围生期孕妇生殖道B族链球菌感染与耐药性分析
2016-08-16杨文东
刘 丽,杨文东
(1.东营市东营区妇幼保健计划生育服务中心,山东 东营 257091;2.东营市利津县第二人民医院,山东 东营 257447)
·经验与总结·
围生期孕妇生殖道B族链球菌感染与耐药性分析
刘丽1,杨文东2
(1.东营市东营区妇幼保健计划生育服务中心,山东 东营257091;2.东营市利津县第二人民医院,山东 东营257447)
目的:分析围生期孕妇生殖道B族链球菌(GBS)的感染与耐药性,为临床医师制定有效的预防和治疗措施提供依据。方法:对795例围生期孕妇生殖道分泌物进行GBS培养鉴定与药敏试验,分析试验结果。结果:795例孕妇中共检出GBS携带者256例,带菌率32.20%。<30岁组(28.88%)与≥30岁组(42.35%)的带菌率具显著性差异(P<0.01)。GBS阳性者与阴性者的临床症状发生率(18.75%、7.98%)也具有显著性差异(P<0.01);万古霉素、利奈唑胺、青霉素等10种抗菌药物的耐药率为0%~58.1%,D-抑菌圈试验阳性率为23.9%。结论:本研究中围生期孕妇GBS带菌率较高,以高龄者易于感染,感染GBS者对万古霉素、利奈唑胺、青霉素、氨苄西林、头孢曲松及呋喃妥因敏感率高(89.8%~100.0%)。
B族链球菌;围生期孕妇;带菌率;药敏试验
优先数字出版地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/51.1688.R.20160624.1117.006.html
B族链球菌(group BStreptococcus,GBS)也称无乳链球菌,是一种β溶血的需氧革兰阳性链球菌。GBS主要定植于人的阴道和肛门周围,此区域的GBS是孕妇和新生儿感染的主要致病菌之一。大部分新生儿感染GBS与母婴垂直传播关系密切[1]。GBS可导致孕妇的泌尿系统感染、产褥感染及产后败血症等,还与孕妇胎膜早破[2]、早产、晚期流产以及胎儿生长受限、新生儿感染等一系列母婴不良结局有关,GBS是围生期感染的首要致病菌之一[3]。为了降低围生期孕妇感染及不良妊娠结局,应采取积极有效的预防和治疗措施。本研究对围生期孕妇生殖道GBS的感染与耐药性进行分析,现报告如下。
1 材料与方法
1.1研究对象2013年1月至2015年2月,选择在门诊就诊或产科住院的围生期孕妇795例。孕期35~37周,年龄21~38岁,其中:≥30岁组196例,<30岁组599例。排除2周内有抗生素摄入史和(或)并发复杂内科疾病的孕妇。本研究取得所有孕妇的知情同意,符合医学伦理学要求。
1.2试剂与仪器 哥伦比亚血琼脂基础培养基和5%绵羊血Mueller-Hinton(MH)琼脂培养基均为上海科玛嘉微生物技术有限公司产品,菌株鉴定采用法国生物梅里埃公司VITEK2全自动细菌鉴定分析仪及配套的相关鉴定和药敏卡片(万古霉素、利奈唑胺、青霉素、氨苄西林、头孢曲松、呋喃妥因、左氧氟沙星、克林霉素、红霉素及四环素)。质控菌株为肺炎链球菌ATCC49619,购于卫生部临床检验中心。D-抑菌圈试验使用英国OXOID公司的纸片(15 μg红霉素纸片和2 μg克林霉素纸片)。
1.3方法 标本采集:由妇产科医生采集生殖道分泌物标本,孕妇在取样前2周内未使用任何抗菌药物,取样部位未使用过栓剂和洗液,不作清洁处理,使用消毒窥器(未经湿润的)扩张阴道,以无菌棉拭子涂擦阴道下1/3分泌物,30 min内送检。试验方法:送检的无菌棉拭子接种于哥伦比亚血琼脂基础培养基上,在35 ℃的5% CO2培养箱中孵育18~24 h。观察血平板上菌落特点,挑选、挑取可疑菌落,在血平板上进行分纯培养。然后再进行涂片、革兰染色镜检、菌株鉴定及药敏试验。鉴定方法按全国临床检验操作规程进行[4],判读标准依据2012年美国临床试验室标准化协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)M100-S22文件[5]。对红霉素耐药和克林霉素敏感或中介的GBS菌株采用纸片扩散法进行D-抑菌圈试验,培养基为MH琼脂,纸片间距离12 mm,置35 ℃的5%CO2培养箱中孵育20~24 h。
1.4统计学分析采用SPSS19.0软件进行统计分析,计数资料比较采用配对χ2检验。
2 结 果
2.1围生期孕妇GBS带菌率795例孕妇中共检出GBS携带者256例,带菌率32.20%。256例GBS阳性者中,<30岁者173例,≥30岁者83例,<30岁组孕妇GBS带菌率28.88%(173/599),≥30岁组孕妇GBS带菌率42.35%(83/196),2组的带菌率具显著性差异(χ2=19.095,P<0.01)。
2.2临床表现本研究以具有阴道分泌物增多、尿频和阴道瘙痒3种临床症状中1种或以上判为具有GBS定植的临床表现。256例GBS阳性者中,48例具有临床症状,发生率为18.75%;539例GBS阴性者中43例具有临床症状,发生率为7.98%,两者的临床症状发生率具显著性差异(χ2=39.514,P<0.01)。
2.3围生期孕妇感染GBS的耐药性分析256株GBS阳性标本全部进行药敏试验,10种抗菌药物耐药率见表1。以万古霉素、利奈唑胺、青霉素、氨苄西林、头孢曲松及呋喃妥因敏感率为高(89.8%~100.0%)。
表1 256例围生期孕妇感染GBS的药敏试验结果
2.4D-抑菌圈试验结果256株GBS中对红霉素耐药、克林霉素敏感或中介的菌株共71株,其中17株D-抑菌圈试验阳性,阳性率为23.94%。
3 讨 论
GBS是一种条件致病菌。当机体内环境紊乱或微生态平衡遭到破坏时,可发生感染,引起人类的多种疾病。妊娠期GBS可导致母婴感染,是新生儿败血症、肺炎和脑膜炎最常见的病因[6-7]。阴道分泌物增多、尿频和阴道瘙痒是GBS定植孕妇最常见的3种临床症状。本研究GBS阳性者临床症状发生率显著高于GBS阴性者,但仅据临床症状难以确诊GBS感染。
试验室诊断GBS感染最经典的常规方法是细菌培养,不足之处是GBS的分离培养与鉴别诊断的操作过程较为复杂,耗时较长;血清学GBS检测可短时间内获得结果,不足之处是假阴性率和假阳性率高。2者在临床应用时均受到限制。荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)检测GBS,具有快速、准确及敏感性高的特点[8-10],目前只有三级医院开展此项目检测。对于条件较差的二级医院,细菌培养仍是诊断GBS感染的常规方法。
为了有效降低围生期感染率,应对孕妇进行GBS筛查。GBS带菌率的检测受检测方法、采集部位、采集时间、种族等的影响,在不同的国家、不同的地区差异性较大。如我国北京地区孕妇带菌率为7.10%[11],上海地区孕妇带菌率为3.70%[12],桂林地区为7.50%[13]、江西地区为8.76%[14]、秦皇岛地区为9.50%[15]、南京地区为4.2%[16]。本研究采用细菌培养方法对本地795例孕妇进行了检测,总带菌率为32.2%,明显高于以上地区,与汉中地区的36.0%相近[17]。其中≥30岁组孕妇GBS带菌率显著高于<30岁组,可能原因为:≥30岁妇女较<30岁妇女存在性生活活跃、发生人工流产的概率高、人数多,以及妊娠期雌激素水平较高等。上述因素均可导致生殖道细菌的微环境发生改变,使得≥30岁孕妇生殖道中的GBS易于生存与繁殖。
对GBS携带孕妇应采取积极有效的预防和治疗措施。有效的抗生素可治疗围生期孕妇感染GBS,减少新生儿感染及降低新生儿死亡率[18]。美国疾控中心推荐青霉素G、氨苄青霉素预防性治疗妊娠期GBS,对青霉素变态反应者可以采用克林霉素或红霉素[18]。本研究分离出的256株GBS对10种抗菌药物耐药率为0%~58.1%。其中,万古霉素、利奈唑胺、青霉素、氨苄西林、头孢曲松及呋喃妥因的敏感率为89.8%~100.0%,左氧氟沙星、克林霉素、红霉素及四环素的敏感率为18.9%~69.9%,与国内相关研究敏感率一致[19-20]。临床治疗围生期孕妇感染GBS可根据药敏试验结果选择、调整使用敏感药物,对预防、控制围生期孕妇感染GBS是很有必要的。国内高晶等[21]推荐分娩期妇女预防GBS感染可使用青霉素或氨苄西林。
综上所述,本研究中围生期孕妇GBS带菌率较高,高龄孕妇易于感染GBS,敏感药物为万古霉素、利奈唑胺、青霉素、氨苄西林、头孢曲松和呋喃妥因,此为更加准确有效地治疗GBS感染提供了依据。孕龄期携带GBS的妇女,其围生期可感染GBS或加重感染,应积极采取有效的预防与治疗措施。
[1]张丽琴,肖九长,李世云.阴道分泌物的细菌分离鉴定及耐药性分析[J].试验与检验医学,2012,30(4):389-391.
[2]张利侠,吴桂清,秦利,等.围产期发生胎膜早破的多因素分析[J].现代检验医学杂志,2013,28(6):142-143, 146-147.
[3]LIVENGOOD C H. Bacterial vaginosis: an overview for 2009[J]. Reviews in Obstetrics and Gynecology, 2009, 2(1): 28-37.
[4]时春艳,曲首辉,杨磊,等.妊娠晚期孕妇B族链球菌带菌状况的检测及带菌对妊娠结局的影响[J].中华妇产科杂志,2010,45(1):12-16.
[5]Clinical Laboratory Standards Institute. Performance standards for antimicrobial susceptibility testing[S]. 2012: MS22-M100.
[6]杨军岭,马双婧子.围生期B族链球菌感染现状及其耐药性分析[J].山西医药杂志:下半月刊,2013,42(10):1184-1185.
[7]曲业敏,马淑青,李彬彬.围产期B族链球菌感染及预防的研究进展[J].中国微生态学杂志,2014,26(11):1356-1358, 1361.
[8]边佳明,丁媛媛,杨凡,等.拭样增菌对实时荧光PCR法检测孕妇B族链球菌感染的影响[J].现代检验医学杂志,2012,27(6):102-104.
[9]李亚梅,张利侠,秦利,等.围产期孕妇B族链球菌的感染和耐药性检测及对妊娠结局的影响[J].现代检验医学杂志,2013,28(1):87-89.
[10]PARK J S, CHO D H, YANG J H, et al. Usefulness of a rapid real-time PCR assay in prenatal screening for group Bstreptococcuscolonization[J]. Annals of Laboratory Medicine, 2013, 33(1): 39-44.
[11]鲁炳怀,李雪清,时琰丽.477例孕晚期妇女宫颈分泌物携带细菌的分布和耐药分析[J].临床检验杂志,2011,29(2):155-156.
[12]陈慧慧,范建霞,陆庭嫣,等.孕妇B族溶血性链球菌感染对母婴的影响[J].上海医学,2009,32(2):128-130.
[13]何国才,白清,李高,等.桂林地区孕晚期孕妇B族链球菌检测及药敏分析[J].国际检验医学杂志,2013,34(15):2006-2007.
[14]黄永建,陈波,张勇,等.孕晚期妇女B族链球菌PCR检测结果分析[J].江西医药,2013,48(7):581-584.
[15]孙丹华,王李利,张磊,等.妊娠35~37周孕妇B族链球菌带菌与妊娠结局[J].中国妇产科临床杂志,2013,14(4):312-314.
[16]季修庆,陆根生,胡平,等.荧光定量PCR检测南京地区孕晚期妇女生殖道B族链球菌的带菌情况[J].检验医学,2014,29(6):628-630.
[17]王彦春,何三军.汉中地区孕妇生殖道B族链球菌定植和防御素水平的相关性研究[J].现代检验医学杂志,2013,28(5):87-88, 92.
[18]VERANI J R, MCGEE L, SCHRAG S J, et al. Prevention of perinatal group B streptococcal disease-revised guidelines from CDC, 2010[J]. MMWR. Recommendations and Reports : Morbidity and Mortality Weekly Report. Recommendations and Reports/Centers for Disease Control, 2010, 59(RR/10): 1-36.
[19]丁茜,李超强,张丽华.B群链球菌的耐药性及其感染的临床特点[J].中国医药,2011,45(4):434-435.
[20]陈惠玲,邓家德,叶惠芬.围产期生殖道感染B族溶血性链球菌的耐药性及耐药基因检测[J].中华妇产科杂志,2010,45(9):701-703.
[21]高晶,刘晓艳.女性泌尿生殖道无乳链球菌的耐药性分析[J].检验医学,2015,30(1):13-16.
Group BStreptococcusInfection in Genital Tract of Perinatal Pregnant Women and its Drug Resistance Analysis
LIU Li1, YANG Wendong2
(1.Maternal and Child Health Care of Family Planning Service Center of Dongying District, Shandong Dongying 257091,China; 2.Second People’s Hospital of Lijin County, Dongying, Shandong 257447,China)
Objective:To analyze the group BStreptococcus(GBS) infection in genital tract of perinatal pregnant women and its drug resistance, and to provide a reference for treating and preventing this infection. Methods: From January 2013 to February 2015, the vaginal secretions were sampled from 795 perinatal pregnant women for culture of GBS; the final results were statistically analyzed. Results: In 795 pregnant women, there were 256 GBS carriers; the germ-carrying rate was 32.20%. There was a significant difference in the germ-carrying rate between < 30 years old group (28.88%) and ≥ 30 years old group (42.35%)(χ2=19.095,P<0.01).The incidence of clinical symptoms between GBS negative cases and GBS positive ones (18.75%, 7.98%) also had statistical difference(χ2=39.514,P<0.01). The antimicrobial resistant rate of vancomycin, linezolid,penicillin,ampicillin,ceftriaxone, nitrofurantoin,levofloxacin, clindamycin,erythromycin and tetracycline to GBS was 0,0,0.6%,3.1%,6.6%,9.6%,21.9%,23.8%,29.9% and 58.1%,respectively. The positive rate of D-bacteriostatic ring test was 23.9%. Conclusion: The GBS-carrying rate of perinatal pregnant women is higher in this region, and the elderly is relatively vulnerable. GBS are highly sensitive to vancomycin, linezolid, penicillin, ampicillin, ceftriaxone and nitrofurantoin in perinatal pregnant women.
group BStreptococcus(GBS); perinatal pregnant women; germ-carrying rate; drug sensitive test
2015-09-06)
杨文东,yangwendong007@126.com
R714.7;R446.5
A
10.11851/j.issn.1673-1557.2016.04.009