PTEN蛋白表达与乳腺癌患者临床病理学特征相关性的Meta分析*

方　程，龙行华

(武汉大学中南医院检验科,武汉 430071)



PTEN蛋白表达与乳腺癌患者临床病理学特征相关性的Meta分析*

方程，龙行华△

(武汉大学中南医院检验科,武汉 430071)

[摘要]目的评价PTEN蛋白表达与乳腺癌患者临床病理学特征的关联性。方法通过PubMed、Embase、Cochrane Library、中国知网(CNKI)及万方数据库检索所有已发表的关于乳腺癌患者组织中PTEN蛋白表达与临床病理学参数的相关性研究。应用RevMan 5.2软件进行分析，计算表达比值比(OR)和95%可信区间(CI)，并对研究文献进行异质性检验和偏倚评估。结果共28篇研究文献(3 172例患者)纳入Meta分析。PTEN在乳腺癌组织中的表达与患者的雌激素受体(OR=3.16，95%CI：2.01～4.97，P<0.01)、孕激素受体(OR=2.27，95%CI：1.70～3.04，P<0.01)、淋巴转移(OR=0.36，95%CI：0.27～0.49，P<0.01)、临床分期(OR=2.59，95%CI：2.04～3.30，P<0.01) 和组织学分级(OR=2.19，95%CI：1.74～2.75，P<0.01) 均有显著相关性。结论PTEN异常表达可能在乳腺癌的发生、进展、浸润及预后中起重要作用，是乳腺癌早期诊断和内分泌治疗中较有价值的分子标志物。

[关键词]乳腺肿瘤；肿瘤抑制蛋白质类；PTEN；雌激素受体；临床病理学特征；Meta分析

乳腺癌是发生在乳腺导管上皮的女性常见恶性肿瘤，全世界每年约有120万女性患乳腺癌，约50万女性死于乳腺癌。在我国，乳腺癌的发病率有增高的趋势，已成为威胁我国女性健康的主要恶性肿瘤之一[1]。乳腺癌的治疗方式与其病理类型和雌激素受体(ER)的表达密切相关，而肿瘤的浸润和转移是影响治疗和预后的制约因素。因此，寻找有价值的临床诊断生物标志物对乳腺肿瘤的早期诊断和治疗有着重大意义。肿瘤抑制基因PTEN，又称MMAC1，是迄今为止发现的第1个具有双特异性磷酸酶活性的抑癌基因，其突变或缺失与乳腺癌、恶性胶质瘤、子宫内膜癌及前列腺癌等多种恶性肿瘤密切相关[2-4]。近年来，抑癌基因PTEN在乳腺癌中的表达及其临床意义成为研究热点，但由于研究对象、技术方法、观察标准等因素的差异，研究结果很不一致。因此，本研究应用Meta分析全面系统地评价了PTEN蛋白与乳腺癌患者临床病理学特征的关联性，为乳腺癌的早期诊断，病因研究及个体化治疗提供更准确可信的循证医学证据。

1资料与方法

1.1文献检索采用自由词与主题词检索相结合的方式，在线检索PubMed、Embase、Cochrane Library、中国知网(CNKI)及万方等中英文数据库。中文检索关键词：“PTEN”、“乳腺癌”、“乳腺肿瘤”和“临床病理特征”； 英文检索关键词：“PTEN”、“breast cancer/breast neoplasm/breast carcinoma”、“clinicopathological features/clinical significance”。检索文献发表时间截至2014年8月。

1.2文献特征纳入标准：(1)研究对象为乳腺癌患者，且病理诊断明确；(2)可提取PTEN表达与乳腺癌临床病理特征关联的相关数据；(3)PTEN检测均采用免疫组织化学法，当乳腺上皮或癌细胞质中出现明显的棕黄色颗粒为阳性染色，阳性染色细胞百分数大于50%或与正常对照组织表达一致则为阳性高表达。剔除标准：(1)综述或评论类文献；(2)重复发表的数据；(3)低质量研究文献；(4)文献报道信息量太少，缺乏相关计数资料。

1.3数据提取对符合纳入标准的研究文献进行相关信息的提取，主要内容包括：第一作者、发表时间、国家、样本容量、PTEN蛋白的检测方法及其阳性判定标准；PTEN表达与乳腺癌临床病理特征的关联，包括患者的ER状态、孕激素受体(PR)状态、有无淋巴转移、临床分期和组织学分级共5项参数。

1.4统计学处理应用Cochrane Collaboration′s RevMan 5.2进行Meta分析。采用森林图描述PTEN蛋白表达与乳腺癌患者临床学病理特征的相关性，计算表达比值比(odds ratio，OR)及95%可信区间(confidence intervals，CI)。应用χ2检验和I2统计量分析纳入研究结果之间的异质性，若不存在显著异质性(P>0.10，I2<50%)，则采用固定效应模型进行数据合并。否则，就采用随机效应模型进行数据合并，并分析可能的异质性来源。采用漏斗图评估纳入文献的发表偏倚。以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1文献检索结果初步检索到文献1 417篇，阅读文献标题和摘要后，排除无关文献1 288篇，综述文献42篇，重复发表文献36篇，低质量文献23篇。最终纳入Meta 分析的研究文献共28篇，包括9篇英文文献和19篇中文文献，纳入文献的基本特征见表1。

2.2统计分析结果Meta分析结果发现，PTEN在乳腺癌组织中的表达与患者的ER表达(OR=3.16，95%CI：2.01～4.97，P<0.01)及PR表达(OR=2.27，95%CI：1.70～3.04，P<0.01)，呈显著正相关。同时，PTEN表达随着乳腺癌患者的淋巴转移(OR=0.36，95%CI：0.27～0.49，P<0.01)、临床分期增高(OR=2.59，95%CI：2.04～3.30，P<0.01) 及组织学分级增高(OR=2.19，95%CI：1.74～2.75，P<0.01) 而表达降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。纳入文献的数据合并结果及异质性评估见表2。

2.3亚组分析研究结果发现，PTEN表达与乳腺癌患者的ER表达及淋巴转移的关联研究存在一定的异质性(表2)。通过亚组分析进一步观察，结果显示中国乳腺癌患者的PTEN表达与ER表达呈正相关(OR=4.29，95%CI：2.85～6.45，P<0.01)；而其他国家乳腺癌患者的PTEN表达与ER表达无显著相关性(OR=1.08，95%CI：0.68～1.70，P=0.75)。此外，中国乳腺癌患者的PTEN表达随患者发生淋巴转移而表达降低(OR=0.28，95%CI：0.21～0.38，P<0.01)；而其他国家乳腺癌患者的PTEN表达与患者是否发生淋巴转移无显著相关性(OR=0.74，95%CI：0.51～1.06，P=0.10)。

2.4发表偏倚评估以PTEN与ER表达相关性研究的OR值为横坐标，以其自然对数的标准误为纵坐标，绘制漏斗图。可见散点分布基本对称，无明显的发表偏倚，表明研究结果较可靠，见图1。

表1　纳入研究文献的基本特征

IHC：标准免疫组织化学。

表2　PTEN蛋白表达与乳腺癌患者临床病理指标关联的Meta分析

图1　PTEN蛋白表达与ER表达关联研究漏斗图

3讨论

随着分子生物学和遗传学的不断进展，越来越多的研究表明，癌基因的异常激活和抑癌基因的失活与乳腺癌癌变发生密切相关。抑癌基因PTEN，定位于染色体10q23，可通过调节磷脂酰肌醇-3激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(PI3K/AKT)等多种信号转导途径，进而调控细胞周期，调节细胞迁移，并在乳腺癌的治疗耐药及复发转移中发挥重要作用[10,16]。越来越多的研究表明，PTEN在乳腺癌组织中的表达水平显著低于正常乳腺组织或乳腺良性病变组织[3,28-30]。其表达下调可能与基因突变、基因纯合子丢失、基因甲基化、转录或翻译水平异常等相关。提示PTEN表达与乳腺肿瘤的发生关系密切，可作为乳腺癌检测的分子标记物。作为激素依赖性肿瘤，激素受体ER、PR在乳腺癌的分子分型及内分泌治疗中有着重要意义。Shoman等[32]研究表明，在ER阳性乳腺癌中，PTEN表达下调与患者抗雌激素治疗失败相关联。Beelen等[5]报道称，PTEN表达降低的患者，其PR表达水平也显著降低。结合本研究，提示PTEN表达降低与ER、PR表达下降密切相关，联合检测PTEN可有效预测雌激素的抵抗水平。同时，PTEN蛋白随着患者的淋巴转移，临床分期和组织学分级增高而表达降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。这说明，PTEN低表达患者，其肿瘤恶性程度较高，分化较差，更易出现淋巴转移，提示PTEN可作为乳腺癌恶性程度的标记物。肿瘤浸润转移的先决条件是细胞外基质降解，细胞外基质由胶原蛋白、层粘连蛋白、纤维粘连蛋白等组成。研究表明，PTEN具有磷酸酶活性，能使局灶粘连激酶(FAK) 去磷酸化，从而减少Ⅳ型胶原酶基质金属蛋白酶(MMP-9)的分泌，抑制细胞外基质降解[28]。PTEN突变失活，对FAK的抑制作用解除，MMP-9分泌增加，使局部粘连作用减低，细胞游走性增加。且PTEN编码的蛋白与细胞骨架蛋白Tensin具有同源性，参与细胞外基质的黏附，从而影响细胞迁移，是肿瘤浸润和转移的重要分子学基础[29]。此外，Lee等[18]报道称，PTEN可能通过抑制PI3K活性，调节血管内皮生长因子(VEGF)的信号途径，减弱VEGF对血管内皮细胞的作用。当PTEN表达下调时，容易促进肿瘤血管生成，为肿瘤生长、浸润和转移创造条件。

本研究在评估PTEN表达与乳腺癌患者的ER表达及淋巴转移的关联研究中显示入选文献存在一定的异质性。为了探讨异质性产生的原因，本研究对不同地区的研究结果进行了亚组分析，结果显示，中国与其他国家的乳腺癌患者PTEN表达与患者的ER状态及淋巴转移情况存在一定差异。分析异质性可能的来源及对研究结果可能的影响：(1)PTEN在乳腺癌中的表达存在一定的地域差异，本研究综合分析了中国与其他不同地域、不同种族人群合并后的结果，可能会干扰Meta分析的最终评价；(2)本研究纳入的外文文献较少，且不同地区的样本容量存在差异，可能会影响最终的结果；(3)乳腺癌病理组织学分型较复杂，不同的病理组织类型，免疫组织化学中采用不同的抗体及不同的衡量标准，都可能影响结果的稳定性；(4)尽管漏斗图结果未发现明显的发表偏倚，但阳性结果的研究比阴性结果的研究容易发表，且受研究条件的限制，本研究仅纳入了公开发表且仅限于中英文形式的相关文献，难免会产生此类偏倚。

总之，PTEN在乳腺癌中的作用已受到日益关注，联合检测PTEN及其他预后指标，对乳腺癌的早期诊断、规范化治疗和预后判断有着重要临床意义。但今后应开展更多高质量、大样本的前瞻性随机对照试验予以进一步的验证。

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Clinicopathological significance of PTEN protein expression in breast cancer:a Meta-analysis*

FangCheng,LongXinghua△

(ClinicalLaboratory,ZhongnanHospitalofWuhanUniversity,Wuhan,Hubei430071,China)

[Abstract]ObjectiveTo evaluate the association between the expression of PTEN protein and the clinicopathological characteristics of breast cancer patients.MethodsAll eligible studies regarding the association of PTEN protein expression with clinicopathological features in patients with breast cancer were retrieved from PubMed,Embase,Cochrane Library,CNKI and Wanfang databases.Odds ratio(OR) with corresponding 95% confidence interval(95% CI) form eligible studies were pooled.Heterogeneity and publication bias were also evaluated.All analyses were operated using RevMan 5.2 software.ResultsA total of 28 articles containing 3 172 patients were ultimately included for this Meta-analysis.Our findings revealed that the expression level of PTEN was significantly correlated with estrogen receptor status(OR=3.16，95%CI：2.01-4.97，P<0.01),progesterone receptor status(OR=2.27，95%CI：1.70-3.04，P<0.01),lymph node metastasis(OR=0.36，95%CI ：0.27-0.49，P<0.01),clinical stage(OR=2.59，95%CI：2.04-3.30，P<0.01) and histological grade(OR=2.19，95%CI：1.74-2.75，P<0.01).ConclusionAberrant PTEN expression might have strong impacts on carcinogenesis,tumor progression,invasion and prognosis,which makes it a potential biomarker for early cancer screening and endocrine therapy in breast cancer.

[Key words]breast neoplasms；tumor suppressor proteins；PTEN；estrogen receptor;clinicopathological features;Meta-analysis

doi:·循证医学·10.3969/j.issn.1671-8348.2016.03.030

*基金项目：国家自然科学基金资助项目(30873044、81272372)；教育部留学回国人员科研启动基金资助项目(教外司留[2011]1139号)。

作者简介：方程(1989-)，在读博士，主要从事乳腺癌相关机制研究。△通讯作者，E-mail：xlong888@yahoo.com。

[中图分类号]R737.9

[文献标识码]A

[文章编号]1671-8348(2016)03-0383-04

(收稿日期：2015-09-01修回日期：2015-10-27)