夏天无滴丸的提取工艺研究

胡　佳　何　涛　于世海



夏天无滴丸的提取工艺研究

胡佳1何涛1于世海2

目的研究并建立夏天无滴丸的最佳提取工艺。方法紫外分光光度法测定夏天无总生物碱的含量；高效液相色谱法同时测定夏天无原阿片碱和延胡索乙素的含量。结果最佳提取条件为A3B1C3D2，即浸泡时间为48小时，药材粒度约为20目，渗漉溶液的体积为12倍量药材，渗漉的速度为1.5ml/min。结论为夏天无滴丸的最佳提取工艺的确立提供依据。

夏天无； 滴丸； 高效液相；提取工艺

夏天无又名伏地延胡索、无柄紫堇、一粒金丹，系罂粟科植物伏生紫堇(corydalis decumbens(Thunb.)Pers.的干燥块茎。具活血通络行气止痛之功效。临床用于中风偏瘫，跌扑损伤，风湿性关节炎，坐骨神经痛[1]。

夏天无的药效已得到肯定，为了提高其生物利用度，人们将其制成注射剂、片剂和滴眼剂。普通片剂常因崩解和药物溶出缓慢而影响药物的充分吸收，老人、儿童和吞咽困难的患者服用不便，当药品剂量、规格较大，或需一次服用片数较多时，问题尤为突出。液体制剂虽服用方便，但稳定性较差，包装、运输、贮存均不便，且不易准确掌握服用剂量。滴丸剂系指固体或液体药物与基质加热溶化混匀后，滴入不相混溶的冷凝液中，收缩冷凝而制成的制剂。滴丸是利用固体分散体的技术进行制备。当基质溶解时，体内药物以微细结晶、无定形微粒或分子形式释出，所以溶解快、吸收快、作用快、生物利用度高[2]。

将夏天无药材采用酸水渗漉提取，进行L9(34)的正交实验，分别选择浸泡时间、药材粒度、渗漉体积、渗漉速度作为四个因素进行三水平试验：采用加权综合评分以原阿片碱含量(权重系数为0.4)、延胡索乙素含量(权重系数为0.4)作为主指标，总碱含量作为次指标(权重系数为0.2)，即综合评分作为考察指标确定提取条件。正交试验因素水平见表1。

表1　因素水平表

准确称取夏天无药材100 g，共九份，按L9(34)正交表安排进行实验，渗漉后药液浓缩置500ml量瓶中，放置冰箱，以原阿片碱、延胡索乙素为指标进行含量测定，同时用比色法测定总碱含量，确定最佳提取工艺。

1　夏天无总碱含量测定[3]

1.1仪器与试药UV-4802型紫外可见分光光度计；原阿片碱对照品(110853-200201)由中国药品生物制品检定所提供；市售夏天无药材，经辽宁中医药大学李峰教授鉴定为正品；甲醇为色谱纯，水为重蒸水；其它试剂均为分析纯。

1.2方法与结果

1.2.1供试品溶液的制备将九份渗漉液调成中性后，均浓缩置250ml量瓶中，精密称取浓缩液1.5ml，置250ml量瓶中，加1%HCl至刻度，作为供试品溶液。

1.2.2样品的测定精密吸取供试品溶液2ml, 置分液漏斗中，各加溴甲酚紫试液及缓冲液各2ml，再精密加入氯仿10ml，振摇提取2分钟，静置分层，分取澄清的氯仿液，置比色杯中，于410nm波长处分别测定吸收度，结果见表2。

表2　正交试验总碱含量测定结果

2　HPLC法测定原阿片碱和延胡索乙素含量[4]

2.1仪器与试药UV-4802型紫外可见分光光度计；LC—10AT液相色谱仪；AS3120A超声波清洗器；AR2140电子分析天平；延胡索乙素对照品(726-9004)、原阿片碱对照品(110853-200201)由中国药品生物制品检定所提供；市售夏天无药材，经辽宁中医药大学李峰教授鉴定为正品；甲醇为色谱纯，水为重蒸水；其它试剂均为分析纯。

2.2色谱条件测定条件：色谱柱：DiamonsilTMC185((250×4.6mm)色谱柱；流动相：乙腈-三乙胺醋酸溶液(取三乙胺8ml，冰醋酸30ml，加水稀释至1000ml)(18:82)；流速：1ml/min；柱温：30℃；检测波长：289nm。

2.3方法与结果

2.3.1供试品溶液制备精密吸取药液30ml，放在蒸发皿内，调致中性，烘干至干浸膏。取干浸膏约0.4 g(相当于药液3ml)，放在索氏提取器内，用氯仿50ml、氨水1ml浸渍过夜，然后索氏提取5小时。提取液挥干，残渣用甲醇溶解置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，以0.45μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。

2.3.2样品的测定精密吸取对照品溶液，供试品溶液各10μl进样，注入液相色谱仪，按上述色谱条件分别测定，结果见表3。正交实验结果见表4。

表3　正交试验单体碱含量测定结果

表4　正交实验结果表

2.3.3直观分析和方差分析的结果四个考察因素对结果影响均不显著。最佳提取条件为A3B1C3D2，即浸泡时间为48小时，药材粒度为20目，渗漉体积为12倍量药材，渗漉速度为1.5ml/min。见表5。

表5　方差分析表

注：F0.05(2，2)=19.00，F0.1(2，2)=9.00

2.4验证实验称取夏天无药材100 g，3份，按最佳提取条件A3B1C3D1渗漉，即药材粉碎过20目筛，浸泡48小时，加12倍量1%盐酸溶液，渗漉速度为1.5ml/min。验证实验结果见表6。

表6　验证实验结果

2.5夏天无滴丸的精制工艺研究[5]夏天无中主要成分为生物碱，所以采用酸溶碱沉的方法精制纯化夏天无总碱。取227 g药材，3份，按最佳提取条件A3B1C3D2渗漉后，收集渗漉液，将渗漉液调成中性，分别浓缩至450ml、680ml、910ml(即分别相当于生药材的2倍、3倍、4倍量)，以沉淀物量和原阿片碱含量作为考察指标，由结果可知，1#、2#实验的原阿片碱含量同样多，但考虑到精制程度与服用量，最终选择浓缩至680ml，即浓缩至体积相当于生药材的3倍量。结果见表7。

表7　精制工艺考察结果

3　讨论

夏天无滴丸的最佳提取工艺是药材粉碎粒度为20目，用1%盐酸浸泡48小时，用体积为12倍量药材的1%盐酸渗漉，渗漉速度为1.5ml/min。将夏天无药材按最佳提取工艺提取后，将渗漉液调成中性，在浓缩至体积相当于生药材的3倍量，再取沉淀制成滴丸。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典2010版[J].北京：化学工业出版社,2010:167.

[2]龙再根，向大雄，李焕德，等.克瘾宁胶囊的定性鉴别研究[J].湖南中医杂志,2002,18(3):70.

[3]廖静，梁文藻.酸性染料比色法测定不同产地夏天无中总生物碱的含量[J].中草药,1993，24(7)：354-355.

[4]李晓蒙，刘映.HPLC法测定夏天无中原阿片碱和延胡索乙素含量[J].中成药,2002,24(3):208-211.

[5]李跃，张水寒，肖娟，等.正交试验优选戒毒胶囊中夏天无提取工艺[J].中国医药学报,2004,19(3)：148-149.

The Study on Extraction Process of Decumbent Corydalis Rhizome Dropping Pills

HU Jia1HE Tao1YU Shihai2

(1. Jinzhou Institute for Food and Drug Control, Liaoning, Jinzhou 1210002, China；2. Liaoning Kangchen Pharmaceutical Co., Ltd., Liaoning, Dandong 118301, China)

ObjectiveTo study the best extraction process of decumbent corydalis rhizome dropping pills. MethodsUV was used to measure total alkaloid content of decumbent corydalis rhizome. HPLC was used to measure the content of corydalis and tetrahydropalmatine. ResultsThe best extract condition is A3B1C3D2, soak time is 48 hours, granularity is 20 item, percolation solution volume is 12 times the amount of medicine, and percolation speed is 1.5ml/min. ConclusionIt provided the basis for the establishment of the best extraction process for the decumbent corydalis rhizome dropping pills.

Decumbent corydalis rhizome; Dropping pills; HPLC; Extraction process

1.辽宁省锦州市食品药品检验所(锦州 121000); 2.辽宁康辰药业有限公司(丹东 118301)

10.3969/j.issn.1003-8914.2016.13.068

1003-8914(2016)-13-1977-03

(本文校对：李盈2015-11-10)