鼠李糖乳杆菌(H0107)通便效果试验
2016-08-15余萍李雪龙
余萍 李雪龙
摘要:为扩大鼠李糖乳杆菌(H0107)在微生态制剂方面的应用,采用对比试验的方法,通过建立小鼠便秘模型来评价其通便效果。试验结果显示:鼠李糖乳杆菌安全性高,2.8 g/kg剂量下连续灌胃7 d无毒性反应,且对便秘模型有一定的通便效果。
关键词:鼠李糖乳杆菌;小鼠模型;对比试验;通便
中图分类号:Q93 文献标识码:A 文章编号:1674-1161(2016)05-0048-02
近年来,随着人们健康意识的逐步增强,食品、保健品、医药的安全性越来越受到人们关注。目前,含有益生菌的微生态制剂及食品正作为一个新领域逐步被研究和开发。鼠李糖乳杆菌(L.rhamnosus)从属于乳杆菌,具有调节微生态平衡、增强宿主肠道抵抗力、预防和治疗腹泻、消除过敏态的功能,可作为益生菌用于生产微生态制剂和功能性乳制品,在发酵食品领域具有广泛的应用前景。
通过建立小鼠便秘模型来评价鼠李糖乳杆菌(H0107)的通便效果,为该菌种在微生态制剂方面的应用提供数据支持。
1 材料与方法
1.1 菌种
鼠李糖乳杆菌菌株H0107:分离于婴儿粪便,研究室保存。
1.2 试验动物
昆明小鼠(KM)4~5周龄,18~22 g,37只,雄性。
1.3 试剂及仪器
蒸馏水、活性炭粉、盐酸洛哌丁胺、阿拉伯树胶、直尺、分析天平、研钵。
1.4 试验方法
1.4.1 试验动物分组 根据体重随机对试验动物进行分组,分组及给药方案详见表1。
1.4.2 试验步骤 墨汁配置:称取阿拉伯树胶100 g,加水800 mL,煮沸至溶液透明,称取活性炭(粉状)50 g加至上述溶液中,煮沸3次,溶液凉后加水定容到
1 000 mL,于冰箱(4 ℃)中保存,用前摇匀。
盐酸洛哌丁胺溶液的配制(浓度0.8 mg/mL):取盐酸洛哌丁胺颗粒10袋(每袋含盐酸洛哌丁胺1 mg),溶于12.5 mL水,临用前配制。
建模:小鼠平衡饲养后,根据方案对动物给药。给药7 d后,各组动物禁食16 h,但不禁水。模型对照及鼠李糖乳杆菌组灌胃给予盐酸洛哌丁胺(8 mg/kg、10 mL/kg)溶液,溶剂对照组给予蒸馏水。
墨汁推进率计算:给盐酸洛哌丁胺后0.5 h,治疗组给予含鼠李糖乳杆菌的墨汁(含5%的活性炭粉、10%阿拉伯树胶),溶剂和模型对照组给墨汁灌胃。25 min后处死小鼠,分离小肠系统(上端至幽门、下端至回盲部的肠管),测量肠管长度为“小肠总长度”,从幽门至墨汁前沿为“墨汁推进长度”。
墨汁推进率计算公式为:
墨汁推进率(%)=×100%
2 结果与分析
应用SPSS17.0软件中的One-Way-Anova程序对墨汁推进率进行组间统计学分析。
给予鼠李糖期间,鼠李糖各组试验动物体重保持增长,未见下降,与溶剂对照组体重增长趋势相同,且动物未见异常。说明连续7 d在2.8 g/kg剂量下,鼠李糖未表现出毒性,安全性高。
由溶剂及模型对照组墨汁推进率(75%,48%)可知,便秘模型造模成功,但各造模组试验动物小肠均出现水潴留、肠壁透明现象。此现象的发生,为盐酸洛哌丁胺的独特作用还是各造模药物均会出现,需要后续试验判断验证。
模型对照组、鼠李糖乳杆菌(0.8 g/kg)组、鼠李糖乳杆菌(1.6 g/kg)组、鼠李糖乳杆菌(2.8 g/kg)组的墨汁推进率分别为48%,59%,55%,55%,说明鼠李糖各组对便秘模型都有一定的通便效果。
鼠李糖乳杆菌(H0107)各组之间的墨汁推进率并无统计学差异,未表现出量效关系。这可能是由造模剂量偏大引起的,也可能是由于在0.8 g/kg剂量下,鼠李糖乳杆菌(H0107)已达到最优通便效果造成的,需要后续试验验证。
3 结论
通过对鼠李糖乳杆菌(H0107)进行小鼠试验,证明鼠李糖乳杆菌(H0107)安全性高,2.8 g/kg剂量下连续灌胃7 d,无毒性反应,且对便秘模型有一定的通便效果。试验结果为鼠李糖乳杆菌(H0107)在保健品及乳制品中的开发奠定良好基础。
参考文献
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[2] 李海洋,韩军岐,徐长亮.鼠李糖乳杆菌乳酸发酵特性及碳氮源研究[J].乳业科学与技术,2012(2):17-20.
[3] 赵乙桢,沈雷,孙亚链,等.鼠李糖乳杆菌ZJ225细菌素的分离纯化及其特性研究[J].中国食品学报,2015(7):54-60.
Abstract: In order to extend the application range of LGG(H0107) in probiotics field, taking advantage of the contrast test method,in this paper it evaluated the catharsis effect by establishing constipated mice models. The experimental results showed that: LGG is of high safety; There was non-toxic reaction for rats in the dose of 2.8g/kg by gavage for 7 days; Also it had the catharsis effect to models in constipation.
Key words: LGG; mouse model; contrast test; catharsis