复方南星止痛膏中多成分含量测定方法研究

2016-08-05管大平

哈尔滨医药 2016年2期

关键词：气相色谱

杨　惠　管大平

(1.安徽省铜陵市食品药品稽查支队，安徽铜陵 244000；2.安徽省铜陵市食品药品检验中心，安徽铜陵 244000)

复方南星止痛膏中多成分含量测定方法研究

杨惠1管大平2

(1.安徽省铜陵市食品药品稽查支队，安徽铜陵 244000；2.安徽省铜陵市食品药品检验中心，安徽铜陵 244000)

摘要目的建立同时测定复方南星止痛膏中桂皮醛、樟脑、冰片、丹皮酚含量的方法。方法采用气相色谱法，PEG-20M毛细管柱，FID检测器，程序升温测定四种成分含量。结果桂皮醛、樟脑、冰片、丹皮酚分别在0.02～20 mg/mL、0.05～50 mg/mL、0.05～50 mg/mL、0.05～50 mg/mL范围内线性关系良好；桂皮醛平均加样回收率为96.35%(n=6)，RSD=0.8%。结论该方法操作简单，重现性好，可用于复方南星止痛膏中桂皮醛、樟脑、冰片、丹皮酚的含量测定。

关键词复方南星止痛膏；多成分；气相色谱

文章编码：1001-8131(2016)02-0151-02

复方南星止痛膏收载于国家食品药品监督管理局国家药品标准零散标准，主要成分有生天南星、生川乌、丁香、肉桂、徐长卿、樟脑、冰片等12味[1]，具有散寒除湿，活血止痛的功效，主要用于寒湿瘀阻所致的关节疼痛，肿胀，活动不利，遇寒加重[2]。标准中只有次乌头碱、丁香酚的含量测定项目，而与此两种成分功效(镇痛、抗炎)类似的桂皮醛、樟脑、冰片抗、丹皮酚四种成分则无含量控制。本实验采用气象色谱法同时测定上述四种成分含量[3-4]，可进一步控制复方南星止痛膏的质量。

1仪器与试药

1.1仪器：AB135-S电子天平(0.01 mg)、GB-204电子天平(0.1 mg)(梅特勒-托利多)；GC-2010 plus气相色谱仪；色谱柱：PEG-20M(型号：RTX-WAX，美国RESTEK公司)；检测器：FID ；色谱工作站：GC-Solution工作站。

1.2试药：复方南星止痛膏(江苏南星药业有限责任公司,批号：140207、140608、141108)；乙酸乙酯(AR)、纯化水；桂皮醛、樟脑、冰片、丹皮酚(中国食品药品检定研究院，供含量测定用)。

2方法与结果

2.1色谱条件[5]毛细管色谱柱(25 m，内径0.25 mm，膜厚0.25 μm)：以聚乙二醇(PEG-20M)为固定相，涂布浓度为10%(型号：RTX-WAX，美国RESTEK公司)，程序升温，起始温度90 ℃保持1min，终止温度190 ℃，升温速率4 ℃/min。分流体积比(1/30)。

2.2供试品溶液的制备：取本品4片，除去盖衬，刮下药膏，精密称定，置500 mL烧瓶中，加水250 mL，连接挥发油测定器，自测定器上端加水充满刻度部分，并溢入烧瓶为止，再加醋酸乙酯2 mL，连接回流冷凝管，缓缓加热至沸，并保持微沸4 h，将挥发油测定器中的溶液移至分液漏斗中，分取醋酸乙酯层，水层用醋酸乙酯提取3次，再用醋酸乙酯多次洗涤挥发油测定器和分液漏斗，合并醋酸乙酯液，转移至25 mL，量瓶中，加醋酸乙酯至刻度，摇匀，即得。

2.3对照品溶液的制备：取桂皮醛、樟脑、冰片、丹皮酚对照品适量，精密称定，分别加乙酸乙酯配制成每2 mg/mL，5 mg/mL，5 mg/mL，5 mg/mL的溶液。

2.4阴性样品溶液的制备[6]：按处方制备不含肉桂、徐长卿、樟脑、冰片的阴性样品，照“2.2”供试品溶液的制备方法制得阴性样品溶液。

2.5线性关系的试验[7]：精密称取桂皮醛、樟脑、冰片、丹皮酚对照品，桂皮醛用乙酸乙酯制成20 mg/mL的溶液；樟脑、冰片、丹皮酚用乙酸乙酯制成50 mg/mL的溶液摇匀。分别精密吸对照品溶液1μL注入气相色谱仪中，以进样量为横坐标，色谱峰面积为纵坐标，经线性回归，表明桂皮醛在0.02～20.00 mg/mL；樟脑、冰片、丹皮酚在0.05～50.00 mg/mL范围内线性关系良好(进样量1 μL，分流体积1/30)。2.6精密度试验：精密吸取2.3项下对照品溶液1 μL重复进样5次，测得桂皮醛、樟脑、冰片、丹皮酚峰面积的RSD为0.7%，0.5%，0.9%，0.8%(n=5)，结果表明仪器精密度良好。

2.7样品测定：取样品，按照供试品溶液的制备方法制备供试品溶液，分别取供试品溶液及对照品溶液各1μL进样测定峰面积，用外标法(以峰面积)计算含量，结果见表1、图1，图2。

表1　样品含量测定结果(%)

2.8稳定性试验：取供试品溶液[8]，分别在0 h，2 h，4 h，6 h，8 h，10 h进样1μL，测得桂皮醛、樟脑、冰片、丹皮酚峰面积的RSD均小于1.0%(n=6)。实验结果表明，供试品溶液在10 h内稳定性良好。

图1 对照品色谱图

图2 样品色谱图

2.9重复性试验[9]：精密称取同一批样品(批号：140207)5份，照“2.2”项下方法制备供试品溶液，进样1 L 测定，桂皮醛、樟脑、冰片、丹皮酚，RSD均小于1.0%(n=5)。表明分析方法重现性好。

2.10加样回收率试验[10-11]：精密称取已知含量的同一批号样品(批号：140207)5份，每份约16 ，分别精密加入桂皮醛对照品10.12 mg，按“2.2”项下供试品溶液的制备方法制备供试品溶液，进样1 μL测定峰面积，计算回收率，结果见表2。同时对樟脑、冰片、丹皮酚等对照品按照上法进行加样回收率试验，回收率均在96.35%(n=6)，RSD=0.8%。

表2　桂皮醛加样回收率试验结果

3讨论

中成药疗效的发挥通常都是多种成分协同作用的结果，处方中各味中药的剂量和比例会影响药效，多指标质量控制方法不仅能反映制剂的工艺水平，在一定程度上也能反映所有药材的质量，通过对多指标成分的分离测定还可以客观反映传统中药的配伍状况，更符合中医理论。本试验采用气相色谱法测定复方南星止痛膏中多成分的含量，可以更好地表征其内在质量，该法回收率高，分离效果好，操作简便，方法可行。

参考文献

[1]谈莹莹.复方南星止痛膏外治膝骨关节炎寒湿痹阻证的疗效观察[J].常州实用医学，2014，5：315-316.

[2]刘绍凡.复方南星止痛膏对急性闭合性软组织损伤临床观察[J].中国中医急症，2013，7：1243.

[3]许冬梅.顶空气相色谱质谱法同步测定污水厂中17种挥发性有机物[J].福建分析测试，2015,2：10-11.

[4]段和祥，程奇珍，杨毅生，等.气相色谱法测定止汗搽剂中苯酚和乙醇的含量[J]. 中国医药科学，2015,3：96.[5]姜维新，张金坦，吴剑锋，等.安捷伦6820气相色谱仪问题峰处理及其运行改进措施[J].化工管理，2015,7：148-149.

[6]国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].一部.北京：化学工业出版社.2010，附录130.

[7]国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].一部.北京：化学工业出版社.2010，附录38.

[8]杨雪萍，刘卫，孙昕，等.钩藤总碱中钩藤碱和异钩藤碱定量方法的建立及稳定性试验[J].实用医药杂志,2012,29(3)：121.

[9]陈晓鹏，谭锦萍，郦明浩，等.GC-MS法测定高脂食品中富马酸二甲酯[J].广东化工:2015,5：47.

[10]马千华.冠心苏合咀嚼片中冰片含量测定方法研究[J].鸡西大学学报：综合版，2015，1： 150-151.

[11]吴丹，张辰辰，杨继章，等.气相色谱-质谱法测定香桂化浊胶囊中桂皮醛的含量[J].医药导报，2015,3：376-377.

[中图分类号]R917