人巨细胞病毒致肝炎综合征婴儿治疗前后外周血miRNA水平变化及意义

唐文诗

桂林市妇幼保健院新生儿科，广西 桂林 541001

人巨细胞病毒致肝炎综合征婴儿治疗前后外周血miRNA水平变化及意义

唐文诗

桂林市妇幼保健院新生儿科，广西 桂林 541001

目的 探讨人巨细胞病毒致肝炎综合征婴儿治疗前后外周血miRNA水平变化及意义。方法 选取桂林市妇幼保健院新生儿科2013年12月-2014年12月收治的人巨细胞病毒致肝炎综合征婴儿30例设为观察组，并选择30名健康婴儿设为对照组。结果 治疗前，观察组的各项miRNA表达水平均显著高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05);治疗后，观察组中更昔洛韦敏感组的hsa-miR-433与更昔洛韦不敏感组比较，差异无统计学意义(P>0.05)，但hsa-miR-92、hsa-miR-96、hsa-miR-183差异均有统计学意义(P<0.05);观察组中更昔洛韦不敏感组的hsa-miR-433、hsa-miR-96较治疗前均显著下降(P<0.05)；hsa-miR-92、hsa-miR-183较治疗前差异均无统计学意义(P>0.05)。而更昔洛韦敏感组的hsa-miR-183较治疗前显著上升，hsa-miR-433较治疗前显著下降(P<0.05)；hsa-miR-92、hsa-miR-96较治疗前差异无统计学意义(P>0.05)。结论 人巨细胞病毒致肝炎综合征婴儿治疗前后外周血miRNA水平出现变化，miRNA对肝炎综合征婴儿的临床治疗具有一定的指导意义。

肝炎综合征；巨细胞病毒；婴儿；miRNA

人巨细胞病毒致肝炎综合征是一种常见的婴幼儿疾病，严重影响到婴儿的生长发育。近年来，一些学者研究[1-2]发现，人体血浆中的循环微小RNA可以作为多种疾病的分子标记物。且有研究[3]表明，人巨细胞病毒会通过对宿主细胞某些miRNA表达的调节来实现潜伏感染等，导致一些人巨细胞病毒致肝炎综合征患儿临床病情缓解困难。为此，关于miRNA与人巨细胞病毒致肝炎综合征婴儿预后相关问题成为研究的焦点。本研究中，我们即对人巨细胞病毒致肝炎综合征婴儿治疗前后外周血miRNA水平变化及意义进行分析。

1 资料与方法

1.1 一般资料 随机选取桂林市妇幼保健院新生儿科2013年12月-2014年12月收治的人巨细胞病毒致肝炎综合征婴儿30例设为观察组，所有患者均经临床诊断确诊为人巨细胞病毒致肝炎综合征。男16例，女14例，年龄1～3个月。选取30名健康婴儿设为对照组，男15名，女15名，年龄1～3个月，两组一般资料经比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法 给予观察组患者常规治疗，包括常规保肝治疗和更昔洛韦治疗及其他对症治疗等，连续治疗4周。分别在观察组治疗前和治疗后抽取两组新生儿的清晨空腹静脉血送检，离心处理后进行miRNA提取，并进行反转录与实时荧光定量PCR检测。miRNA抽提试剂盒由上海晶旷生物科技有限公司提供，miRNA反转录试剂盒由北京信诺金达生物科技有限公司提供，miRNA、实时荧光定量PCR试剂盒由武汉中帜生物科技有限公司提供，引物由广州行知生物科技有限公司合成。

1.3 统计学处理 采用SPSS 17.0软件进行统计分析。对于符合正态分布的连续变量资料行t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 更昔洛韦治疗结果 经治疗，16例患儿为更昔洛韦敏感，14例为更昔洛韦不敏感。

2.2 治疗前两组miRNA表达水平比较 治疗前，观察组的各项miRNA表达水平均显著高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05，见表1)。

2.3 治疗后观察组miRNA表达水平分析 治疗后，观察组中更昔洛韦敏感组的hsa-miR-433与更昔洛韦不敏感组比较，差异无统计学意义(P>0.05)；但has-miR-92、hsa-miR-96、hsa-miR-183经比较，差异均有统计学意义(P<0.05，见表2)。

表1 治疗前两组miRNA表达水平比较±s)Tab 1 Comparison of miRNA expression levels between two groups before treatment ±s)

注：与对照组相比，*P<0.05；与更昔洛韦敏感组相比，#P<0.05。

表2 治疗后观察组miRNA表达水平比较±s)Tab 2 Comparison of miRNA expressions levels in the observation group after treatment ±s)

2.4 治疗前后观察组miRNA表达水平分析 对观察组中更昔洛韦敏感组、更昔洛韦不敏感组的miRNA表达水平变化情况进行分析，可得更昔洛韦不敏感组的has-miR-433、hsa-miR-96较治疗前均显著下降(P<0.05)；hsa-miR-92、hsa-miR-183较治疗前差异均无统计学意义(P>0.05)。而更昔洛韦敏感组的hsa-miR-183较治疗前显著上升，hsa-miR-433较治疗前显著下降(P<0.05)；hsa-miR-92、hsa-miR-96较治疗前差异均无统计学意义(P>0.05)。

3 讨论

巨细胞病毒感染的特征是出现有典型的胞浆及核内包涵体的巨大细胞，故名巨细胞病毒[4]。该病毒在人群中感染非常广泛，多数感染者无临床症状，但在一定条件下侵袭多个器官和系统，可产生严重疾病，母婴传播是巨细胞病毒感染引起婴儿肝炎综合征的主要途径[5]。

miRNA是一类基因表达调节物，近年来，通过研究发现，miRNA属于转录后水平调控靶基因表达的小分子RNA[6],并可以在机体免疫调控中发挥一定的作用，多种miRNA分子都可以通过影响调控免疫细胞内的信号转导途径而对机体的免疫应答产生不同的影响[7-9]。hsa-miR-433可以与野生型的主要组织相容性复合物Ⅰ类链相关基因发生互补结合，导致重组人MHCⅠ类相关基因B(MICB)表达量下降，引发自然杀伤细胞(NK)细胞毒性和免疫监视功能的下降。本次研究结果显示，观察组的各项miRNA表达水平均显著高于对照组，差异有统计学意义，治疗后观察组中更昔洛韦敏感组的hsa-miR-433与更昔洛韦不敏感组比较，差异无统计学意义，但hsa-miR-92、hsa-miR-96、hsa-miR-183差异均有统计学意义。对观察组中更昔洛韦敏感组、更昔洛韦不敏感组的miRNA表达水平变化情况进行分析，可得更昔洛韦不敏感组的hsa-miR-433、hsa-miR-96较之治疗前均显著下降；hsa-miR-92、hsa-miR-183较治疗前差异均无统计学意义。而更昔洛韦敏感组的hsa-iniR-183较治疗前显著上升，hsa-miR-433较治疗前显著下降；hsa-miR-92、hsa-miR-96较治疗前差异无统计学意义。即提示，人巨细胞病毒致肝炎综合征婴儿治疗前后外周血miRNA水平会出现一定的变化。用药前后更昔洛韦敏感组患儿的hsa-miR-96表达水平均高于更昔洛韦不敏感组患儿，且治疗之后更昔洛韦敏感组患儿的hsa-miR-183表达也高于更昔洛韦不敏感组患儿。治疗过程中，通过检测患儿hsa-miR-96与has-miR-183的表达水平，可以更好地了解临床治疗情况。如果has-miR-96表达水平低，且更昔洛韦敏感治疗中hsa-miR-183表达下降的患儿可能会出现病程延长的情况，更昔洛韦治疗无法获得满意的效果[10]。因此，临床对肝炎综合征婴儿进行治疗时，可以通过对患儿miRNA的检测来指导临床治疗，以更好地提高治疗效果。

综上所述，人巨细胞病毒致肝炎综合征婴儿治疗前后外周血miRNA水平会出现一定的变化，临床可以通过对患儿miRNA水平的检测来指导临床治疗。

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(责任编辑：王全楚)

Changes of miRNA levels in peripheral blood before and after treatment in patients with hepatitis syndrome caused by human cytomegalovirus

TANG Wenshi

Department of Newborn Pediatrics,Guilin Maternal and Child Health Care Hospital,Guilin 541001,China

Objective To investigate the changes of miRNA levels in peripheral blood before and after treatment in patients with hepatitis syndrome caused by human cytomegalovirus. Methods Thirty infants with hepatitis syndrome were selected as observation group in Guilin Maternal and Child Health Care Hospital from Dec. 2013 to Dec. 2014,and 30 healthy infants were selected as control group. Results Before the treatment,the expression levels of the miRNA in the observation group were significantly higher than those in the control group (P<0.05). After the treatment,there was no difference in hsa-miR-433 between ganciclovir sensitive group and ganciclovir insensitive group in observation group (P>0.05),but hsa-miR-92,hsa-miR-96,and hsa-miR-183 had statistical significance (P<0.05); compared with before treatment,there were significant differences in hsa-miR-433,hsa-miR-96 in ganciclovir insensitive group of observation group after treatment (P<0.05); compared with before treatment,there were significant differences in hsa-miR-183 and hsa-miR-433 in ganciclovir sensitive group of observation group after treatment (P<0.05),but there were no significant differences in hsa-miR-92 and hsa-miR-96 in ganciclovir sensitive group of observation group after treatment (P>0.05). Conclusion The levels of miRNA in peripheral blood of patients with hepatitis syndrome caused by human cytomegalovirus may be changed,and the miRNA has certain guiding significance for the clinical treatment of hepatitis syndrome infants.

Hepatitis syndrome; Cytomegalovirus; Infant; miRNA

10.3969/j.issn.1006-5709.2016.02.016

唐文诗，主治医师，研究方向：新生儿相关疾病。E-mail: 42345378@qq.com

R575.1

A

1006-5709(2016)02-0178-03

2015-02-04