CD16+56+、CD19+、NKT水平表达在原因不明复发性流产中的影响

梁逸仙　林春明　叶锦俊

【摘要】 目的 探讨CD16+56+、CD19+、自然杀伤T细胞（NKT）在原因不明复发性流产（URSA）中的表达情况。方法 30例URSA患者作为观察组， 30例正常女性作为对照A组， 30例正常妊娠孕妇作为对照B组， 对比三组研究对象外周血液中淋巴细胞的表达情况。结果 观察组CD16+56+、CD19+、NKT水平均明显高于对照A组和对照B组（P<0.05）。结论 CD16+56+、CD19+、NKT的高表达在URSA中有着重要意义， 为孕妇的诊断和治疗提供依据。

【关键词】 原因不明复发性流产；CD16+56+；CD19+；自然杀伤T细胞

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.16.013

【Abstract】 Objective To investigate expression of CD16+56+， CD19+ and nature killer T cells （NKT） in unexplained recurrent spontaneous abortion （URSA）. Methods There were 30 URSA patients as observation group， 30 normal women as control group A and 30 normal pregnant women as control group B. Comparison was made on expression of peripheral blood lymphocyte in three groups. Results The observation group had obviously higher CD16+56+， CD19+ and NKT levels than control groups A and B （P<0.05）. Conclusion High expression of CD16+56+， CD19+ and NKT contains important significance in URSA， and they can provide reference for diagnosis and treatment.

【Key words】 Unexplained recurrent spontaneous abortion； CD16+56+； CD19+； Nature killer T cells

NKT是一种具有两面性的T细胞亚群， 其主要的功能是进行免疫调节作用， 如若NKT受到刺激之后会立即分泌大量的巨噬细胞、γ-干扰素等发挥调节作用[1]。在URSA的检测中CD16+56+是检测该种T细胞亚群的主要标志， 本文就对URSA患者外周血样中CD16+56+、CD19+、NKT指标的表达情况进行检测， 现报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选取2014年7月～2015年9月收治的URSA患者共30例作为观察组， 年龄22～38岁， 平均年龄（28.6±4.6）岁， 平均体重（53.9±5.2）kg；选取同期进行检查的正常女性和正常妊娠妇女各30例分别作为对照A组与对照B组， 对照A组平均年龄（28.4±5.2）岁， 平均体重（57.5±5.7）kg；对照B组平均年龄（29.6±6.5）岁， 孕周4～20周， 平均孕周（12.3±2.0）周。观察组入选标准：患者流产次数≥3次， 对夫妻的染色体进行分析和内分泌激素检测结果均正常；无阴道感染性疾病、阴道畸形等病症， 对患者的丈夫或固定性关系者的精液进行分析确保为健康者。观察组排除标准：排除上述情况以外的所有重复性流产的患者， 药物流产的患者及受伤等原因导致流产的患者。

1. 2 检测设备及试剂 实验中所使用的细胞检测仪是由美国BD公司生产的FACSCalibur流式细胞仪；TBNK检测试剂盒均购自美国BD公司， 试剂批号：溶血剂3201886， 破膜剂3321244， TBNK3126647， 鞘液3103115。

1. 3 方法 所有检测标本， 于清晨空腹抽取静脉血获得， 并与15% EDTA二钠进行抗凝， 定容至2 ml， 取适量标本行前期处理后于BD流式细胞仪上机检测CD16+56+、CD19+、NKT水平， 均用鞘流流式细胞仪法进行测定。

1. 4 统计学方法 采用SPSS20.0统计学软件对研究数据进行统计分析。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 采用t检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

观察组CD16+56+、CD19+、NKT水平均明显高于对照A组和对照B组， 差异具有统计学意义（P<0.05）。见表1。

3 讨论

URSA患者病因多未查明， 给治疗带来很多的困扰， 目前在该类患者的诊断检测和治疗方面均没有非常有效的措施， 但是在大量的研究中发现NK细胞和T细胞的表达情况与习惯性流产（RSA）发病相关联。

科学研究表明[2]， NK细胞所占的比例与女性的URSA发病有直接的联系， 通过对患者外周静脉血液中的NK细胞进行标记检测发现， 其中CD16+56+约占90%以上的比例。该种细胞中存在很多的溶细胞颗粒， 对于妊娠期孕妇的胚胎不仅有排斥作用， 甚至有可能直接进行杀伤， 所以会出现重复流产的现象[3， 4]。本次实验中观察组患者的CD16+56+表达量均明显高于正常未孕者和正常妊娠人群， 针对有RSA病史的未孕者其该种细胞的表达量较高的原因， 可以解释为由于某种潜在的致病因素影响所致。

CD19+是B细胞检测的共有标志， 相关的研究资料结果显示URSA患者其外周血液中的CD19+表达量会相对更高， 但是目前在该方面意见还未达成一致[5]， 鉴于此本次实验分别对3种类型的研究对象抽样检测， 结果发现有URSA史或者难免会出现流产的孕妇其血样中的CD19+表达量相较于正常妊娠或者正常女性的表达量明显较高（P<0.05）。

NKT细胞是20世纪80年代发现的一种表达T细胞表面受体的细胞， 具有高度的CD1d限制性， 该细胞在接受抗原刺激后， 在2 h内就有大量的细胞因子产生。在张旸[6]研究中发现正常妊娠的滋养层NKT细胞数量会随着妊娠进行而下降， 而在自发性流产中， NKT细胞数量随着妊娠的进行而呈上升趋势， 这与本文研究结果相一致， 表明NKT细胞数量的增加成熟在URSA过程中具有重要意义。

综上所述， 在 URSA患者的外周血液中其CD16+56+、CD19+、NKT指标的水平表达均明显升高， 因此推测其可能直接参与URSA病变过程， 从而为孕妇的诊断和治疗提供相关的理论依据。

参考文献

[1] 陈卫光， 李秀娟， 牛映红， 等.原因不明习惯性流产患者外周血CD3+CD16+CD56+自然杀伤T细胞的表达及意义. 中华实用诊断与治疗杂志， 2015， 29（7）：657-659.

[2] 李玉华， 陈颖， 孟丽丽， 等.不明原因复发性自然流产患者外周血NK细胞与蜕膜NK细胞检测价值分析.中国妇产科临床杂志， 2015， 16（1）：51-54.

[3] 王和坤， 梁宝珠， 黄显文， 等. NK细胞在不明原因复发性流产诊治研究中的意义. 黑龙江医学， 2015， 39（6）：600-601.

[4] 陈静， 肖成华， 张勇， 等. CD4+、CD25+、CD127 low调节T细胞及CD16+、CD56NK细胞在脑梗死急性期患者外周血中的表达及其关系.脑与神经疾病杂志， 2015， 23（2）：81-84.

[5] 吴军， 李薇， 钱云峰， 等.初诊恶性肿瘤患者外周血CD3+ CD56+ NKT样细胞的检测.实用医学杂志， 2015， 31（5）：756-759.

[6] 张旸.原因不明复发性自发性流产小鼠模型中NKT细胞失调研究.福建医科大学， 2008.

[收稿日期：2016-01-14]