西罗莫司对支气管哮喘患者血清神经生长因子及IL-21的影响

姚国丽，毛伟，张双美，王斌，刘志聪

(湖州市中心医院 呼吸内科，浙江 湖州 313000)

西罗莫司对支气管哮喘患者血清神经生长因子及IL-21的影响

姚国丽Δ，毛伟，张双美，王斌，刘志聪

(湖州市中心医院 呼吸内科，浙江 湖州 313000)

目的 探究西罗莫司对支气管哮喘患者血清神经生长因子(NGF)及白介素21(IL-21)水平的影响。方法 收集湖州市中心医院呼吸科门诊和住院支气管哮喘患者83例，根据治疗方法不同分为对照组和治疗组，其中治疗组42例，对照组41例，2组患者均采取保持酸碱电解质平衡、吸氧解痉、抗生素等实施常规支气管治疗，并应用0.5%雾化吸入沙丁胺醇治疗，治疗组在此基础上服用西罗莫司治疗，治疗结束后对比分析2组患者哮喘发作评分、血清神经生长因子及IL-21水平。结果 治疗后，与对照组相比，治疗组患者哮喘发作评分较低，差异具有统计学意义(P<0.05)；治疗组患者血清神经生长因子水平较低，差异具有统计学意义(P<0.05)；治疗组患者IL-21水平较低，差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 西罗莫司对支气管哮喘患者具有缓解哮喘发作，降低血清神经生长因子及IL-21水平，改善患者病情的功效。

西罗莫司；支气管哮喘；神经生长因子；IL-21

支气管哮喘是一种由于多种炎症细胞以及神经递质参与的气道慢性多发性临床常见的炎症疾病，与免疫原性因素作用相关。据统计，我国哮喘患者超过3000万，其发病率以及病死率呈逐年上升趋势，严重危害人类身心健康，疾病迁延难愈，为患者的家庭以及社会带来了巨大的经济负担以及精神压力[1]。不及时规范的治疗，哮喘有致命危险，因此如何规范化治疗是哮喘疾病发病以及传播控制的关键问题。激素治疗临床使用最为广泛，但长期用药致使患者出现肾上腺皮质抑制、骨质疏松、生长受抑以及口腔念珠菌感染等严重副作用，部分患者存在激素治疗抵抗[2]。为弥补药物存在的不足，急需对新的药物进行研发，近年来，研究学者发现，应用西罗莫司对支气管哮喘患者的临床治疗可以达到快速控制哮喘发作次数，预防复发的效果[3]。由于国内西罗莫司研究课题较少，因此本研究探究西罗莫司对支气管哮喘患者血清神经生长因子及IL-21水平影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2014年10月～2015年8月湖州市中心医院呼吸科门诊和住院支气管哮喘患者83例，男性40例，女性43例，年龄9个月～50岁，平均年龄(34.77±4.11)岁，按照就诊先后顺序，随机分配为治疗组与对照组，其中治疗组42例，男性22例，女性20例，年龄10个月～51岁，平均年龄(34.74±4.32)岁；对照41例，男性18例，女性23例，年龄9个月～48岁，平均年龄(33.62±4.09)岁，2组患者的年龄、性别、临床资料等一般情况基本相仿，差异无统计学意义。

纳入标准：所有患者均符合以下条件：①诊断符合中华医学会呼吸病学分会哮喘学组制定的《支气管哮喘防治指南》[4]中支气管哮喘的诊断标准，具备以下临床特点：反复喘息、气促、咳嗽、胸闷等症状；多与接触变应原、刺激物以及呼吸道感染等原因导致原有症状加剧，伴有呼吸困难；发作时双肺可闻及散在或弥漫性，以吸气为主的哮鸣音；症状可经治疗缓解或自行缓解；具备以下肺功能试验阳性其中1项或多项：支气管激发试验阳性；运动激发试验阳性；支气管舒张试验阳性，FEV1增加≥12%，FEV1增加绝对值≥200 mL；呼气流量峰值1天内或2周内，变异率≥20%；符合以上1～4或4、5；②皮肤点刺试验阳性；③血清过敏原特异性抗体阳性；③患者均为自愿参与本实验，并签署知情同意书。

排除标准：①药物过敏史，接受免疫抑制剂治疗的患者，2周内使用皮质激素；②活动性肺结核、风湿性疾病、严重高血压、糖尿病以及严重心、肝、肾等多脏器功能障碍或衰竭；③合并恶性肿瘤、癫痫等神经系统疾病。

1.2 方法

1.2.1 治疗方法：2组患者入院后进行保持酸碱平衡、维持电解质平衡、吸氧解痉以及给予抗生素等常规支气管治疗，应用0.5%沙丁胺醇[葛兰素史克制药(苏州)有限公司，批准文号：J20140104]治疗，年龄小于4岁1.25 mL，大于4岁0.5 mL，与0.9%NaCl注射液混合后实施雾化吸入方式持续吸入15 min，每天3次，用药3～7 d；治疗组在此基础上采用口服西罗莫司(Pfizer Ireland Pharmaceuticals，注册证号：H20130698)治疗，清晨以水或橙汁一次性送服，口服初始剂量为16～24 mg/(m2·d)，第7～10天剂量为8～12 mg/(m2·d)，7 d为1个疗程，连续用药4个疗程。

1.2.2 观察指标

① 2组患者支气管哮喘发作情况评分：采用评分法比较2组患者治疗前后支气管哮喘发作情况：治疗后，患者无烦躁不安、精神萎靡等精神异常，无喘息、咳嗽、呼吸困难等症状发作者记0分；患者仅出现轻度呼吸急促，无躁动不安以及喘息等记1分；患者出现明显呼吸急促、躁动不安以及喘息等症状记2分；患者出现烦躁不安、精神萎靡等精神异常加重，呼吸极度困难记3分。

② 2组患者神经生长因子水平检测：于患者治疗前后采取空腹外周静脉血5 mL，置于无菌无抗凝管内，静置30 min，3000 r/min 4 ℃低温离心15 min，取上清液，收集标本于-70 ℃冰柜内冷冻保存。实验时，取出并进行解冻，采用美国Biolegend公司NGF检测试剂盒，实施双抗体夹心(ELISA)方法检测患者血清神经生长因子(nerve growth factor，NGF)水平，严格按照试剂盒说明书进行操作。

③ 2组患者IL-21水平检测：于患者治疗前后采取空腹外周静脉血5 mL，置于无菌无抗凝管内，静置30 min，3000 r/min 4 ℃低温离心15 min，取上清液，收集标本于-70 ℃冰柜内冷冻保存。实验时，取出并进行解冻，采用上海森雄生物公司检测试剂盒，实施酶联免疫吸附法(ELISA)方法检测患者血清基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9，MMP-9)水平，严格按照试剂盒说明书进行操作。

2 结果

2.1 2组患者哮喘发作评分比较 研究结果显示，治疗前2组哮喘发作评分比较差异无统计学意义；治疗后2组哮喘发作评分降低，差异有统计学意义(P<0.05)，与对照组相比，治疗组哮喘发作评分较低，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 2组患者治疗前后哮喘发作评分比较分)

*P<0.05，与同组治疗前比较，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，与对照组治疗后比较，compared with control group post-treatment

2.2 2组患者血清NGF变化情况 治疗前2组血清NGF水平比较差异无统计学意义；治疗后2组血清NGF水平降低，差异有统计学意义(P<0.05)；与对照组相比，治疗组血清NGF水平较低，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 2组患者治疗前后血清NGF比较

*P<0.05，与同组治疗前比较，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，与对照组治疗后比较，compared with control group post-treatment

2.3 2组患者血清IL- 21水平变化 治疗前2组血清IL- 21水平比较差异无统计学意义；治疗后2组血清IL-21水平降低，差异有统计学意义(P<0.05)，与对照组相比，治疗组血清IL- 21水平较低，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 2组患者治疗前后血清IL-21水平比较

*P<0.05，与同组治疗前比较，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，与对照组治疗后比较，compared with control group post-treatment

3 讨论

近年来，支气管哮喘发病率呈全球性上升趋势，全球约有3亿支气管哮喘患者，哮喘正严重困扰人类正常健康生活，哮喘的防治成为各国的热议问题[5]。哮喘的基本病理改变是气道炎症，诱发高反应性、气道重塑以及疾病慢性化的发生，肥大细胞、中性粒细胞、气道上皮细胞、肥大细胞以及嗜酸粒细胞等多种细胞参与其炎症反应，肿瘤坏死因子-α诱发血管内皮表达，加速炎症细胞浸润作用，激活血小板活化因子以及炎症介质合成，导致气道高反应性；嗜酸粒细胞分泌增多，诱发气道上皮细胞脱落，加重哮喘的发生[6]。

临床应用激素类作为控制气道炎症的首选药物，但长期服用可以引起骨质疏松、糖尿病、青光眼、白内障以及肌无力等不良反应，对于患有以上疾病的患者，可引起病情的复发以及加重[7]。因此激素不是一种可以经常使用缓解哮喘的方法。现代研究显示，应用西罗莫司对支气管哮喘患者临床治疗，预防哮喘复发。西罗莫司是一种新型大环内酯类抗排斥药物，具有强效的免疫抑制作用，能够阻断信号传导，不良反应小，临床应用治疗器官移植的抗排斥反应和自身免疫性疾病的预防以及治疗[8]。延光海等[9]探讨西罗莫司研究学者在支气管哮喘小鼠气道重塑中的作用机制，发现西罗莫司通过其靶细胞蛋白降低Th2类细胞因子，从而降低气道炎症。本研究显示，与对照组相比，西罗莫司治疗组哮喘发作评分较低，差异有统计学意义(P<0.05)，证实西罗莫司有效减轻支气管哮喘患者哮喘发作，缓解症状，临床疗效。

神经生长因子(nerve growth factor, NGF)是多功能细胞生长的调节因子，对神经系统以及免疫炎症具有调控作用，并与生殖、细胞增殖、造血以及细胞凋亡相关，参与支气管哮喘、过敏性鼻炎以及慢性神经炎等炎症疾病的发生发展[10]。Blanco-Mezquita等[11]在支气管哮喘研究中发现，哮喘患者较正常人血清NGF水平升高，病情的加剧与NGF水平呈正相关。本研究发现，西罗莫司治疗组血清NGF水平较低，差异有统计学意义 (P<0.05)，证实西罗莫司具有降低支气管哮喘患者NGF水平，改善精神异常，缓解病情的作用。

白细胞介素-21是具有免疫调节的重要细胞因子，能够诱导B细胞亚群分化与分泌，参与免疫应答。支气管患者体内IL-21水平升高，抑制T细胞相关免疫反应，病情恶化加重[12]。本研究显示，与对照组相比，西罗莫司治疗组血清IL-21水平较低，差异有统计学意义(P<0.05)。西罗莫司的低毒抗真菌以及免疫抑制作用可有效调节支气管哮喘患者IL- 21等炎症细胞水平，临床症状得到改善。

本研究通过对本院呼吸科门诊和住院支气管哮喘患者83例的哮喘发作评分、血清神经生长因子及IL-21水平进行研究，证实了西罗莫司对支气管哮喘患者具有缓解哮喘发作，降低血清神经生长因子及IL-21水平，改善患者病情的功效。在下一步研究中，本课题组将进行药理学方面研究，对本实验过程中出现现象做进一步研究。

[1] 李剑,张晓文, 吴泰华.日常监测呼气峰流速对哮喘病情控制水平的影响及预测哮喘急性发作的风险研究[J].中国实用内科杂志, 2013, 33(3): 233-235.

[2] 李艳敏,成旭明. 糖皮质激素治疗支气管哮喘急性发作期患者血清IL-18, IL-33水平的变化及临床意义[J].实用药物与临床, 2013, 16(10): 897-899.

[3] 孟宪华.支气管哮喘患者36例的护理体会[J].中国卫生标准管理, 2014, 5(22): 139-140.

[4] 何权瀛.学习《中国支气管哮喘防治指南 (基层版)》[J].中国社区医师, 2013 (34): 11-12.

[5] 中华医学会呼吸病学分会哮喘学组, 林江涛, 沈华浩,等. 我国支气管哮喘防治60年回顾与展望[J]. 中华结核和呼吸杂志, 2013, 36(12):907-909.

[6] 刘海霞,金先桥,郑明睿, 等.慢性烟曲霉暴露对哮喘大鼠气道嗜酸粒细胞性炎症及气道高反应性的影响[J].中国呼吸与危重监护杂志, 2014, 13(1): 28-33.

[7] 徐虹, 李国民, 龚一女, 等.儿童激素抵抗, 依赖及复发肾病综合征的治疗[J].中华肾病研究电子杂志, 2013, 2(1): 11-17.

[8] 陈丽平,段坤峰,王保兴.雷帕霉素的研究进展及临床应用[J].临床合理用药杂志, 2013, 6(8): 163-164.

[9] 延光海,金光玉,朴红梅,等.雷帕霉素对哮喘小鼠气道重塑的影响[J].中国药理学通报, 2013, 29(7): 942-946.

[10] 黄俊红,谭翱勇,谭占国.神经生长因子在中枢神经功能修复中的研究进展[J].中国实用神经疾病杂志, 2014, 17(19): 126-127.

[11] Blanco-Mezquita T, Martinez-Garcia C, Proença R, et al. Nerve Growth Factor Promotes Corneal Epithelial Migration by Enhancing Expression of Matrix Metalloprotease-9 NGF Promotes Epithelial Migration[J]. Invest Ophthalmol Vis Sci,2013,54(6):3880-3890.

[12] 张媛,刘云锋,皮蕾,等.白细胞介素-21在疾病中作用的研究进展[J].国际免疫学杂志, 2015, 38(1):64-70.

(编校：王俨俨)

Effect of sirolimus on serum nerve growth factor and IL-21 in patients with bronchial asthma

YAO Guo-liΔ,MAO Wei, ZHANG Shuang-mei, WANG Bin, LIU Zhi-cong

(Department of Respiratory Medicine, Huzhou Central Hospital, Huzhou 313000, China)

ObjectiveTo explore the effect of sirolimus on serum levels of nerve growth factor (NGF) and interleukin 21(IL-21) in patients with bronchial asthma. Methods83 cases outpatient and hospitalized patients with bronchial asthma in the respiratory department were collected and divided into control group and treatment group according to the different treatment methods, 42 cases in treatment group, 41 cases in the control group. Two groups of patients

maintain acid-base and electrolyte balance, oxygen inhalation antispasmodic, antibiotics and other implementation of routine treatment of bronchial, and application of 0.5% atomization inhalation salbutamol, the treatment group received sirolimus treatment on the basis of routine treatment. After treatment, the asthma attack score, serum levels of NGF and IL-21 were compared. ResultsAfter treatment, compared with the control group, asthma attack score in treatment group was lower, the difference was statistically significant (P<0.05), the serum nerve growth factor level in treatment group was lower, the difference was statistically significant (P<0.05); the serum IL-21 level in treatment group was lower, the difference was statistically significant (P<0.05). ConclusionRapamycin has the effect of relieving asthma attacks, reducing serum NGF and IL-21 levels in patients with bronchial asthma.

sirolimus; bronchial asthma; nerve growth factor; IL-21

湖州市科技计划项目(2011YS03)

姚国丽，通信作者，女，本科，住院医师，研究方向：支气管哮喘，E-mail：lucy3178657@163.com。

R562.2+5

A

10.3969/j.issn.1005-1678.2016.05.22