2011—2014年深圳市贝类产品生物毒素污染状况调查

孙　烨，刘　威，郑　剑，吕　媛，黄海燕，潘柳波，王　舟，黄　薇，刘建军，

2011—2014年深圳市贝类产品生物毒素污染状况调查

孙烨1，2，刘威2，郑剑1，2，吕媛1，黄海燕2，潘柳波2，王舟2，黄薇2，刘建军2，*

（1.湖 南师范大学医学院预防医学系，湖南长沙410006；2.深 圳市疾病预防控制中心，广东深圳518055）

目的： 了解2011-2014年深圳市贝类产品的生物毒素污染状况。方法：采集2011—2014年深圳市6个区386份23种贝类样品。依据相关标准用酶联免疫法(ELISA)检测了样品的麻痹性贝类毒素(PSP)、腹泻性贝类毒素(DSP)、神经性贝类毒素(NSP)和遗忘性贝类毒素(ASP)水平。结果：386份样品的毒素超标率为20.21%(78/386)，其中PSP超标率3.11%(12/386)，DSP超标率18.13% (70/386)，未检出NSP和ASP超标样。23种贝类中，有16种DSP超标，3种PSP超标。DSP超标以花蚧、毛蚶、生蚝等贝类最为严重，而PSP超标以圆贝最为突出。结论：近年来深圳市贝类产品存在DSP和PSP污染，应加强卫生监管，确保消费者食用安全。

生物毒素；麻痹性贝类毒素；腹泻性贝类毒素；酶联免疫法

【ABSTRACT】OBJECTIVE: To investigate toxin contaminations of shellfish products in Shenzhen city from 2011 to 2014. METHODS：We collected 386 samples of 23 types of shellfish from six districts of Shenzhen city. We tested and evaluated the levels of paralytic shellfish poison (PSP)，diarrheic shellfish poison(DSP)，neurotoxin shellfish poison(NSP) and amnesic shellfish poison(ASP) in the samples by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). RESULTS：There were 78 samples exceeded limits in 386 samples with a over-limit ratio of 20.21%，among which PSP was 3.11% (12/386) and DSP was 18.13%(70/386). But NSP and ASP were both normal. There were 16 kinds of shellfish with DSP and 3 kinds of shellfish with PSP over limits. DSP contamination was serious in Ruditapes philippinarum，Scapharca subcrenata and Ostrea gigas thunberg，while PSP excess was mostly in Circle Shellfish. CONCLUSION：In recent years DSP and PSP were contaminants in shellfish products in Shenzhen city. We need to strengthen health supervision and guarantee consumer food safety.

【KEY W ORDS】biotoxin；paralytic s hellfish p oison；diarrheic s hellfish p oison；enzyme-linked i mmunosorbent a ssay

近年来，海洋环境的恶化已致人类食用海产品出现健康损伤的事件不断增多，海洋生物毒素已对人们的健康构成潜在威胁[1-2]。生物毒素是由各种生物(动物、植物、微生物)产生的有毒物质，为天然毒素。生物毒素的种类繁多，几乎包括所有类型的化合物，生物活性也很复杂，其不仅具有毒性作用，而且也具有药理作用，常用作生理科学研究的工具药，也被用作药物。按来源可分为植物毒素、动物毒素、海洋毒素和微生物毒素等。为了解深圳经济特区内海产品的生物毒素污染状况，本研究在2011—2014年间从深圳市采集了23种贝类海产品，并对多种贝类毒素进行了检测，为保障市民的食品安全，采取有针对性的预防措施提供科学依据。

1　材料与方法

1.1贝样采集

2011—2014年在深圳市6个城区的菜市场、生鲜批发市场采集新鲜贝样，包括生蚝、蛏子、元贝、带子等23个品种，386份样品。其中福田区77份，罗湖区54份，南山区54份，盐田区49份，宝安区79份，龙岗区73份。每份样品采集5 kg。

1.2样品前处理

采集后的贝样冷冻保存后迅速送至实验室。去离子水洗净贝壳，切断闭壳肌，开壳，去离子水淋洗内部去除泥沙等杂质，取出全部的贝肉及腺体，勿割破肉体，充分沥干水分，匀浆机匀浆。匀浆后的贝肉逐个编号分装，进行贝类毒素的提取或置-20 ℃冰箱冷冻储藏备用。

1.3样品检测

采用酶联免疫法(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)分别对样品中麻痹性贝类毒素(paralytic shellfish poison，PSP)、腹泻性贝类毒素(diarrheic shellfish poison，DSP)、神经性贝类毒素(neurotoxin shellfish poison，NSP)和遗忘性贝类毒素(amnesic shellfish poison，ASP)含量进行检测。按照检测试剂盒(Abraxis公司)操作说明书进行。利用TECAN 3000全波长酶标仪在450 nm处测量吸光度值。以标准品吸光度值对质量浓度绘制标准曲线，使得R2达到0.99以上。根据测量样品的吸光度值，查得样品的质量浓度，计算样品中的毒素含量。每个样品设3个复孔，计算平均值。要求标准品变异系数＜10%，样品变异系数＜15%。

1.4评价依据及分析

参照文献[3]和中国国家标准及国际食品法典(Codex Alimentarius Commission，CAC)标准对污染物进行评价。应用Excel建立数据库，对数据进行处理分析。

2　结果

2.1不同年份贝类毒素超标率

我们对全部386份样品进行检测，测其吸光度取平均值，结果变异系数＜10%，所建立的标准曲线R2均在0.99以上，吸光度变异系数＜15%。我们检测发现386份样品中有78份样品毒素超标，超标率20.21%。其中PSP超标率3.11%(12/386)，DSP超标率18.13% (70/386)， 而NSP和ASP均未检出超标情况。如表1所示，2011-2014年，DSP检测样本每年均存在超标情况，分别是20%、17.5%、9.8%和22.9%，以2014年为最高；超标范围是203.4～521.9 μg/kg。PSP只有2011年和2012 年存在超标情况，分别是18.3%和0.6%；超标范围是901.8～1 619.2 μg/kg。

表1　2011—2014年386份样品贝类毒素超标检测结果

2.2不同种类贝类DSP和PSP超标率

我们进一步对23种贝类进行DSP检测，发现有16种超标，7种未超标，其中白贝、太白、贵妃蚌、花螺、角螺和东冈螺虽然只检测了1份样本，但均超标。选取抽检数量≥8份的样本，对10种贝类进行DSP检测，发现8种超标，2种未超标，见表2。对于样本量较多的生蚝、蛏子、圆贝、带子和扇贝，超标率在11.59%～23.81%之间不等，以生蚝为最高。在样本量较少的花蚧、毛蚶、象牙蚌等样本中，超标率最高的是花蚧，为44.44%。

表2　不同种类贝类DSP和PSP超标率*

PSP检测发现只有生蚝、圆贝和带子存在超标情况，分别是3.17%、15.79%和1.59%，以圆贝为最高。

3　讨论

随着人们生活水平的普遍提高和食品消费结构的普遍升级，人们对海产品的需求大为增加，海产品的食品安全问题也倍受重视，而海水的环境污染是影响海产品食品安全的首要因素。除水体污染外，关注较多的为贝类毒素、河豚毒素、雪卡毒素、芋螺毒素等的污染状况，这些海洋生物毒素已成为社会非常重视的食品安全问题。有些有毒有害物质常以蓄积方式残留在水生动物体内，由于半衰期较长，不易分解、排泄，形成急性、慢性的毒性反应，有的还具有致畸、致癌、致突变的潜在危害。贝类毒素是因为贝壳类动物摄取有毒藻类而在体内积累的毒素。贝类毒素按其侵袭的器官组织和临床表现可分为4类，即PSP、DSP、NSP和ASP。从近4年的监测数据来看，深圳市存在PSP和DSP的污染。且DSP的超标率(18.13%)远高于PSP(3.11%)，这与往年文献报道[4-5]的食品安全风险监测的结果较为一致。

DSP的主要成分大田软海绵酸(okadaic acid，OA)具有一定的促癌作用，在很低的剂量下也会对人体健康产生威胁[6]。有关文献显示深圳市近岸海域存在DSP的污染，且夏秋季含量较高，提示DSP在贝类体内的积累具有一定的季节性变化特征，这种变化与气候有关，推测气温的升高，增加了藻类的滋生和蔓延，贝类有机会摄入更多的藻类导致毒素的蓄积[4]。而DSP的中毒症状主要是腹泻，其危害性往往被人们忽视。目前虽然尚未有食用含DSP贝类致死的报道，但是食用含DSP贝类或被其污染后的食物的中毒事件却常有报道[1]。因此，在注重食品安全的大环境下，加强对DSP的宣传、监管和检测是十分必要的。

贝类种类众多，现存种类约1.1万种，常见的有牡蛎、贻贝、文蛤、生蚝等，贝类中绝大多数种类均可食用。本次调查发现深圳市内有16种贝类DSP超标，3种贝类PSP超标。因此，市民在消费时应慎食花蚧、毛蚶、生蚝、蛏子、圆贝和扇贝等双壳贝类，每次进食量不宜过多。如进食贝类后出现舌尖、指端等部位麻痹、刺痛或胃肠道不适等症状，应立即就医。此外，加强宣传教育、建立监控和检测网络是防治其危害的主要措施。

[1] 周洁，周志峰，邓凯杰，等. 一起贝类毒素引发的食物中毒[J]. 职 业与健康，2013，29(16)：2025-2029.

[2] 钟苑芳，江海棠，李云峰，等. 一 起因食用响螺所致食物中毒的调查与分析[J]. 中 国初级卫生保健，2014，28(2)：104-105.

[3] 郑云雁. 食品中污染物的中国国家标准及国际法典标准对比——化学污染物[J]. 中 国食品卫生杂志，2002，14(1)：4 7-53.

[4] 黄海燕，黄爱君，刘建军，等. 深 圳市海域贝类腹泻性毒素的污染状况分析[J]. 中 国卫生检验杂志，2010，20(3)：624-625.

[5] 王舟，黄薇，潘柳波，等．2011年深圳市水产品卫生状况及风险评估[J]．中国公共卫生管理，2012，28(5)：595-597．

[6] Matias WG，Creppy EE．5-Methyldeoxy cytosine as a biological marker of DNA damage induced by okadaic acid in vero cells[J]．Environ T oxicol W ater Q ual，1998，13：83-881．

Biotoxin of shellfish products in Shenzhen city from 2011 to 2014

SUN Ye1，2，LIU Wei2，ZHENG Jian1，2，LVU..Yuan1，HUANG Haiyan2，PAN Liubo2，WANG Zhou2，HUANG Wei2，LIU Jianjun2，*
(1. Department of Preventive Medicine, The Medicine school of Hunan Normal University, Changsha 410006, Hunan; 2. Key Laboratory of Modern Toxicology of Shenzhen, Shenzhen Center for Disease Control and Prevention, Nanshan District, Shenzhen 518055, Guangdong, China)

R994.4

A

1004-616X(2016)02-0149-03

1 0.3969/j.issn.1004-616x.2016.02.014

2015-04-07；

2015-10-22

深圳市基础研究项目(JCYJ20130329103949656)

作者信息： 孙烨，E-mail：cxd0540@sina.cn。*

，刘建军，E-mail：j unii8@126.com