子宫内膜癌组织中LOC285194的表达变化及其意义

赵喜娃，魏许瑞，张辉，张海波，赵炜，张会超

(河北医科大学第四医院，石家庄050011)



·临床研究·

子宫内膜癌组织中LOC285194的表达变化及其意义

赵喜娃，魏许瑞，张辉，张海波，赵炜，张会超

(河北医科大学第四医院，石家庄050011)

目的观察子宫内膜癌组织中长链非编码RNA(lncRNA)LOC285194的表达变化，分析其在子宫内膜癌发生发展中的作用。方法采用real-time PCR法检测108例子宫内膜癌组织(病例组)和66例正常子宫内膜组织(对照组)中的LOC285194，分析LOC285194表达水平与子宫内膜癌临床病理参数的关系。结果病例组和对照组LOC285194的相对表达量分别为2.160±1.382和4.577±2.865，两组相比，P<0.05。以病例组LOC285194中位表达量(1.537)为界，将病例组进一步分为高表达组和低表达组。FIGOⅠ、Ⅱ期者LOC285194高表达率高于Ⅲ、Ⅳ期者(P<0.05)；无淋巴结转移者LOC285194高表达率高于有淋巴结转移者(P<0.05)。LOC285194低表达者和高表达者的术后生存时间分别为(53.4±15.6)、(59.8±8.7)个月，LOC285194低表达者术后生存时间较高表达者缩短(P<0.05)。结论子宫内膜癌组织中LOC285194呈低表达，LOC285194表达异常可能参与子宫内膜癌的发生发展。

子宫内膜癌；长链非编码RNA；LOC285194

子宫内膜癌是常见的女性生殖系统恶性肿瘤，大多数子宫内膜癌患者预后较差[1]。因此，探索有效的肿瘤标志物对子宫内膜癌早期诊断和治疗方案的制定有重要意义。长链非编码RNA(lncRNAs)是一组转录本大于200 nt的RNA，其本身并不具备蛋白编码功能，但多项研究发现lncRNA在肿瘤的发生发展过程中发挥重要作用[2,3]。LOC285194最早见于一项骨肉瘤研究中，被认为一种肿瘤生长抑制基因，其表达下调后可通过调控骨细胞凋亡及细胞周期从而促进骨细胞增殖[4]。另外，在其他种类肿瘤的相关研究中，LOC285194也被证实为肿瘤生长抑制基因[5～8]。目前关于LOC285194与子宫内膜癌发生发展关系的研究较少，为此，我们观察了子宫内膜癌组织中LOC285194的表达变化，并分析其与子宫内膜癌临床病理参数的关系。

1　资料与方法

1.1临床资料选取2010年1月～2012年12月在河北医科大学第四医院妇科行手术治疗的子宫内膜癌患者108例，年龄(55 ± 9)岁；根据2009年国际妇产科联盟分期(FIGO2009)Ⅰ、Ⅱ期83 例，Ⅲ、Ⅳ期25例；组织病理类型为子宫内膜样腺癌91例、非子宫内膜样腺癌17例(浆液性腺癌11例、透明细胞癌5例、未分化癌1例)。所有子宫内膜癌患者术前均未接受放疗、化疗及激素治疗，术中取子宫内膜癌组织(病例组)，标本切除后立即放入液氮冷冻，用于提取RNA。选择同期行子宫切除且病理检查证实子宫内膜正常的妇科良性疾病患者66例，年龄(52 ± 12)岁，术中留取正常子宫内膜组织纳入对照组。两组患者一般资料有可比性。

1.2LOC285194检测方法采用real-time PCR法。用TRIzol试剂提取组织RNA，紫外分光光度计检测其浓度。按逆转录试剂盒说明进行逆转录反应，在20 μL体系中加2 μg总RNA进行cDNA合成。根据real-time PCR试剂盒说明书，以合成的cDNA为模版，加入反应试剂，进行PCR反应，以GAPDH作为内参照。LOC285194上游引物序列为5′-TGTGCCTGTTTGACCTCTGA-3′，下游引物序列为5′-AGGAAGGATAAAAGACCGACCA-3′；GAPDH基因上游引物序列为5′-GTCAACGGATTTGGTCTGTATT-3′，下游引物序列为5′-AGTCTTCTGGGTGGCAGTGAT-3′。PCR反应条件：95 ℃ 5 min，95 ℃ 15 s，60 ℃ 60 s，40个循环。以2-ΔΔCt表示LOC285194相对表达量。

2　结果

2.1两组LOC285194相对表达量比较病例组和对照组LOC285194相对表达量分别为2.160±1.382、4.577±2.865，两组相比,P<0.05。

2.2LOC285194表达与子宫内膜癌临床病理参数的关系以病例组LOC285194中位表达量(1.537)为界，将病例组进一步分为高表达组和低表达组。FIGOⅠ、Ⅱ期者LOC285194高表达率高于Ⅲ、Ⅳ期者(P<0.05)；无淋巴结转移者LOC285194高表达率高于有淋巴结转移者(P<0.05)。见表1。

表1　LOC258194表达与子宫内膜癌临床病理参数的关系(%)

注：与Ⅰ、Ⅱ期者相比，*P<0.05；与有淋巴结转移者相比，#P<0.05。

2.3LOC285194表达与子宫内膜癌患者预后的关系LOC285194低表达者和高表达者的术后生存时间分别为(53.4±15.6)、(59.8±8.7)个月，LOC285194低表达者术后生存时间较高表达者缩短(P<0.05)。

3　讨论

人类基因测序结果显示，人类基因组主要为蛋白非编码基因，而蛋白编码基因仅仅占2%左右[9]。lncRNA作为蛋白非编码基因的一类，其转录本长度超过200 nt，缺乏有意义的开放阅读框，在过去被认为是基因组转录的“噪音”，近年来其功能受到越来越多的关注[10]。lncRNA可通过表观遗传、转录和转录后水平等调控方式调控目的基因表达，在机体多种生理过程中发挥重要作用[11,12]。lncRNA表达失调参与多种疾病的发生发展，尤其是肿瘤[13]。目前发现的与肿瘤发病有关的lncRNA并不多，且其在肿瘤发生发展中的确切作用机制尚未明确[14～16]。研究[17,18]表明，Hox基因反义基因间RNA(HOTAIR)作为“明星”lncRNA，在子宫内膜癌组织和细胞中呈高表达，敲低其表达可抑制子宫内膜癌细胞增殖及迁移，并可抑制活体子宫内膜癌瘤体生长。

LOC285194作为一种新的lncRNA，转录本长度为2 105 nt，由4个外显子构成，定位于3q13.31，目前认为是一种肿瘤生长抑制基因。LOC285194在骨肉瘤组织及细胞中呈低表达，进一步降表达后能通过调控骨细胞凋亡及细胞周期从而促进其增殖[4]。研究[5]显示，LOC285194通过与miR-211、p53等发生相互作用，进而抑制肿瘤进展。目前，LOC285194与子宫内膜癌发病的相关报道较少。本研究选择了子宫内膜癌组织及正常子宫内膜组织，采用real-time PCR法检测LOC285194，结果发现病例组LOC285194相对表达量低于对照组，提示LOC285194低表达与子宫内膜癌的发病有关；进一步分析LOC285194与子宫内膜癌临床病理参数的关系发现，病例组中FIGOⅠ、Ⅱ期者LOC285194高表达率高于Ⅲ、Ⅳ期者，无淋巴结转移者LOC285194高表达率高于有淋巴结转移者，这提示LOC285194低表达可能与子宫内膜癌的侵袭与转移密切相关。

一项食管鳞癌相关研究表明，LOC285194低表达者预后更差[7]。我们比较了LOC285194高表达者与低表达者的生存期，结果显示，LOC285194低表达者术后生存期较高表达者明显缩短，这进一步提示LOC285194可能起到抑制子宫内膜癌进展的作用，与相关研究结果一致[4～8]。我们推测，LOC285194与子宫内膜癌的发生发展有关，有望成为子宫内膜癌的一个新的治疗靶点及预后监测指标。然而，LOC285194在子宫内膜癌发病中的具体作用机制尚未明确，这将是我们下一步研究的重点。

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张会超(E-mail: 185664593@qq.com)

10.3969/j.issn.1002-266X.2016.19.014

R737.33

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1002-266X(2016)19-0042-03

2016-02-28)