光纤传感过程分析温度对苯妥英钠片溶出度测定的影响

张　露，杨晓艺，李新霞，李建光

(新疆医科大学药学院，乌鲁木齐　830011)



光纤传感过程分析温度对苯妥英钠片溶出度测定的影响

张露，杨晓艺，李新霞，李建光*

(新疆医科大学药学院，乌鲁木齐830011)

摘要：目的建立以光纤传感过程分析方法测定苯妥英钠片的溶出度，考察温度对溶出结果的影响。方法采用光纤药物溶出度实时测定仪分别在25和37 ℃条件下绘制标准曲线并测定苯妥英钠片的溶出度，测定波长和参比波长分别为258和300 nm，探头规格选择0.5 mm。结果25 和37 ℃条件下建立的标准曲线平均偏差为18.6%。结论温度对苯妥英钠的吸光度有影响，应在37 ℃条件下绘制标准曲线以测定溶出度。

关键词：苯妥英钠片；光纤传感；溶出度；温度

苯妥英钠作为抗癫痫药已有40多年的历史，是治疗癫痢病发作和精神运动性发作的首选药[1]。《中国药典》规定溶出度测定是苯妥英钠质量标准的必检项目。一般溶出度实验是在37 ℃条件下进行的，传统的溶出度测定是经取样、过滤和稀释等前处理后采用UV或HPLC法在室温条件下测定 (标准曲线也是在25 ℃下绘制)。光纤药物溶出度实时测定仪(Fiber-Optic Dissolution Test System，FODT)为原位在线测定，溶出和检测均在37 ℃条件下进行，所以当温度对测定影响较大时，也应在同一温度下绘制标准曲线和测定溶出度[2-4]。

紫外可见光谱为分子光谱，对温度的变化比较敏感，温度的高低会影响水样的分子运动和化学反应，特别是原子外层电子更易受温度的影响而发生吸收光谱的转移，造成吸光度的改变[5-8]。一般情况下,温度对大部分药物的吸光度测定无影响，但温度对盐酸二甲双胍片的吸光度影响较大[9]，预实验发现苯妥英钠的吸光度对温度敏感。

本实验通过在25和37 ℃条件下分别建立苯妥英钠的标准曲线，考察不同温度对苯妥英钠吸光度测定的差异。实验结果证明，温度对苯妥英钠吸光度的影响将引入18.6%(25与37 ℃)的误差，因此在苯妥英钠片溶出度过程分析时，对照品的标准曲线制作需与测定时的温度一致，即37 ℃。

1仪器与试药

1.1仪器电子天平(AGl35，梅特勒-托利多仪器有限公司)；光纤药物溶出度过程监测仪(FODT-601，新疆富科思生物技术有限公司)；真空脱气仪(ZKT-18，天大天发科技有限公司)；超纯水机(Ultra Pure UPF，上海禾泰仪器有限公司)。

1.2试药苯妥英钠对照品(中国食品药品检定研究院，100210-201303，质量分数为99.0%)；苯妥英钠片(山西云鹏制药有限公司，A131101，规格为50 mg)；水为脱气水，临用前脱气处理。

2方法与结果

2.1溶液的配制储备液的配制：精密称取苯妥英钠对照品13.66 mg，置于10 mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，得到质量浓度为1 352 mg·L-1的储备液。

对照品溶液：分别精密量取储备液0.5，1.0，1.5，2.0和2.5 mL，置于25 mL量瓶中，用脱气水定容至刻度，得到质量浓度分别为27.05，54.08，81.12，108.16和135.20 mg·L-1的苯妥英钠系列溶液，对应于规格为50 mg的苯妥英钠片，其相对溶出率分别为27.05%，54.08%，81.12%，108.16%和135.20%。

供试品溶液：精密称取10片苯妥英钠片，平均每片质量为76.71 mg。将10片苯妥英钠片置于研钵中，研磨成细粉，精密称取10.81 mg药品粉末，置于50 mL量瓶中，制成质量浓度为216.20 mg·L-1的溶液。

2.2辅料干扰的考察取供试品溶液及供试品溶液过滤后的续滤液，分别在FODT 系统进行紫外扫描后作吸收光谱差谱图，以波长为横坐标，在同一波长处用未过滤溶液的吸光度值减去过滤后溶液的吸光度值，以此差值为纵坐标回归，得辅料的吸收曲线，见图1。吸收光谱差谱图显示，有辅料的供试品溶液在300～600 nm范围内，吸光度在0.035左右，供试品溶液未过滤时溶液中有辅料的干扰，故选择300 nm为参比波长，以消除辅料干扰。

图1苯妥英钠吸收光谱差谱图

Fig.1 Absorption differential spectrum of phenytoin sodium

2.3检测波长和探头规格的确定取质量浓度为108.16 mg·L-1的苯妥英钠对照品溶液，置于FODT-601对照品模式下，采用规格为5 mm(10 mm光程)的探头，在200～600 nm波长范围内扫描吸收光谱，结果苯妥英钠紫外吸收光谱为末端吸收，药典规定其在258 nm波长处检测吸光度，吸光度在0.3～0.7范围内，因此选择规格为5 mm的探头，测定波长为258 nm。

2.4标准曲线的绘制取2.1项下苯妥英钠对照品溶液，置于FODT中，分别在25和37 ℃时制作标准曲线，设置检测波长为258 nm，参比波长为300 nm，光纤探头规格为0.5 mm，测定系列质量浓度苯妥英钠对照品溶液的吸光度值，与相对溶出率进行线性回归，得到6组线性方程。见表1。

表125与37 ℃条件下标准曲线

Tab.1 Standard curves under the condition of 25 and 37 ℃

通道标准曲线(25℃)r标准曲线(37℃)r1C=350.93A-28.160.9994C=369.47A-24.870.99942C=323.70A-22.790.9992C=332.80A-14.950.99903C=278.54A-8.290.9993C=294.60A-4.030.99944C=251.55A-1.690.9993C=302.50A-7.160.99935C=280.11A-10.360.9994C=342.79A-5.670.99906C=287.58A-13.380.9995C=310.80A-8.950.9992

结果表明，在同一通道中，37 ℃条件下建立的标准曲线k值均高于25 ℃条件下所建标准曲线k值，说明温度对苯妥英钠吸光度有影响，所以应该在同一温度条件下建立标准曲线。

2.5溶出度测定苯妥英钠片溶出度的测定条件：取本品，参考《中国药典》2010年版二部附录ⅩC第二法(桨法)，将500 mL水作为溶出介质，转速为100 r·min-1，温度为37 ℃，测定波长为258 nm，参比波长为300 nm，探头规格为0.5 mm，检测时间为45 min。45 min后，苯妥英钠片溶出度均达到90%以上，符合规定，见图2。

图2苯妥英钠片25 和 37 ℃平均溶出曲线

Fig.2 Average dissolution curves of Phenytoin Sodium Tablets at 25 and 37 ℃

FODT实时测定苯妥英钠吸光度，计算机软件根据标准曲线将吸光度转化计算为实时溶出度，3 min时，25和37 ℃条件下累计溶出百分率分别为42.0%和57.6%，相差15.6%。10 min时，25和37 ℃条件下累计溶出百分率分别为76.2%和97.8%，相差21.6%。结果表明，在同一时间点25和37 ℃条件下，将测定的吸光度值代入不同温度下所建立的标准曲线，计算出的溶出度值有明显差异。

3结论

以供试品续滤液扫描紫外吸收光谱图并作差谱，发现辅料有吸收且吸光度恒定不变，故采用双波长法实时扣除辅料对苯妥英钠吸光度所产生的影响。

当在25和37 ℃条件下绘制苯妥英钠的标准曲线时，标准曲线k值差异显著，2个不同温度下溶出度的平均偏差为18.6%，由此可知，温度对苯妥英钠的吸光度影响较大；应在同一温度条件下绘制标准曲线并测定苯妥英钠吸光度，以消除温度对苯妥英钠吸光度的影响。

FODT在37 ℃条件下实时检测药物吸光度并根据标准曲线转化计算为药物的实时溶出度，因此建议在使用FODT测定药物溶出度时应该在37 ℃条件下绘制标准曲线，以消除温度对药物吸光度的影响，从而得到准确的溶出度值，更接近药物的真实溶出过程。

参考文献：

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[4]李建光，张奇洲，姚军.光纤过程检测硫酸亚铁缓释片释放度[J].光谱实验室，2013，30(6):3292-3295.

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Study on the effect of temperature on the dissolution test of Phenytoin Sodium Tablets with fiber-opticin-situdissolution system

ZHANG Lu，YANG Xiaoyi，LI Xinxia，LI Jianguang*

(Department of Pharmacy，Xinjiang Medical University，Urumqi 830011，China)

Abstract:ObjectiveTo establish an in-situ process dissolution test method of Phenytoin Sodium Tablets，and to study the effect of temperature on dissolution. MethodsThe standard curves were plotted at 25 and 37 ℃.The drug dissolution rate was determined at respective temperature by using a fiber-optic dissolution test system(FODT).The test and reference wavelengthes were set at 258 and 300 nm, respectively，and the path-length of probes was 0.5 mm. ResultsThe curves of 25 and 37 ℃ average deviation of standard was 18.6%. ConclusionAs temperature influenced on the absorbance，standard curve should be made at 37 ℃，also at which the drug dissolution rate was determinecl .

Key words:Phenytoin Sodium Tablets；fiber-optic；dissolution；temperature

(收稿日期：2015-10-12)

中图分类号：R944

文献标志码：A

文章编号：1004-2407(2016)03-0292-03

doi:10.3969/j.issn.1004-2407.2016.03.021

*通信作者：李建光，男，博士，教授，硕士研究生导师.

作者简介：张露，女，硕士研究生.

基金项目：新疆维吾尔自治区科技创新人才项目(编号：2014721011).