冀产远志与卵叶远志的含量测定研究

王永艳

河北省邯郸市第一医院药剂科，河北邯郸　056002

冀产远志与卵叶远志的含量测定研究

王永艳

河北省邯郸市第一医院药剂科，河北邯郸056002

目的探讨冀产远志与卵叶远志的种间差异，以指导临床合理用药。方法采用高效液相色谱法测定冀产远志与卵叶远志在不同采集期、不同用药部位中有效活性成分远志山酮Ⅲ与3，6二芥子酰基蔗糖的含量。 色谱柱为Sunfire C18（4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相为甲醇-0.05%磷酸溶液（70∶30），检测波长为230 nm，流速为1.0 mL/min，柱温30℃。结果各组分分离度良好，远志口山酮Ⅲ在0.46003～4.6003 mg/mL浓度范围内与峰面积线性关系良好（r=0.999）；3，6二芥子酰基蔗糖在0.41587～4.15872 mg/mL浓度范围内与峰面积线性关系良好（r= 0.999），平均回收率分别为98.10%（RSD=1.80%）和98.13%（RSD=1.63%），7批样品中远志山酮Ⅲ的含量分别为0.113、0.078、0.121、0.105、0.082、0.054、-0.003 g/g，3，6二芥子酰基蔗糖的含量为0.665、0.392、0.390、0.453、0.394、0.586、0.411 g/g。结论该方法简便、快速，为冀产远志的品种开发提供科学数据。

远志；卵叶远志；含量测定；高效液相色谱法

［Abstract］Objective To discuss the difference between Polygala tenuifolia Wi11d.and Polygala sibirica L.for guiding c1inica1 rationa1 drug use.Methods Effective active ingredient Po1yga1axanthone and 3，6'-Disinapoy1sucrose content of different co11ection period and parts of Po1yga1a tenuifo1ia Wi11d and Po1yga1a sibirica L were measured by HPLC method.The determination was performed on Sunfire C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）co1umn with methano1-0.05%phosphate acid（70∶30）as mobi1e phase at detection wave1ength of 230 nm，the f1ow rate was 1.0 mL/min，the co1umn temperature was set at 30℃.Results The components were separated comp1ete1y.The good 1inear re1ationship of Po1yga1axanthoneⅢoccurred in the range of 0.460 03～4.6003 mg/mL（r=0.999），the good 1inear re1ationship of 3，6'-Disinapoy1sucrose in the range of 0.415 87～4.158 72 mg/mL（r=0.999）.The average recoveries were 98.10%（RSD=1.80%）and 98.13%（RSD=1.63%）.In the 7 groups，the content of Po1yga1axanthoneⅢwas 0.113，0.078，0.121，0.105，0.082，0.054，-0.003 g/g，3，6'-Disinapoy1sucrose was 0.665，0.392，0.390，0.453，0.394，0.586，0.411 g/g.Conclusion The method is simp1e and quick，which can be used for rationa1 deve1opment of Po1yga1a tenuifo1ia Wi11d.

［Key words］Polygala tenuifolia Wi11d.；Polygala sibirica L.；Content determination；HPLC method

远志为远志科植物远志（Polygala tenuifolia Wi11d.）或卵叶远志（Polygala sibirica L.）的干燥根。春秋两季采挖。性苦、辛、温，归心、肾、肺经。有益智安神、交通心肾、消肿祛痰的功效［1］。临床用于抗焦虑、镇静催眠，祛痰镇咳、抗衰老、抗抑郁、消肿利尿等［2-7］。《中国药典》2015年版一部的标准中没有区分远志与卵叶远志的种间区别，有关药用远志的研究主要集中在细叶远志的化学成分、含量测定、药理作用、制剂质量控制、栽培技术等方面［8-15］。

近年来，卵叶远志的研究也逐渐展开，滕红梅等［16］对卵叶远志的生药学研究，宋月林等［17-18］对卵叶远志的地上部分进行了化学成分研究，周雨虹等［19］对卵叶远志根的化学成分研究，卵叶远志的含量测定仅限于远志皂苷成分［20］等。远志与卵叶远志的对比研究还有待开展，本研究针对冀产远志与卵叶远志中有效成分远志山酮Ⅲ与3，6二芥子酰基蔗糖的含量进行比对研究，比较两种间的差别，为开发冀产远志资源提供技术参考。

1　仪器与材料

GC2010AT高效液相色谱仪（日本岛津），Labso1ution工作站，紫外检测器，AUW120D型电子天平（日本岛津）。甲醇、磷酸均为分析纯，乙腈为色谱纯，水为纯化水，远志山酮Ⅲ对照品（中国食品药品检定研究院；批号：116050-201203）；3，6二芥子酰基蔗糖对照品（中国食品药品检定研究院；批号：11848-201303）；6批药材均由邯郸市药品检验中心孔增科主任药师鉴定（产地：涉县固镇、涉县九峰山、涉县固镇、武安、涉县九峰山、涉县小井）。

2　方法与结果

2.1色谱条件及系统性试验

色谱柱：Sunfire C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）为固定相，流动相：甲醇-0.05%磷酸溶液（70∶30），检测波长为320 nm，柱温为室温，进样量为10 μL。在以上色谱条件下，各组分分离度良好。见图1。

图1　HPLC色谱图

2.2对照品溶液的制备

精密称取远志山酮Ⅲ对照品12.03 mg与3，6二芥子酰基蔗糖对照品10.83 mg，置25 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为混合对照品溶液。

2.3供试品溶液的制备

取样品远志（卵叶远志）细粉（过四号筛）约1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入70%甲醇25 mL，精密称定，加热回流1.5 h，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液即得。

2.4线性关系的考察

取对照品溶液，分别精密量取1、2.5、5、10 mL，置10 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。分别进样10 μL于高效液相色谱仪中，按上述色谱条件进行峰面积测定，以质量浓度X为横坐标，峰面积Y为纵坐标，进行线性回归，远志山酮Ⅲ回归方程：Y= 2×106X+137 647，r=0.999，结果表明远志山酮Ⅲ质量浓度在0.460 03～4.6003 mg/mL范围内呈良好线性关系；3，6二芥子酰基蔗糖回归方程：Y=2×106X+ 106 030，r=0.999，结果表明，3，6二芥子酰基蔗糖质量浓度在0.415 87～4.158 72 mg/mL范围内呈良好线性关系。

2.5精密度试验

精密吸取混合对照品溶液 10 μL，连续进样5次，记录色谱图，远志山酮Ⅲ与3，6二芥子酰基蔗糖的RSD分别为0.37%、0.41%，结果表明仪器精密度良好。

2.6重复性试验

按“2.2.3”项下方法平行制备5份供试品溶液按“2.2.1”项下色谱条件进行测定，测得远志山酮Ⅲ与3，6二芥子酰基蔗糖的含量分别为0.105%、0.453%，表明重复性良好。

2.7稳定性试验

取供试品溶液10 μL，分别在0、2、4、6、8、12 h进样，共测定6次，其RSD=1.5%，表明该溶液12 h内基本稳定。

2.8加样回收率试验

取已知含量的供试品细粉（远志山酮Ⅲ与3，6二芥子酰基蔗糖的含量分别为0.105%、0.453%）约0.5 g，精密称定6份，再分别精密加混合对照品储备液1 mL，按“2.2.3”项下供试品溶液的制备方法，进样测定，远志山酮Ⅲ与3，6二芥子酰基蔗糖，平均回收率为98.10%、98.13%，RSD分别为1.80%、1.63%。结果见表1。

表1 回收率测定结果

2.9样品含量测定

取样品，按上述供试品溶液制备方法制备，精密量取供试品溶液和对照品溶液10 μL，注入液相色谱仪测定。结果见表2。

表2　样品测定结果（n=6）

3　讨论

通过采用液相色谱法对远志和卵叶远志的不同采摘期及不同部位中有效活性成分远志山酮Ⅲ与3，6二芥子酰基蔗糖的含量进行比对研究发现，冀产卵叶远志根中两种成分的含量高于与冀产远志根，建议可将卵叶远志作为远志的开发品种之一；地上部分（远志小草）几乎不含远志山酮Ⅲ，3，6二芥子酰基蔗糖的含量还较高，并且二者根中两种成分的含量均高于其全草，说明这与传统习惯把根作为主要药用部位是一致的；二者3，6二芥子酰基蔗糖的含量远大于远志山酮Ⅲ，且秋季采摘的3，6二芥子酰基蔗糖含量高于春季，远志山酮Ⅲ含量春季采摘的大大高于秋季，原因北方日照时间长，阳光充足，糖分含量高，酮成分含量较低，可根据药理作用选择合理的采摘期。

经方法学考证，该方法简便快捷、准确，通过测定两种成分的含量指标，可用于有效区别冀产远志及卵叶远志的种间差异，为冀产远志的品种开发提供科学依据。

［1］国家药典委员会.中国药典2015年［S］.一部.北京：中国医药科技出版社，2015：156-157.

［2］马骁，王建，黄聪，等.厚朴炙远志炮制品的安神和祛痰作用研究［J］.中药药理与临床，2013，29（1）：90-93.

［3］张耀春，王立为.远志提取物对小鼠学习记忆的影响［J］.中国新药杂志，2015，15（15）：1254-1257.

［4］闫明，李萍.抗衰老作用研究［J］.实用药物与临床，2006，9（1）：22-23.

［5］黄晓舞，谢婷婷，王东晓，等.远志醇提物的抗抑郁作用［J］.中国药物应用与监测，2007，4：22-25

［6］马洪伟，付文亮，钟美蓉，等.远志药理活性研究进展［J］.承德医学院学报，2010，27（2）：196-198.

［7］刘大伟，康丽平，马百平.远志化学及药理作用研究进展［J］.国际药学研究杂志，2012，39（1）：32-36.

［8］姜艳艳，段以以，刘洋，等.远志化学成分分离与结构鉴定［J］.北京中医药大学学报，2011，34（2）：122-125.

［9］宋月林，姜勇，毕丹，等.卵叶远志地上部分正丁醇萃取物的化学成分研究［J］.中国中药杂志，2012，37（4）：471-474.

［10］赵建国，曲伟红.远志化学成分分析方法研究进展［J］.时珍国医国药，2009，20（12）：3114-3115.

［11］裴瑾，万德光，杨林.苯酚硫酸比色法测定远志及地上部分多糖的含量［J］.华西药学杂志，2005，20（4）：337-339.

［12］曲伟红，赵建国.现代分析方法在远志及其制剂质量控制中的应用［J］.九江医学，2009，24（2）：83-85.

［13］冯向东，高光伟，黄海欣.远志炮制前后质量变化的比较研究［J］.中药材，2008，31（6）：818-820.

［14］傅晶，张东明，陈若芸.远志属植物的皂苷类成分及其药理作用研究进展［J］.中草药，2006，37（1）：144-146.

［15］刘汉珍，张树杰.远志的人工栽培技术［J］.世界中西医结合杂志，2010，5（11），995-996.

［16］滕红梅，李金亭，胡正海.远志根的发育解剖学研究［J］.西北植物学报，2008，28（1）：90-96.

［17］宋月林，姜勇，周思祥.卵叶远志地上部分酮类成分研究［J］.中国中药杂志，2009，34（5）：574-576.

［18］宋月林，姜勇，周思祥.卵叶远志地上部分化学成分研究［J］.中草药，2010，41（1）：27-29.

［19］Zhou YH，Jang Y，Wei J，et a1.Chemica1 constituents from the roots of Po1yga1a Sibirica L［J］.Joura1 of Chinese Pharmaceutica1 Sciences，2008，17：148-152.

［20］刘友平，万德光，刘涛，等.分光光度法测定不同产地远志总皂甙的含量［J］.成都中医药大学学报，2000，23（2）46-47.

Determination research of Polygala tenuifolia Willd.and Polygala sibirica L.

WANG Yongyan
Department of Pharmacy，the First Hospita1 of Handan，Hebei Province，Handan056002，China

R927.2

A

1673-7210（2016）04（c）-0132-04

河北省中医药管理局科研计划项目（2010184）。

王永艳（1974-），女，硕士，副主任药师；研究方向：药物的临床应用及药物分析。

2016-01-22本文编辑：赵鲁枫）