抗复感颗粒的质量标准考察△

2016-07-29龚敏阳伍小燕莫小林黄权芳陈晓明广西中医药大学第一附属医院南宁530023

北方药学 2016年7期

关键词：何首乌陈皮黄芪

龚敏阳　伍小燕莫小林　黄权芳　陈晓明　陈　朝（广西中医药大学第一附属医院　南宁　530023）

抗复感颗粒的质量标准考察△

龚敏阳伍小燕*莫小林黄权芳陈晓明陈朝（广西中医药大学第一附属医院南宁530023）

摘要：目的：考察抗复感颗粒的质量标准。方法：通过薄层色谱法定性鉴别方中黄芪和陈皮，选用高效液相色谱法对大黄素和大黄素甲醚进行定量。结果：定性方法可靠，定量方法准确、精密度和加收率较佳。结论：抗复感颗粒的定性、定量方法能有效控制制剂质量。

关键词：抗复感颗粒黄芪陈皮何首乌大黄素大黄素甲醚

抗复感颗粒是由广西中医药大学第一附属医院自行研制开发的治疗小儿反复呼吸道感染的纯中药医院制剂，临床用于治疗反复呼吸道感染患儿［1］。本方由黄芪、陈皮、何首乌等8味药材组成，其中黄芪为君药，陈皮、何首乌为臣药。对上述三种中药材进行定性研究，对何首乌中有效成分进行含量测定研究。

1材料

Waters 2698型高效液相色谱仪（美国）；Waters光电二级管阵列检测器（美国），Empower色谱工作站，GH252电子分析天平（日本A&D），黄芪、陈皮、何首乌等8味药材（购于广西万宝堂医药有限公司）。黄芪、陈皮、何首乌对照药材、黄芪甲苷、橙皮苷、大黄素标准品购自中国药品生物制品检定所，批号分别为121462－200709、120969－200808、121454－200703、110781－200613、110721－201014、110756-200110。

2方法与结果

2.1黄芪的定性方法［2，3］

2.1.1供试品的制备：取抗复感颗粒10g，加乙醇30mL，加热回流提取1h，过滤，滤液蒸干，残渣加水20mL溶解，注入已处理好的中性氧化铝柱（干法制备，中性氧化铝10g），用40%乙醇30mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水10mL溶解，用水饱和正丁醇提取两次，每次20mL，合并正丁醇（上层），用1%NaOH提取两次，每次10mL，弃去碱液（下层），用正丁醇饱和的水洗至中性，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。

2.1.2取缺黄芪药材制成的样品，同法制成阴性对照溶液。

2.1.3取黄芪对照药材0.1g，同法制得对照药材溶液。

2.1.4精密称取黄芪甲苷，用甲醇制成每毫升含1mg的溶液，制得对照品溶液。

2.1.5各吸取上述溶液2μL，点样于硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水（13∶7∶2）的下层为展开剂，展开，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热10min。供试品溶液和对照药材溶液同一位置显同样斑点，阴性对照无相同斑点。结果见图1。

2.2陈皮的定性方法［2，4］。

2.2.1取抗复感颗粒10g，加甲醇30mL，加热回流提取20min，过滤，滤液蒸干，残渣加水20mL溶解，用醋酸乙酯提取2次，每次15mL，蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。

2.2.2取缺陈皮药材制成的样品，同上法制成阴性对照溶液。

2.2.3取陈皮对照药材0.1g，同上法制得对照药材溶液。

2.2.4精密称取橙皮苷，加甲醇制成每毫升含1mg的溶液，作为对照品溶液。

2.2.5各吸取上述溶液1μL，点样于硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水（9∶3∶0.5）的下层为展开剂，上行展开，晾干，喷以1%三氯化铝溶液，置紫外灯（365nm）下检视。供试品溶液和对照药材溶液同一位置显同样斑点，阴性对照无相同斑点。结果见图2。

2.3何首乌的定性方法［5］。

2.3.1取抗复感颗粒10g，加甲醇30mL，加热回流提取30min，过滤，滤液蒸干，残渣加水20mL溶解，加乙醚10mL提取，蒸干，残渣用甲醇1mL溶解，作为供试品溶液。

2.3.2取缺何首乌药材制成的样品，同法制成阴性对照溶液。

2.3.3称取何首乌对照药材0.2g，同法制得对照药材溶液。

2.3.4称取大黄素，加甲醇制成每毫升含1mg大黄素的溶液，作为对照品溶液。

2.3.5分别吸取上述溶液各1μL，点样于硅胶G薄层板上，以石油醚（60℃～90℃）-乙酸乙酯-甲酸（7∶3∶0.5）为展开剂，上行展开，晾干，置氨水饱和的玻璃缸中，可见光下检识。供试品溶液和对照药材溶液同一位置显同样斑点，阴性对照无相同斑点。结果见图3。

2.4何首乌中大黄素和大黄素甲醚的含量测定［6］

2.4.1色谱条件：色谱柱：Inertsil ODS-SP；流动相：流动相A为甲醇，B为0.1%磷酸水溶液，梯度洗脱，0～20min，A 30%～50%；20～25min，A50%～80%；25～35min，A 80%～100%；35～50min；流速为1mL·min-1，检测波长为483nm，柱温：30℃。

2.4.2精密称取大黄素、大黄素甲醚对照品适量，加甲醇制得含大黄素4.32mg·mL-1、含大黄素甲醚9.60mg·L-1的溶液，得对照品溶液。

2.4.3精密称取抗复感颗粒10g，加入50mL甲醇，加热回流1h，用甲醇补足减失的重量，过滤，弃去初滤液，取续滤液25mL，水浴蒸干，精密加8%盐酸溶液20mL，超声处理5min，加三氯甲烷20mL，水浴加热回流1h，冷却，酸液加三氯甲烷10mL萃取3次蒸干，残渣用甲醇溶解，转移定容至10mL，得供试品溶液。另取用10g缺何首乌的阴性样品，依上法制得阴性溶液。

2.4.4测定方法研究

2.4.4.1专属性：分取对照品溶液、供试品溶液、阴性样品溶液，进样量为10μL，依色谱条件测定，结果阴性样品溶液无干扰，见图3，说明本法专属性良好。

2.4.4.2线性关系：取对照品溶液，进样量设为3、5、7、10、12、15、20、25、30μL按上述色谱条件测定，以峰面积（A）为横坐标，进样量（ng）为纵坐标，计算标准曲线。大黄素的标准曲线为C%= A*9.68×10-5+1.64，R=0.9993，n=9，证明进样量在 12.96～129.6mg·L-1范围内，线性关系良好。大黄素甲醚的标准曲线为C%=A*5.46×10－4+12.8，R=0.9993，n=9，证明进样浓度在28.8～288ng范围内，线性关系良好。

2.4.4.3精密度：依法连续进样对照品溶液6次，计算峰面积，大黄素峰面积的RSD为1.51%（n=6），大黄素甲醚峰面积的RSD分别为2.55%（n=6），证明仪器精密度好。

2.4.4.4稳定性：取供试品溶液，分别于室温下0、2、4、6、8、10h进样10μL，依法测定，记录峰面积，大黄素峰面积的RSD为2.72%（n=6），大黄素甲醚峰面积的RSD分别为2.38%（n=6），表明溶液在10h内稳定。

2.4.4.5重复性：依法制备测定抗复感颗粒6份，计算峰面积，大黄素峰面积的RSD为2.72%（n=6），大黄素甲醚峰面积的RSD 为2.37%（n=6），证明重复性好。

2.4.4.6加样回收率：取已知含量的抗复感颗粒共6份，各精密加入大黄素、大黄素甲醚对照品，依法测定，大黄素的回收率为99.1%，RSD为2.92%（n=6），大黄素甲醚的回收率为95.0%，RSD为2.98%（n=6），证明加样回收率符合规定。