵祥，等.肝癌患者外周血CD4、CD25以及调节性T细胞的临床研究［J］.肝脏，2014，19（12）：960-962.

［8］王美清，彭大为，程小珍，等.自体免疫细胞治疗前后胃癌患者外周血免疫功能测定及临床意义［J］.中国现代医学杂志，2014，24（35）：35-38.

（本文编辑：郑浩轩）

Detection and clinical significance of NK cells and T lymphocytes immune function in the patients with esophageal cancer

LIUQi-sheng1，YANGZhi-hua2，LUXue-bing1，LUOYu1，JIAOYang1.1）Departmentof clinicallaboratory，DayeHopitalofTraditionalChineseMedicine，Daye435100，Hubei；2）
DepartmentofAnorectal，DayeHospitalofTraditionalChineseMedicine，Daye435100，Hubei

10.3969/j.issn.1672-2159.2016.01.001

435100大冶市中医医院（1检验科；2肛肠科）通讯作者：杨志花

（2015-06-12）