儿童化脓性中耳炎分泌物细菌培养及药敏分析

杨丽霞 戎美燕 张晓涛

儿童化脓性中耳炎分泌物细菌培养及药敏分析

杨丽霞 戎美燕 张晓涛

目的 通过研究本地区儿童化脓性中耳炎的主要致病菌与耐药情况，指导临床合理用药。方法 对161例儿童化脓性中耳炎的耳分泌物进行细菌培养鉴定与药物敏感试验。结果 161耳脓液标本中142耳培养出病原菌，检出率为88.20%，其中6份检出2种病原菌，共分离出致病菌148株。其中细菌类138株（93.24%），金黄色葡萄球菌54株（MRSA 17株），肺炎链球菌52株，化脓链球菌7株，表皮葡萄球菌6株，其它19株；真菌类10株（6.76%）。MRSA对克林霉素、青霉素、红霉素耐药率很高，对夫西地酸、庆大霉素、左氧氟沙星、米诺环素、诺氟沙星耐药率低，MSSA对青霉素、红霉素耐药率高，对其余抗菌药物的耐药率较低，二者均未发现对呋喃妥因、万古霉素、替考拉宁、利福平、奎奴普丁/达福普汀耐药的菌株；肺炎链球菌对氯霉素、左氧氟沙星、喹奴普汀/达福普汀、万古霉素敏感，对克林霉素、四环素、复方新诺明、红霉素耐药。结论 本地区儿童化脓性中耳炎的主要致病菌是金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌，临床医生应根据药敏结果合理使用抗生素。

儿童；化脓性中耳炎；细菌培养；药敏分析

儿童化脓性中耳炎是耳科常见病、多发病之一，多数患儿经积极治疗，及时控制感染，鼓膜穿孔可自动愈合而痊愈。若病变严重或治疗不当，可转为慢性或有并发症、后遗症，给儿童造成永久性听力障碍。因此对其脓性分泌物作细菌学分析有重要临床意义。本研究对161例儿童化脓性中耳炎患者的分泌物进行常规细菌培养和药物敏感试验（部分患儿加做耳分泌物超高倍形态学检查），以便为临床合理用药提供科学依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 标本来源 选取2013年8月～2015年4月就诊于山西省大同市第一人民医院耳鼻喉科诊断为急性化脓性中耳炎的门诊患儿耳分泌物161例，其中，男91例，女70例。年龄0～14岁，1～3岁50例，小于1岁84例，最小日龄为5天。就诊前均无特殊治疗。

1.2 标本采集 在普通照明和额镜下操作，先用75%酒精棉球清洁外耳道皮肤，再用一次性采样拭子在患者外耳道深部或鼓室内取分泌物，并于半小时内送至细菌室进行耳分泌物超高倍形态学检查（患儿耳分泌物较少此项检查未做）、细菌培养及药物敏感试验。

1.3 细菌培养与鉴定 所有标本分别接种于血平板、巧克力平板、麦康凯平板、沙保罗显色培养基，使用法国生物梅里埃公司的VITEK 2分析仪进行全自动细菌鉴定与药敏试验；部分进行耳分泌物超高倍形态学检查，包括革兰氏染色、湿片镜检、KOH试验，使用ACT-2000超高倍显微系统判断。

2 结果

2.1 病原菌种类与分布 161耳脓液标本中142耳培养出病原菌，检出率为88.20%，其中6份检出2种病原菌，共分离出致病菌148株。见表1。其中细菌类138株（93.24%）：金黄色葡萄球菌54株，产β-内酰胺酶49株，对苯唑西林耐药的多重耐药的金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant staphylococcus aureus，MRSA）17株，对苯唑西林敏感的金黄色葡萄球菌(methicillin sensitive staphylococcus aureus，MSSA)37株；肺炎链球菌52株；化脓链球菌7株；表皮葡萄球菌6株；其它19株。真菌类10株（6.76%）。133耳分泌物做超高倍形态学检查，115耳发现细菌，5耳发现真菌，而病原菌培养结果显示119耳分泌物培养出病原菌。

表1 148例病原菌分布

2.2 病原菌耐药情况 主要菌株对常用抗生素的耐药情况见表2～表4。

表2 主要病原菌药敏试验结果分析（%）

表3 主要病原菌药敏试验结果分析（%）

3 讨论

儿童是急性化脓性中耳炎的好发人群。随着抗生素的广泛使用，抗菌谱发生变化，又由于儿童特殊的生理解剖结构其致病菌与成人有所不同，因此需要及时了解病原菌的分布及耐药性，合理的选择有效的抗生素进行治疗。由于化脓性中耳炎的常见病原菌为需氧菌[1-2]，故对标本只进行了需养菌培养，11.80%的阴性标本可能是与厌氧菌感染、取材有关。

本资料显示儿童化脓性中耳炎发病率最高年龄阶段为小于1周岁，84例占52.17%；其次为1～3岁50例占本组试验中31.01%；最后为4～12岁27例占16.77%。主要为3岁以下，这一结果和文献报道相近[3-6]。究其原因分析如下：（1）由于小儿咽鼓管短、平、宽，潜藏于鼻咽部的致病菌和分泌物易经咽鼓管侵入中耳。（2）小儿抵抗力较差，极易感染各种传染病，如百日咳、猩红热等，致病菌易经咽鼓管侵入中耳引发中耳炎。（3）小儿的中耳免疫功能尚未发育完全，预防能力较差。（4）哺乳、饮水方法不当引发呛咳，乳汁或饮水经咽鼓管流入中耳，引发感染。

本研究结果表明，引起本地儿童化脓性中耳炎的主要致病菌是金黄色葡萄球菌占到了36.49%，其次是肺炎链球菌35.14%，不同于经典的小儿急性化脓性中耳炎，90%为溶血性链球菌和肺炎双球菌感染[7]，个别患儿为真菌感染占6.76%，这与陈水安[8]、陈春燕报道相近[9]。MRSA对克林霉素、红霉素、青霉素的耐药率均≥82.35%，说明MRSA多重耐药严重，对其他受试药的耐药率为17%～60%，MSSA除对青霉素、红霉素耐药率高达86.49%、70.27%，对其余抗菌药物的耐药率较低，为0%～28%之间。这说明大多数抗菌药物对MSSA具有较好的抗菌活性，而MRSA对大多数抗菌药物抗菌活性较差。金黄色葡萄球菌对青霉素的耐药率最高，只有5株敏感且不产生β-内酰胺酶，其余都产生β-内酰胺酶，可以推测其对青霉素的耐药主要是由于产生了β-内酰胺酶所致。MRSA、MSSA对万古霉素、替考拉宁、利福平、喹奴普汀/达福普汀的敏感率均为100%；肺炎链球菌对氯霉素、左氧氟沙星、喹奴普汀/达福普汀、万古霉素敏感为80.77%以上，对克林霉素、四环素、复方新诺明、红霉素耐药为82.69%以上，其中红霉素为100%耐药；表皮葡萄球菌占病原菌总数约为4.05%，表皮葡萄球菌属于凝固酶阳性细菌，为条件改变菌；化脓链球菌是另一类常见的细菌，广泛存在于自然界和人及动物粪便和健康人鼻咽部。表皮葡萄球菌、化脓链球菌二者致病考虑幼儿免疫力低导致其治病。真菌药敏试验结果显示，对于大多数抗真菌药物敏感，如5-氟胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑。133耳分泌物做超高倍形态学检查，115耳发现细菌，5耳发现真菌，共120耳（占90.23%），而病原菌培养结果显示119耳（占89.47%）分泌物培养出病原菌，此结果表明耳分泌物做超高倍形态学检查对于儿童化脓性中耳炎的初步诊断具有重要意义。

综上所述，本地区儿童化脓性中耳炎的主要病原菌为金黄色葡萄球菌与肺炎链球菌，其次为化脓链球菌与表皮葡萄球菌，个别患儿为真菌感染。了解病原菌分布与药物敏感性，对降低细菌耐药性、合理应用抗生素、提高化脓性中耳炎疗效有重要意义，在检验结果出来之前，可据耳分泌物超高倍镜检大致判断是细菌还是真菌，若为细菌首选头孢类药物，而喹诺酮类、氨基糖苷类、四环素类、氯霉素、万古霉素、替考拉宁虽然敏感性较高，但考虑其耳毒性、肾毒性，小儿不宜使用；若有菌丝或孢子为真菌感染，可选择抗真菌药，防止使用抗生素加重病情，从而避免误诊。

表4 真菌药敏试验结果分析（%）

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Objective To guide proper clinical medication through analysing the main pathogen and the drug resistant situation of suppurative otitis media of the local children. Methods Making the bacterial culture and antibiotic susceptibility tests with the ear secretion collected randomly of 161 children with suppurative otitis media. Results Among the 161 cases, pathogen were found in 142 cases, as the detectable rate was 88.20%, with that 2 kinds of pathogen were found in 6 cases, and 148 pathogenic germs were separated totally. Among them, 138 were bacterial (93.24%), of 54 staphylococcus aureus (17 multi-drug resistant to oxacillin), 52 streptococcus pneumoniae, 7 streptococcus pyogenes, 6 staphylococcus epidermidis, and 19 others, and 10 were fungi(6.67%).MRSA has a high resistance rate to clidamycin, penicillin and erythrocin, while a low rate to fusidic acid, gentamicin, levof l oxacin, minocycline and norf l oxacin. MSSA has a high resistance rate to penicillin and erythrocin, while a low rate to the other antimicrobial. And there is no found of resistance to macrodantin, vancomycin, teicoplanin, rifampicin, quinupristin/dalfopristin in both of them two. Streptococcus pneumoniae is susceptible to chloramphenicol, levof l oxacin, quinupristin/dalfopristin and vancomycin, while is resistant to clindamycin, tetracycline, sulfamethoxazole and erythromycin. Conclusion The main pathogen of the local children suppurative otitis media are staphylococcus aureus and streptococcus pneumoniae. The clinicians should use antibiotics reasonably according to the antimicrobial susceptibility results.

Child; Suppurative otitis media; Bacterial culture; Drug susceptibility analysis

10.3969/j.issn.1009-4393.2016.1.004

山西 037009 山西省大同市第一人民医院耳鼻喉科 （杨丽霞 戎美燕 张晓涛）

杨丽霞 E-mail:945099490@qq.com