糖尿病与非糖尿病干眼症患者临床特点及相关细胞因子表达研究

西安市第四医院眼科(西安 710004)

白淑玮　 李凤至



糖尿病与非糖尿病干眼症患者临床特点及相关细胞因子表达研究

西安市第四医院眼科(西安 710004)

白淑玮 李凤至

摘要目的：比较糖尿病与非糖尿病干眼症患者的临床特点。方法：收集干眼症患者89例，其中糖尿病干眼症患者42例(DM组)，非糖尿病干眼症患者47例(非DM组)，比较两组间泪液破裂时间(BUT)、泪液分泌实验、泪液渗透压和炎性因子的表达水平及其相关性。结果：泪膜破裂时间两组比较差异无统计学意义(P<0.05)。角膜染色评分和泪液分泌试验结果两组比较差异均具有统计学意义(P⟨0.05)。泪液渗透压和白细胞介素-8(IL-8)表达量两组比较差异均具有统计学意义(P⟨0.05)。而IFN-γ表达量两组比较差异无统计学意义(P<0.05)。两组中角膜染色评分和泪液中IL-8含量具有一定的相关性(r=0.809，P=0.000)。结论：糖尿病和非糖尿病干眼症患者的临床特点有其相同之处，但也存在着一定的差异(角膜染色、泪液渗透压)，其可能与泪液中细胞因子的分泌有关。

主题词干眼病糖尿病/并发症@泪液渗透压细胞因子类

干眼症是指泪液的量或质的异常引起的泪膜不稳定和眼表损害为特征的多种病理状态的总称[1]。近年来，糖尿病(Diabetes mellitus,DM)患者的干眼症也越来越引起人们的重视，国内外学者对DM患者角膜和结膜的改变进行研究，发现DM患者较易出现眼部不适症状，如眼干涩、异物感、灼热感，严重者出现角膜上皮的改变。目前国内外尚未见干眼症DM患者与非DM患者的临床特点分析的相关报道。本研究对我院门诊干眼症患者进行临床资料分析，以便在临床工作中，及时给予糖尿病干眼症患者提供有效治疗提供理论依据。

资料与方法

1 一般资料

选取西安市第四医院2013年1～12月在我院就诊，年龄45～60岁，确诊为干眼症患者89例。排除标准：3个月内眼部有活动性炎症，局部使用任何滴眼液，角膜接触镜佩戴史，眼部外伤史，眼部激光或其他眼部手术病史，胶原血管疾病(如：Sjogren’s 综合征)。在89例患者中，根据1998年WHO糖尿病诊断标准确诊为糖尿病干眼症患者42例(84眼)(DM组)，非糖尿病干眼症患者47例(94眼)(非DM组)。其中非DM组患者47例，男11例，女36例，平均年龄50.77±4.43岁;DM组患者42例，男9例，女33例，平均年龄51.76±3.08岁。两组男女性别构成,年龄上差异无统计学意义(P<0.05)。所有患者均接受干眼症症状询问及相关检查。糖尿病患者进行即时血糖监测。

2临床检查项目和方法

2.1角膜染色:将角膜分为四个区域，分别为颞上、颞下、鼻下、鼻上;染色评分为、0分(正常无着染)、1分(轻度着染：微小点染)、2分(中度着染：中等程度点染)及3分(重度着染：大量点染，并且有些呈现片状着染)，四个区域评分相加为单眼的角膜染色评分。最后得出的评分为双眼的均值。

2.2 BUT和泪液分泌试验泪膜破裂时间(BUT)：涂抹20g/L荧光素钠在下睑结膜囊内，嘱患者闭合眼睑，可使荧光素钠均匀涂布于角膜表面，充分暴露角膜，裂隙灯下用钴蓝光照射，一次完全瞬目后到泪膜上出现第一个破裂点的时间，测量泪膜破裂时间是测量泪膜稳定性的唯一的直接测量方法，其正常值在10s以上。泪液分泌试验(Schirmer I试验，SIT)，即泪腺分泌功能检查，采用泪液检测滤纸条刻度为0端折弯3mm，置于下睑内1/3结膜囊内，嘱患者闭目5min，检测滤纸条湿润所对应的刻度值。

2.3泪液渗透压检查：在外眦部泪湖处取50μl泪液样本，采用WAPRO5520露点渗透压仪(美国wescor公司)进行渗透压的测量。

3免疫印迹实验检测泪液中炎性介质的表达

将30μl磷酸盐缓冲液徐徐滴入结膜囊内，嘱患者轻轻瞬目一次，采用微量吸液管在外眦部泪湖取20μl泪液样本，取样本时嘱患者尽量减少瞬目以免损伤角膜上皮。将泪液样本收集在微量离心管中，储存在-70°C冰箱中以备后续试验。应用免疫印迹试剂盒(Invitrogen,美国)按照试剂盒说明书进行检测IL-8和IFN-γ。

4统计学方法

采用SPSS17.0统计学软件，计数资料进行卡方检验，计量资料进行独立样本t检验。相关性分析采用双变量相关性分析。P<0.05认为差异具有统计学意义。

结果

1干眼症的临床特点

非DM组患者BUT平均时间6.09±1.49s，DM组5.95±1.59s，两组比较差异未见统计学意义(t=0.407，P<0.05)。非DM组患者角膜染色评分均值3.91±2.45，DM组6.67±2.50，两组之间比较，差异具有统计学意义(t=5.236，P⟨0.05)。非DM组患者Schirmer I试验平均长度6.34±0.92mm，DM组5.60±1.71mm，两组比较差异具有统计学意义(t=2.599，P⟨0.05)，见附表。

2泪液渗透压和泪液中炎性因子的测定

非DM组患者泪液渗透压303.60±7.81mOsm/L，DM组311.25±8.83 mOsm/L，两组比较差异具有统计学意义(t=4.344，P⟨0.05)。IL-8在非DM组患者中量22.14±3.74ng/ml,在DM组患者中量29.31±3.954ng/ml，两组比较差异具有统计学意义(t=8.785，P⟨0.05)。IFN-γ在非DM组患者中量0.19±0.444ng/ml，在DM组患者中量0.18±0.384ng/ml，两组比较差异未见统计学意义(t=1.394，P<0.05)，见附表。在相关性分析中角膜染色评分和泪液中IL-8含量具有相关性(r=0.809，P⟨0.05)，见附图。

附图　角膜染色评分和IL-8相关性研究

组 别nBUT(s)角膜染色 评分SchirmerI(mm)泪液渗透压(mOsm/L)IL-8(ng/ml)IFN-γ(ng/ml)DM组425.95±1.596.67±2.505.60±1.71311.25±8.8329.31±3.9540.18±0.384非DM组476.09±1.493.91±2.456.34±0.92303.60±7.8122.14±3.740.19±0.444

讨论

DM患者较易罹患干眼症，而为什么DM患者中干眼症发病率较高原因目前还不是很清楚。本研究分别从泪液的质量及角膜完整性观察了DM患者干眼症组和非DM患者的临床特点的差异，并通过对泪液中IFN及IL-8含量的检测初步探讨其潜在的病理机制。

本研究参照刘祖国提出的干眼症标准[2]，结合我们临床观察，选择纳入标准:①BUT<10s为(+)，<5S为强(+);②SILT<10mm/5min为(+)，<5mm/5min为强(+);③角膜上皮点染，大于等于2分为(+)，>5分为强(+)，客观检查两项(+)伴主观症状患者，或者客观检查一项强(+)伴主观症状。共纳入89例干眼症患者，所有患者均有干眼症眼部不适症状包括：眼干涩、异物感、灼热感等。

对DM干眼症患者和非DM干眼症患者临床特点比较中显示，两组间BUT虽然未见显著性差异，但是角膜染色和SIT都具有显著性差异，说明DM患者干眼症患者的临床表现较非DM干眼症患者严重。DM患者眼表的损害和泪膜质和量的异常较为常见，这在很多文献中都有报道。DM患者通常伴有周围神经病变，引起角膜敏感性下降，并且对泪腺的刺激信号减少，泪液分泌进一步下降,又再次加重眼表损害[3]。Zou 等[4]对糖尿病猴的研究还指出 ,由于过多的非酶类糖基化使得异常胶原纤维沉积在角膜上皮细胞中，角膜厚度不均，角膜上皮与基底膜连接减弱，角膜上皮增生减少局部降解。这些研究与本研究结果都提示了，DM干眼症患者对眼表损害较重，干眼症的症状更严重。

泪液渗透压被认为是诊断和分类干眼症的最有效手段。我们研究结果指出非DM组患者泪液渗透压为303.60mOsm/L，DM组患者泪液渗透压为311.25 mOsm/L。正常人眼的渗透压为300 mOsm/L ，泪液渗透压的增高引起眼部不适症状[5]。本研究干眼症患者所测得泪液中渗透压均高于300 mOsm/L ，并且DM组患者泪液渗透压明显增高，这与很多研究结果相一致[6,7]。泪液渗透压的增高会引起眼表上皮细胞一系列的炎症级联反应，通过激活信号转导通路，如丝裂原活化蛋白激酶(MAPKS)通路，随之细胞因子(IL-1、IL-8、TNF、IFN-γ)的大量释放，导致眼表的炎症反应[8]。我们研究发现干眼症患者泪液中IL-8和IFN-r在泪液中表达，并且发现DM组患者泪液中IL-8含量明显增多。Lee 等[9]对干眼症炎性因子的研究中发现IL-8和IFN-γ在泪液中高表达，并指出他们随着干眼症的严重程度不同而表达量不同。在相关性分析我们得出角膜染色评分和泪液中IL-8含量具有相关性。有人研究指出干眼症患者角膜染色评分与泪液中IL-1α具有相关性，虽然与本研究得出的相关炎性因子不同，但都说明泪液中炎性因子的表达对干眼症的严重程度有着一定的影响。

在临床工作中，我们对干眼症患者中的DM患者并未给予足够的重视，虽然非DM干眼症患者和DM干眼症患者的临床特点有很多相同之处，但是他们也存在一定的差异性，尤其体现在角膜染色评分和泪液渗透压的不同。通过了解他们的临床特点，来指导我们在临床工作中及时给予对症治疗。

参考文献

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[2]刘祖国，彭娟.干眼的诊断和治疗规范[J].眼科研究，2008,26(3)：161-164.

[3]Achtsidis V, Eleftheriadou I, Kozanidou E,etal. Dry eye syndrome in subjects with diabetes and association with neuropathy[J]. Diabetes Care,2014,37(10):e210-1.

[4]Zou C, Wang S, Huang F,etal.Advanced glycation end products and ultrastructural changes in corneas of long-term streptozotocin-induced diabetic monkeys[J].Cornea,2012,31(12):1455-1459.

[5]石迎辉，王丽娅，陈慷.角膜接触镜对泪液渗透压的影响[J].眼科研究,2010,28:564-565.

[6]崔乙，徐国兴. 糖尿病患者干眼的研究进展[J]. 国际眼科杂志,2014,9:1602-1605.

[7]Fuerst N, Langelier N, Massaro-Giordano M,etal.Tear osmolarity and dry eye symptoms in diabetics[J]. Clin Ophthalmol,2014,8:507-515.

[8]Lee KY, Rhim JW, Kang JH. Kawasaki disease: laboratory findings and an immunopathogenesis on the premise of a “protein homeostasis system”[J]. Yonsei Med J, 2012,53:262-275.

[9]Lee JH, Min K, Kim SK,etal.Inflammatory cytokine and osmolarity changes in the tears of dry eye patients treated with topical 1%methylprednisolone[J]. Yonsei Med J,2014,55(1):203-208.

(收稿：2015-05-18)

【中图分类号】R587.2

【文献标识码】A

doi：10.3969/j.issn.1000-7377.2016.04.046