不同处理对葡萄多糖提取率的影响

2016-07-31谭超

花卉 2016年18期

关键词：干燥箱液料乙醇

谭超

（安康学院现代农业与生物科技学院陕西安康 725000）

不同处理对葡萄多糖提取率的影响

谭超

（安康学院现代农业与生物科技学院陕西安康 725000）

为获得葡萄多糖提取的最佳条件，本研究以新鲜户太8号葡萄为材料，采用水提醇沉法对不同的提取温度、液料比、乙醇体积进行单因素实验，并在此基础上采用三因素三水平正交试验对提取条件进行优化。结果表明，温度为80℃，液料比为1：2，浓缩液的6倍体积的95%乙醇进行沉淀可得到较好的提取效果。

葡萄；多糖提取

引言

多糖类物质广泛存在于动植物和微生物体内，具有一定的抗癌、抗病毒、降血压、降血脂等作用，且对生物体内正常细胞没有危害。葡萄中含有大量多糖，类物质对正常细胞无毒副作用，且具有多种生物活性，能够激活免疫细胞，提高机体的免疫功能，逐渐引起人们越来越高的重视。本研究对葡萄多糖提取中温度、液料比、乙醇的量三个因素进行了分析，为葡萄种质资源的充分利用提供一定科学依据。

1 材料与方法

1.1 材料

新鲜成熟的户太8号葡萄，每天上午10时采摘，摘后立即预冷，未使用的材料4℃冷藏。

1.2 试剂

无水乙醇。

1.3 主要设备

打汁机、电热恒温水浴锅、电子天平、旋转蒸发器RE-52A（上海亚荣生化仪器厂）、DZ-2A型真空干燥箱（天津市泰斯特仪器有限公司）、SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）、0406-1型台式低俗离心机（上海医疗器械有限公司手术器械厂）。

1.4 试验方法

称取3份清洗干净的葡萄果实，每份100g，用打汁机捣碎并记录混合液体积，然后加入蒸馏水浸提多糖。浸提温度梯度分别为 70℃、80℃、90℃和 95℃，浸提料液比分别为 1：1、1：2和 1：3，浸提2h后12000rps离心10min，并重复1次，将两次离心所得上清液合并后置于真空干燥箱。浓缩至破碎打浆后体积的12.5%时，加入一定体积的95%乙醇进行沉淀，乙醇体积梯度为4、6、8倍。沉淀产物再次放入真空干燥箱于较低温度下干燥。最后获得固体物质为粗多糖，并计算提取率。

2 结果与分析

2.1 温度对提取率的影响（见表1）

表1显示，葡萄多糖提取率与温度值变化成正比关系，但高于90℃后提取率变化不大；同时，多糖类物质在高温下易分解，所以实际浸提温度不能过高，低温过低又影响多糖提取率。故80℃为较适宜的提取温度。

表1 不同温度的多糖提取率

2.2 料液比对葡萄多糖提取率的影响

表2 不同料液比多糖的提取率

由表2可知，料液比与葡萄多糖提取率呈反比关系，料液从1：1变化为1：2时提取率显著提高，继续降低料液比提取率增加不明显。考虑浸提液过多将导致不易干燥浓缩，故料液比为1：2较为合适。

2.3 乙醇的量对葡萄多糖提取率的影响

表3 不同乙醇体积的多糖提取率

由表3可知，当95%乙醇体积由4倍增加到6倍时提取率增加明显，但8倍体积乙醇的提取率与6倍时没有太大变化。同样出于干燥浓缩难易程度的考量，选用6倍体积的95%乙醇效果较好。

2.4 正交试验

2.4.1 正交试验因素水平设计

称取9份葡萄，每份100g。以上述单因素条件选择实验所得结果为依据，确定温度、料液比、乙醇体积这三个因素的水平。通过L9（33）正交试验，以葡萄多糖的提取率为指标，每组做三个平行试验，得出最佳提取条件（见表4）。

表4 正交实验因素水平表

2.4.2 正交试验结果与分析（见表5～6）

表5 正交试验结果及极差分析

由表5～6可知温度对葡萄多糖的提取率影响最大，其次是液料比，而乙醇体积对多糖的提取率几乎没影响。

3 结语

通过正交试验与极差分析得出在三个影响葡萄多糖提取率的因素（提取温度、料液比和乙醇体积）中，提取温度为主要因素，其次是料液比，而乙醇体积对多糖的提取率影响较小。80℃时多糖的提取率基本达到最大值，继续升温会导致多糖失活，使得提取率几乎不变甚至下降。料液比为1：2时提取率较高。乙醇体积对提取率影响较小，但乙醇体积太少会影响多糖沉淀效果，故以乙醇体积为浓缩液体积的6倍时为宜。