血小板形态和功能在体外循环中的变化研究

黄 丽(四川省珙县人民医院检验科，四川 珙县 644501)

血小板形态和功能在体外循环中的变化研究

黄 丽
(四川省珙县人民医院检验科，四川 珙县 644501)

目的 探讨体外循环对患者血小板形态和功能的影响。方法 选择76例体外循环患者，分别在术前和术后第1、3、5、7天检测患者血小板的计数、平均体积、体积分布宽度、聚集率、血浆颗粒膜蛋白。结果 与术前比较，血小板计数在第1～3天明显下降(P< 0.05)，第5～7天恢复正常(P> 0.05)；血小板平均体积和体积分布宽度等指标在术后第1、3、5、7天均无明显变化(P> 0.05)；术后第1、3天时血小板聚集率显著下降，血浆颗粒膜蛋白表达明显增高(P< 0.05)，术后第5、7天时两者逐渐恢复正常(P> 0.05)。结论 体外循环对血小板的形态无明显损伤，但在术后3天之内明显损伤了血小板的功能，3天之后逐渐恢复正常。

血小板；体外循环；形态；功能；

体外循环(cardiopulmonary bypass，CPB)是利用一系列特殊人工装置将人体静脉血引流到体外，经人工方法进行气体交换，调节温度和过滤后，输回体内动脉系统的生命支持技术。在体外循环过程中，由于人工装置取代了人体功能，因此也称心肺转流，体外循环机也称为人工心肺机[1]。进行CPB是为了在实施心中直视手术时，维持全身组织器官的血液供应。随着临床医学的发展，CPB的应用范围不断扩展，不仅在心脏、肝、肾、肺等大血管手术中获得应用，在肿瘤治疗、心肺功能衰竭患者的生命支持方面也取得令人瞩目的成绩，成为临床医学的一门重要技术[2]。由于血液在CPB中的停留时间较长，各种有形成分均受到一定影响，凝血功能受到损伤[3]。血小板作为血液有形成分之一，其主要功能为止血和凝血，目前尚无任何一种药物能够代替其功能[4]。本研究对血小板体外循环前后的形态和功能进行检测，探讨体外循环对血小板的影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2014年12月至2016年3月在我院心脏外科住院，拟在CPB下行心脏直视手术的患者76例，其中男47例，女29例，年龄(55±16.52)岁，体重(59±13.52) kg，心功能Ⅱ～Ⅳ级，ASAⅢ～Ⅳ级。排除标准:术前凝血异常的患者；肝肾功能不全的患者。退出标准:CPB时间小于100 min的患者；术中或术后24小时内死亡的患者。

1.2 方法 分别在术前、术后第1、3、5、7天抽取患者标本，检测:①血小板计数(PLT)、血小板平均体积(MPV)、体积分布宽度(PDW):按常规法用XT-2000型血细胞计数仪测定。②血小板聚集率(PAgT):采用全血电阻抗法测定血小板最大聚集率，严格按照标准操作规程进行操作。③血浆颗粒膜蛋白(GMP-140):应用GMP-140 ELISA检测试剂盒(上海双赢生物科技有限公司)进行检测，严格按照说明书进行操作。

1.3 统计学方法 采用SPSS 15.0统计学软件进行数据处理。计量资料以均数±标准差表示，组间比较采用重复测量资料的方差分析。P< 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 PLT计数及形态指标的变化 与术前比较，术后第1～7天的MPV和PDW无明显变化(P> 0.05)，PLT计数在术后第1～3天明显下降(P< 0.05)，第5～7天恢复正常(P> 0.05)，见表1。

表1 PLT、MPV及PDW检测结果

*与术前比较，P< 0.05

2.2 血小板功能的变化 与术前比较，PAgT在术后第1～3天明显降低(P< 0.05)，GMP-140的表达明显升高(P< 0.05)。但是在术后第5～7天，两者均恢复正常(P> 0.05)，见表2。

表2 PAgT和GMP-140的检测结果

*与术前比较，P< 0.05

3 讨论

心血管类手术基本上要在CPB的支持下才能进行，由于CPB机器管道介面的异物性、血流切应力、血气接触、低温、鱼精蛋白和肝素的应用等原因，血小板的数量、形态和功能均发生改变，释放生物活性物质，造成凝血功能障碍及微血管栓塞[5]。目前认为，血小板数量和功能的改变是导致CPB下心内直视手术后非外科出血的主要原因[6]。本研究所示，CPB结束之后的第1～3天，PLT显著降低，第5～7天逐渐恢复正常。不过，虽然PLT在前3天显著下降，但是PLT仍然处于正常范围之内(PLT>100×109)。需要引起我们注意的是，PLT计数处于正常范围之内，并不代表血小板功能正常，因为血细胞计数仪检测血小板时，血小板主要以颗粒的方式呈现，此时的计数只与血小板的大小和形状有关，而与血小板功能没有直接关系[7]。

血小板依靠黏附、聚集、释放、促凝和血块收缩这五大作用来维持血管内皮完整性，修复血管，发挥止血和凝血的功能，其中血小板的聚集是血小板发挥止血功能和形成血栓的主要环节[8，9]。本研究显示血小板聚集率在CPB术后第1～3天明显下降，说明CPB严重损伤了血小板的聚集功能。血小板富含大量的α颗粒，当其受到外界刺激和活化时，GMP-140就会表达在血小板表面，因此，GMP-140是判断血小板活化的特异性指标[10]。因此，测定GMP-140的表达，可特异性地反映血小板活化和破坏程度。本研究显示GMP-140的表达在CPB术后第1～3天明显增强，说明血小板活化程度显著增高，破坏增多。研究发现，CPB导致血小板释放ADP减少，并且激活脱粒血小板，此时GMP-140表达的改变最具特异性和敏感性[11，12]。因此，监测GMP-140可以判断血小板功能的变化。

研究发现，CPB导致血小板激活释放的可溶性CD40配体(Scd40L)，能够促进炎症反应和血栓形成。另外，由于血小板表面α2肾上腺素能受体的明显减少，血小板的聚集功能显著下降。这些因素综合作用，导致或者加重术后出血及并发症的发生[13，14]。在CPB术前，利用血小板分离技术从患者自身抽取并分离富血小板血浆(PRP)的办法能够改善术后出血[15]。血小板分离技术可以将患者的血液分离为PRP、贫血小板血浆(PPP)和浓缩红细胞三部分。浓缩红细胞及PPP可以在适当时候回输给患者；PRP既可以减少CPB对血小板造成的破坏，还可把PRP与钙离子及凝血酶混合，制备自体血小板胶(APG)。APG可用于术中止血、封闭伤口、促进伤口和胸骨的愈合。

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Changes of morphology and function of platelet in cardiopulmonary bypass

HUANGLi
(DepartmentofClinicalLaboratory，GongxianPeople'sHospital，Gongxian644501，China)

Objective To investigate the effects of cardio-pulmonary bypass on the morphology and function of platelets.Methods Platelet count，average volume，volume distribution width，aggregation rate (PAgT%) and GMP-140 were determined in 76 patients with cardiopulmonary bypass at pre-operation and on 1，3，5 and 7 days after operation.Results Compared with the preoperative，platelet count was significantly decreased on postoperative day1 to day3 (P< 0.05).The decrease was restored on postoperative day 5 to day7 (P> 0.05).Average volume and volume distribution width of platelet had no significant changes on postoperative day1，3，5 and 7(P> 0.05).PAgT% was decreased significantly and GMP-140 was increased significantly on postoperative day1 and 3 (P< 0.05).PAgT% and GMP-140 had no significant changes in the postoperative day 5 and 7 (P> 0.05).Conclusion There was no significant damage to the platelet morphology in the extracorporeal circulation.However，the function of platelets was obviously damaged within 3 days after operation and returned to normal after 3 days of operation.

Platelet； Cardiopulmonary bypass； Morphology； Function

R446.11+1

A

1672-6170(2016)05-0094-03

2016-05-09；

2016-06-24)