老年糖尿病肾病患者血清内转化生长因子-β1和过氧化物酶体增殖物活化受体-γ表达水平

陈　蔷　俞　娉　于　冰

(杭州市第三人民医院内分泌科，浙江　杭州　310009)



老年糖尿病肾病患者血清内转化生长因子-β1和过氧化物酶体增殖物活化受体-γ表达水平

陈蔷俞娉于冰

(杭州市第三人民医院内分泌科，浙江杭州310009)

〔摘要〕目的通过检测糖尿病肾病(DN)患者血清转化生长因子(TGF)-β1和过氧化物酶体增殖物活化受体(PPAR)-γ的蛋白含量及mRNA变化水平，探讨二者是否参与DN的发病进程。方法DN患者50例作为DN组，同期体检健康老年人50例作为对照组。两组均清晨空腹取血，采用酶联免疫吸附(ELISA)实验和实时聚合酶链反应(RT-PCR)法检测血清中TGF-β1和PPAR-γ的蛋白及mRNA水平。结果与对照组比较，DN组血清中TGF-β1的蛋白含量及mRNA水平明显升高(P<0.01)、PPAR-γ的蛋白含量及mRNA水平明显降低(P<0.01)，且TGF-β1和PPAR-γ具有负相关性(r=-0.689，P=0.042；r=-0.711，P=0.036)。结论TGF-β1水平的上调和PPAR-γ水平的下调及二者具有明显负相关性，说明可能参与了DN的发病进程。

〔关键词〕糖尿病肾病；转化生长因子-β1；过氧化物酶体增殖物活化受体-γ

糖尿病肾病(DN)是糖尿病继发微血管病变最为严重的并发症，常导致患者生活质量明显下降甚至死亡〔1〕。本研究探讨DN患者血清中的转化生长因子(TGF)-β1和过氧化物酶体增殖物活化受体(PPAR)-γ的蛋白含量及mRNA变化水平及机制。

1资料与方法

1.1一般资料随机选取我院2015年2～10月入院且同意受试的DN患者50例作为DN组，其中男28例，平均年龄(54.3±2.6)岁，女22例，平均年龄(55.9±3.7)岁；同期我院接受健康体检正常老年人50例作为对照组，其中男25例，平均年龄(57.9±3.5)岁，女25例，平均年龄(55.7±2.9)岁。DN患者均经WHO糖尿病及DN的诊断标准〔2〕筛选，排除脏器官良性或恶性肿瘤，无心肝肺功能不全，无合并其他系统感染，具有可比性(P>0.05)。

1.2实验试剂及主要仪器抗人酶联免疫试剂盒TGF-β1和PPAR-γ(碧云天生物有限公司)；Trizol、RT-PCR试剂盒(塔克拉生物有限公司)。Epoch酶标仪(美国)、Biometra PCR扩增仪(美国)。

1.3检测血清中TGF-β1和PPAR-γ的蛋白含量及mRNA水平清晨空腹取静脉血5 ml，离心1 000 r/min，分离血清液氮中冻存待测。一部分血清通过酶联免疫法严格按照试剂盒操作检测TGF-β1和PPAR-γ蛋白含量；另一部分用Trizol提取血清内总RNA，通过RT-PCR试剂盒实现引物扩增，采用凝胶成像图像分析系统分析TGF-β1和PPAR-γ的mRNA水平。

1.4统计学方法采用SPSS16.0统计软件进行t检验，Spearman等级相关分析。

2结果

2.1两组血清中TGF-β1和PPAR-γ的蛋白和mRNA含量水平与对照组比较，DN组血清中TGF-β1的蛋白和mRNA含量水平明显升高(P<0.01)、PPAR-γ的蛋白和mRNA含量水平明显降低(P<0.01)。见表1。

2.2TGF-β1和PPAR-γ的相关性DN组血清中TGF-β1、PPAR-γ均具有负相关性(r=-0.689，P=0.042；r=-0.711，P=0.036)。

表1　各组血清TGF-β1和 PPAR-γ的蛋白含量及

与对照组比较：1)P<0.01

3讨论

DN是糖尿病微血管重要并发症之一，其发病率达20%～40%，主要病变累及部位是肾小球系膜、毛细血管基膜及细胞外基质，系膜的增生、基膜的增厚外加细胞外基质的大量积聚都将导致肾小球硬化，而糖尿病患者血液的高血糖、高凝、髙聚及高黏状态都是DN的继发因素〔3〕。研究证实，多种细胞因子与炎性因子参与细胞外基质成分的合成及代谢〔4〕。

TGF-β1水平升高能促进肾小球系膜细胞、肾小球毛细血管增生肥大，从而促进肾小管间质纤维化，增加细胞外基质在肾小球及肾小管间质内的异常堆积，导致肾脏受损及有效肾小球的减少〔4，5〕；PPAR-γ是一种核受体，它存在于人类染色体上，对脂肪细胞和胰岛素有重要的作用，当PPAR-γ被激活时能通过降低DM血糖、血脂、改善胰岛素抵抗，从而对肾脏组织起到保护作用〔6〕。TGF-β1和PPAR-γ在DN发生发展中扮演着尤为重要的角色，二者可能通过直接诱导肾小球系膜细胞凋亡及抑制其增殖参与了DN的发病进程，下调TGF-β1水平和上调PPAR-γ水平可能成为临床治疗DN的新靶点。

4参考文献

1徐鹏杰,李航,徐亚兰,等.2型糖尿病并发慢性肾脏病临床病理特点分析〔J〕.中华肾脏病杂志,2010;26(10):731-5.

2叶任高,陆再英,谢毅,等.内科学〔M〕.北京:人民卫生出版社,2004：798-80.

3Lee WC,Chen HC,Wang CY,etal.Cilostazolameliorates nephropathy in type 1 diabetic rats involvingimprovement in oxidative stress and regulation of TGF-Beta and NF-kappaB〔J〕.Biosci Biotechnol Biochem,2010;74(7):1355-61．

4郑亚萍,刘春杰.赤芍对早期糖尿病肾病大鼠肾脏AngⅡ、ET-1、PKC及TGF-β1的影响〔J〕.当代医学,2012;18(23):20-3.

5刘圣,陈象青,唐丽琴,等.复方黄连胶囊对早期糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1/BMP-7表达失衡及其Smad信号通路的调控作用〔J〕.中国中药杂志,2015;40(5):938-45.

6田雪,于倩,张捷,等.糖尿病大鼠肾组织中PPAR-γ对TGF-β1、c-Ski调控作用的研究〔J〕.天津医科大学学报,2013;19(1):31-5.

〔2014-11-25修回〕

(编辑苑云杰)

基金项目：浙江省中医药管理局(2013ZB106)

通讯作者：俞娉(1967-)，女，主任医师，主要从事糖尿病研究。

〔中图分类号〕R589

〔文献标识码〕A

〔文章编号〕1005-9202(2016)09-2110-02；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.09.026

第一作者：陈蔷(1965-)，女，硕士，副主任医师，主要从事糖尿病并发症发病机制的研究。