4例人感染猪链球菌病的回顾性分析

易　凯

(益阳市中心医院检验科，湖南益阳 413000)

·临床研究·

4例人感染猪链球菌病的回顾性分析

易凯

(益阳市中心医院检验科，湖南益阳 413000)

摘要:目的通过对益阳市4例人感染猪链球菌患者的临床资料进行回顾性分析，为猪链球菌病的诊断和治疗提供依据。方法回顾性分析该院4例人感染猪链球菌病患者的临床资料，职业特征，实验室血液和脑脊液检验结果，分离菌株的细菌培养鉴定。结果从4例患者血液分离培养出病原菌，1例患者脑脊液分离出病原菌，均经梅里埃VITEK-2 Compact全自动细菌鉴定及药敏分析系统鉴定为猪链球菌Ⅱ型。结论微生物工作人员应加强猪链球菌的认知，快速而准确地得出病原学结果，为临床诊断提供依据。

关键词:猪链球菌；细菌鉴定；回顾性分析

1968年丹麦学者首次报道了3例人感染猪链球菌导致脑膜炎并发败血症病例[1]，随后在全世界范围内均有报道。在我国，1998年江苏省发生了人感染猪链球菌病疫情，发病25例，死亡14例[2]；2005年6～8月，四川省发生的人感染猪链球菌病疫情暴发，为国内外迄今为止报道的最大规模人感染猪链球菌病疫情，发病数215例，死亡38例[3]。益阳市于2013年7月至2014年4月共发生4例人感染猪链球菌病。本研究对4例患者的临床特征，实验室血液、脑脊液检验结果及细菌鉴定进行回顾性分析，从而为猪链球菌感染的诊断、治疗提供依据。

1资料与方法

1.1一般资料选取益阳市中心医院2013年7月至2014年2月的4例人感染猪链球菌病患者为研究对象，其中1例患者从脑脊液和血液同时分离出猪链球菌Ⅱ型，其余3例仅从血培养分离出猪链球菌Ⅱ型。其患者的一般资料、职业特征及菌株来源信息见表1。

表1　　4例猪链球菌病患者一般资料、职业特征及菌株来源信息

1.2主要仪器及试剂哥伦比亚血琼脂平板、中和抗生素成人血培养瓶、GP鉴定卡、GP67药敏卡、 ALERT 3D120血培养仪、VITEK-2 Compact细菌鉴定系统均为购自法国生物梅里埃公司。

1.3细菌培养与鉴定药敏血液或脑脊液标本经血培养瓶置于ALERT 3D120血培养仪增菌培养，仪器阳性报警时，转种血平板后置于35 ℃、5%CO2培养箱培养，同时直接涂片革兰染色镜检，培养18～24 h，观察菌落形态，同时进行革兰染色和显微镜形态观察。然后用VITEK-2 Compact细菌鉴定药敏系统与配套的革兰阳性菌GP鉴定卡和GP67药敏卡进行细菌鉴定与药敏实验，具体操作均参考仪器和试剂盒说明书。血清学试验和聚合酶链式反应(PCR)鉴定分型均送湖南省疾病控制中心进行血清分型、PCR基因鉴定。

2结果

2.1人感染猪链球菌病患者血液和脑脊液实验室检测结果从表2可见，4例患者白细胞显著上升，中性粒细胞比例增多，降钙素原和C反应蛋白均显著升高。从表3可见，3例抽取的脑脊液白细胞升高、蛋白升高、脑脊液氯化物下降、脑脊液葡萄糖下降、乳酸脱氢酶上升。

表2　　4例猪链球菌病患者常见血液检测结果

表3　　3例猪链球菌病患者脑脊液实验室检测结果

2.2人感染猪链球菌体形态和特征血平板上24 h呈α溶血，灰白、半透明，光滑、湿润、边缘整齐，凸起，小菌落，直径0.5～1.5 mm，见图1A。细菌革兰染色为革兰阳性球菌，在1 000倍显微镜下为单个或短链状排列的似“矛头状”球菌，与肺炎链球菌的镜下形相类似，见图1B。

A：猪链球菌在血平板上24 h菌落形态；B猪链球菌镜下形态(革兰染色×1 000)。

图1人感染猪链球菌体形态和特征

2.35株分离菌阳性报警时间、鉴定结果、鉴定时间、可能性见表4。从表4可看出，血培养瓶在血培养仪阳性报警时间均不到16 h。鉴定药敏系统对5株细菌均正确鉴定为猪链球菌Ⅱ型，鉴定时间都没超过8 h，鉴定可能性均大于95%。

表4　　5株分离菌阳性报警时间、鉴定结果、

2.4药敏试验结果5株细菌对青霉素、左氧氟沙星、万古霉素、红霉素、克林霉素、利奈唑胺均敏感。

2.5湖南省疾病控制中心对上送的菌株进行血清学分型，PCR基因分型均为猪链球菌Ⅱ型阳性。

3讨论

人感染猪链球菌病是由猪链球菌感染人而引起的人畜共患疾病。从事生猪的养殖、屠宰、销售及加工等人员均为高危人群，本病主要通过接触死猪或病猪(肉)后，通过皮肤伤口而感染。临床表现为发热、寒战、头痛、食欲下降等细菌感染症状，重症患者可合并中毒性休克综合征和链球菌脑膜炎综合征[4]，给相关从业人员和广大的群众带来严重的健康威胁。在猪链球菌的30多种血清型中，Ⅱ型是最常引起人类感染的类型[5]。猪链球菌Ⅱ型的毒力为荚膜多糖、溶菌酶释放蛋白、溶血素、纤连蛋白结合蛋白、谷氨酸脱氢酶、Sao蛋白、存在于89K毒力岛的双信号转导系统、荚膜唾液酸、Cbp40、VirA、pgdA、Trag、溶血素相关基因、CiaRH、CcpA、TroA等多种毒力因子协同作用的结果[6]。自从湖南省2006年首例报道人感染猪链球菌病[7]以来，每年陆续有散发病例报告，为猪链球菌病的疫区。益阳地区2013年7月首次发现人感染猪链球菌病，到2014年2月共发现4例人感染猪链球菌病。

从本研究4例患者的病例临床资料分析，其中有3例患者为生猪养殖者，经调查，近一星期内，均有死猪接触史；另外1例患者为超市肉类销售人员，4例患者发病前均存在不同程度的皮肤破损或伤口。患者起病急，有畏寒、高热、头痛等神经功能紊乱症状。从表2可见，4例患者白细胞显著上升，中性粒细胞增多，降钙素原升高和C反应蛋白升高，提示患者有败血症实验室特征。从表3可见，3例抽取的脑脊液白细胞升高、蛋白升高、脑脊液氯化物下降、脑脊液葡萄糖下降、乳酸脱氢酶上升，有显著的化脓性脑脊液的实验室改变，与以往的文献报道相似[8]。从药敏试验结果来看猪链球菌对多种链球菌常见药物敏感。

从表4可看出，血培养瓶在ALERT 3D120血培养仪阳性报警时间均不到16 h。VITEK-2 Compact 鉴定药敏系统对5株细菌均正确鉴定为猪链球菌Ⅱ型，鉴定时间都没超过8 h。对于实验室来说，血培养仪的阳性报警时间及VITEK-2 Compact系统鉴定正确率和鉴定时间能满足对于猪链球菌的培养鉴定要求。但是从抽取血液标本到阳性报警，转种血平板到鉴定得出正确的病原学鉴定结果需要2 d以上的时间，不利于潜伏期短，病情凶险的患者及时诊疗。血清学实验及PCR基因检测虽然具有快速、准确的特点，但由于各种原因，一般临床实验室均未开展。对于血清学实验及PCR基因检测未开展的实验室，需要加强疫区医院微生物检验人员对猪链球菌革兰染色镜下形态和菌落形态学的认知水平，做好三级预防，加强与临床的沟通，及时获取患者职业特征和接触史，以便及时的提醒临床早期正确的诊断和及时有效的治疗，对于挽救患者生命，减少后遗症的发生具有十分重要的意义。

参考文献

[1]Perch B,Kristjansen P,Skadhauge K.Group R streptococci pathogenic for man.Two cases of meningitis and one fatal case of sepsis[J].Acta Pathol Microbiol Scand,1968,74(1):69-76.

[2]Lu HZ,Weng XH,Li H,et al.Enterococcus faecium-related outbreak with molecular evidence of transmission from pigs to humans[J].J Clin Microbiol,2002,40(3):913-917.

[3]Ye C,Zhu X,Ji NH,et al.Streptococcus suis sequence type 7 outbreak,Si chuan,China[J].Emerg Infect Dis,2006,12(8):1203-1208.

[4]Lin YD,Miao XL,Xiao Y.The epidemiological source investigationof a death case of Streptococcus suis type 2[J].Jiangsu Prev Med,2011,22(9):29-30.

[5]He YJ,Zhu LW,Feng SZ.The lastest progress in research on virulenceassociared factors and protective antigens of streptococcus suis serotype 2[J].Chin J Zoonoses,2012,28(1):66-68.

[6]马建华，魏建忠．猪链球菌毒力因子研究进展[J]．动物医学进展，2014，35(8)：95-98．

[7]成凌志，王继杰，赵树海，等．湖南省首例人感染猪链球菌病调查报告[J]．现代预防医学，2007，34(19)：3771．

[8]陈默蕊，屈平华，陈经雕，等．2011年至2012年潮州地区5例猪链球菌Ⅱ型感染的回顾性分析[J]．中华检验医学杂志，2014，37(4)：302-304．

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.10.058

文献标识码：A

文章编号：1673-4130(2016)10-1427-03

(收稿日期：2016-01-29)