降钙素基因相关肽对心肌肥厚影响机制的研究



降钙素基因相关肽对心肌肥厚影响机制的研究

张欣,范晓梅,纳仁高娃,薛明明

(内蒙古医科大学基础医学院生理学教研室, 内蒙古 呼和浩特010110)

Study on influence mechanism of calcitonin gene related protein on cardiac hypertrophy

ZHANG Xin, FAN Xiao-mei, NA REN Gao-wa, XUE Ming-ming

(PhysiologyTeachingandResearchSectionofBasicMedicalSciences,InnerMongoliaMedicalUniversity,Hohhot010110,China)

中国图书分类号：R-332；R322.11；R331.31；R341.6；R542.202.2

关键词：降钙素基因相关肽；压力超负荷；心肌肥厚； 内皮素； 肿瘤坏死因子;左心系数

Key words:calcitonin gene related protein; pressur overload; cardiac hypertrophy; endothelin; tumor necrosis factor; left ventricular mess index

降钙素基因相关肽(calcitonin gene related protein, CGRP)是迄今为止发现的最强的一种内源性舒血管物质[1], 对心血管系统具有重要的生理调节作用, 但对肥厚心肌有无逆转作用目前尚未阐明。本研究采用外源性CGRP干预心肌肥厚大鼠，观察干预后心肌肥厚程度的变化和心肌组织中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)、内皮素(endothelin, ET) 含量的变化，进一步探讨CGRP对心肌肥厚的影响及可能机制。

1材料

1.1动物与分组60只♂健康Wistar大鼠,3月龄，体质量200~250 g，由内蒙古大学实验动物中心提供。随机分为3组：对照组、缩窄组、CGRP干预组。

1.2药物和试剂戊巴比妥钠(华北制药厂)；CGRP(批号：RP11095，金思特科技有限公司)；TNF-α、ET放射免疫分析试剂盒(北京东雅生物技术研究所)。

1.3仪器BP-6动物无创血压测试仪(成都泰盟)；GC-911-γ全自动放免分析仪(中国科技大学开发研究中心)；Olympus光学显微镜(日本)。

2方法

2.1模型制备采用Anderson方法制作压力超负荷心肌肥厚大鼠模型[2]。术前禁食禁水12 h，称重后，用戊巴比妥钠(0.06 mg·g-1)腹腔注射麻醉[3]，左肋缘沿腰大肌外缘做长约2 cm的一斜行切口，于肾动脉上方分离一小段腹主动脉，用4号手术线连同8号针头共同结扎，然后抽去针头，往腹腔滴约1 mL的青、链霉素溶液，关腹。对照组实行假手术，只穿线不结扎。

2.2给药方法术后1周给药，CGRP干预组腹壁皮下注射CGRP 8 μg·kg-1·d-1[4]，对照组与缩窄组腹壁皮下注射与体重相匹配的生理盐水，每天1次。

2.3动脉收缩压(SBP)的测定术后1周开始，每天同一时间用BP-6动物无创血压测试仪检测大鼠尾动脉动脉血压，重复测量3次, 取平均值,以kPa(1 mm Hg=0.133 kPa)为单位。

2.4心肌组织标本处理给药4周后，处死大鼠，取出心脏，去除心房及右心室组织，保留左心室及室间隔，去除左室壁脂肪和结缔组织，生理盐水清洗，滤纸吸干，称重，计算左心系数(左室重/体重比,LVW/ BW, mg·g-1) 。由左心室游离壁中部，分别纵行切取部分心肌组织，制作常规HE染色切片，Olympus光学显微镜下观察左心室肌组织结构的变化，并进行显微照相。其余的左心室组织用于检测心肌中TNF-α、ET的含量，操作步骤严格按放免试剂盒说明书进行。

3结果

与对照组相比, 缩窄组大鼠 SBP、LVW/BW 及心肌中 TNF-α与 ET水平明显升高(P<0.05), 心肌中 TNF-α、ET水平与左心系数呈正相关。CGRP干预组与缩窄组相比, SBP、LVW/BW 及心肌中TNF-α、 ET 水平均明显降低(P<0.05)。左心室心肌组织病理学改变也发现CGRP组心肌纤维横径及细胞核较缩窄组缩小，间质增生程度较缩窄组明显减轻。

4讨论

CGRP是迄今发现的舒血管作用最强的内源性物质,我们的实验通过外源性补充CGRP，来观察CGRP对高血压心肌肥厚形成过程的影响。结果表明，用CGRP干预后，心肌肥厚大鼠SBP、左心系数、心肌中TNF-α、ET的含量明显降低，提示CGRP通过其降低血压、拮抗心肌中TNF-α、ET的生成，从而逆转心肌肥厚，这就表明通过外源性及时补充因压力超负荷引起的CGRP不足，可以预防和逆转高血压心肌肥厚。其机制可能一方面通过减轻心脏后负荷, 从而改善血流动力学因素对心肌重构的影响；另一方面可能通过降低心肌组织 ET、TNF-α合成和分泌，从而阻止TNF-α、 ET、CGRP、调节紊乱的发生，而起到抑制心肌肥厚的作用。CGRP又是机体内源性的舒血管物质, 作为抗高血压心肌肥厚的辅助用药安全,无副作用，具有广阔的临床应用前景。

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文献标志码：A

文章编号：1001-1978(2016)02-0294-02

doi:10.3969/j.issn.1001-1978.2016.02.029

作者简介：张欣(1980-)，女，博士生，讲师，研究方向：心血管药理学，E-mail：zxcc.aa@163.com;薛明明(1973-),女，硕士，教授,研究方向：心血管药理学，通讯作者，Tel:0471-6657031,E-mail：happybird-nmg@163.com

基金项目：内蒙古自治区自然科学基金资助项目(No 2012MS1125)

收稿日期:2015-09-25,修回日期:2015-10-22

网络出版时间：http://www.cnki.net/kcms/detail/34.1086.R.20160125.1557.058.html

网络出版地址：2016-1-25 15:57